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产品资料

pDsRed2-ER哺乳细胞内质网定位质粒

pDsRed2-ER哺乳细胞内质网定位质粒
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  • 产品名称:pDsRed2-ER哺乳细胞内质网定位质粒
  • 产品型号:
  • 产品展商:XYbscience
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简单介绍
pDsRed2-ER哺乳细胞内质网定位质粒是一种哺乳动物表达载体,用于标记活细胞内质网。pDsRed2-ER哺乳细胞内质网定位质粒是按人的密码子优化过的野生型DsRed变体,可以更快的成熟和较低的非特异性聚集。
产品描述

pDsRed2-ER哺乳细胞内质网定位质粒

  • 产品信息
  • 基本信息
  • 质粒简介
  • 质粒图谱
  • 质粒序列

产品信息

产品货号 产品名称 产品规格 优惠价
XY0141 pDsRed2-ER哺乳细胞内质网定位质粒

5μg

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使用说明

信裕质粒平台的各批次质粒菌株发货前均经过严格的多重验证,如存在质量问题,请在收到产品的三个月内通知我司。收到质粒后请短暂离心,加入20μl ddH2O溶解质粒,取2μl转化至对应感受态中,挑取单克隆重新提取质粒后使用。如需获取其他详细信息请登录我司官网查询。

基本信息

启动子: CMV promoter
复制子: pUC ori,f1 ori
终止子: SV40 poly(A) signal
质粒分类: 哺乳系列质粒;哺乳荧光质粒;哺乳红色质粒
质粒大小: 4757bp
质粒标签: N-DsRed2
原核抗性: 卡那霉素Kan(50μg/ml)
筛选标记: 新霉素Neo/G418
克隆菌株: DH5α等大肠杆菌
培养条件: 37℃,有氧 LB
表达宿主: 293T等哺乳细胞
培养条件: 无须诱导,瞬时表达
诱导方式: 无需诱导,瞬时表达
5'测序引物: CMV-F(CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG)
3'测序引物: SV40-polyA-R(GAAATTTGTGATGCTATTGC)
备注: 哺乳细胞内质网标记质粒

质粒简介

          pDsRed2-ER是一种哺乳动物表达载体,用于标记活细胞内质网。DsRed2基因是按人的密码子优化过的野生型DsRed变体,可以更快的成熟和较低的非特异性聚集。     
        The vector encodes a fusion consisting of Discosoma sp. red fluorescent protein; the endoplasmic reticulum (ER) targeting sequence of calreticulin , fused to the 5' end of DsRed2; and the ER retention sequence, KDEL, fused to the 3' end of DsRed2. DsRed2 is a human codon-optimized  variant of wild-type DsRed that has been engineered for faster maturation and lower non-specific aggregation.To drive expression of DsRed2, this vector contains the immediate early promoter of cytomegalovirus (PCMV IE). SV40 polyadenylation signals downstream of the DsRed2 gene direct proper processing of the 3'-end of the DsRed2 mRNA transcript. The vector also contains an SV40 origin for replication in any mammalian cell line that expresses the SV40 Tantigen, a pUC origin of replication for propagation in E. coli, and an f1 origin for single-stranded DNA production. A neomycin resistance cassette—consisting of the SV40 early promoter (PSV40e), the neomycin/kanamycin resistance gene of Tn5 (Neor/Kanr), and polyadenylation signals from the herpes simplex virus thymidine kinase (HSV TK poly A) gene— allows stably transfected eukaryotic cells to be selected using G418 . A bacterial promoter (P) upstream of this cassette drives expression of the gene encoding kanamycin resistance in E. coli.pDsRed2-ER can be introduced into mammalian cells using any standard transfection method. If required, stable transformants can be selected using G418 .

质粒图谱


质粒序列

LOCUS       Exported                4757 bp ds-DNA    circular SYN 18-10-2015
KEYWORDS    Untitled 6
SOURCE      synthetic DNA construct
  ORGANISM  synthetic DNA construct
REFERENCE   1  (bases 1 to 4757)
  AUTHORS   admin
  TITLE     Direct Submission
  JOURNAL   Exported 2015-10-18  from MiaoLingPlasmid
            http://www.miaolingbio.com
FEATURES             Location/Qualifiers
     source          1..4757
                     /organism="synthetic DNA construct"
                     /mol_type="other DNA"
     enhancer        61..364
                     /note="CMV enhancer"
                     /note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"
     promoter        365..568
                     /note="CMV promoter"
                     /note="human cytomegalovirus (CMV) immediate early 
                     promoter"
     CDS             663..1337
                     /codon_start=1
                     /product="improved tetrameric variant of DsRed fluorescent 
                     protein"
                     /note="DsRed2"
                     /note="mammalian codon-optimized"
                     /translation="MASSENVITEFMRFKVRMEGTVNGHEFEIEGEGEGRPYEGHNTVK
                     LKVTKGGPLPFAWDILSPQFQYGSKVYVKHPADIPDYKKLSFPEGFKWERVMNFEDGGV
                     ATVTQDSSLQDGCFIYKVKFIGVNFPSDGPVMQKKTMGWEASTERLYPRDGVLKGETHK
                     ALKLKDGGHYLVEFKSIYMAKKPVQLPGYYYVDAKLDITSHNEDYTIVEQYERTEGRHH
                     LFL"
     misc_feature    1365..1421
                     /note="MCS"
                     /note="multiple cloning site"
     polyA_signal    1545..1666
                     /note="SV40 poly(A) signal"
                     /note="SV40 polyadenylation signal"
     rep_origin      complement(1673..2128)
                     /direction=LEFT
                     /note="f1 ori"
                     /note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow 
                     indicates direction of (+) strand synthesis"
     promoter        2155..2259
                     /gene="bla"
                     /note="AmpR promoter"
     promoter        2261..2618
                     /note="SV40 promoter"
                     /note="SV40 enhancer and early promoter"
     rep_origin      2469..2604
                     /note="SV40 ori"
                     /note="SV40 origin of replication"
     CDS             2653..3447
                     /codon_start=1
                     /gene="aph(3')-II (or nptII)"
                     /product="aminoglycoside phosphotransferase from Tn5"
                     /note="NeoR/KanR"
                     /note="confers resistance to neomycin, kanamycin, and G418 
                     (Geneticin(R))"
                     /translation="MIEQDGLHAGSPAAWVERLFGYDWAQQTIGCSDAAVFRLSAQGRP
                     VLFVKTDLSGALNELQDEAARLSWLATTGVPCAAVLDVVTEAGRDWLLLGEVPGQDLLS
                     SHLAPAEKVSIMADAMRRLHTLDPATCPFDHQAKHRIERARTRMEAGLVDQDDLDEEHQ
                     GLAPAELFARLKASMPDGEDLVVTHGDACLPNIMVENGRFSGFIDCGRLGVADRYQDIA
                     LATRDIAEELGGEWADRFLVLYGIAAPDSQRIAFYRLLDEFF"
     polyA_signal    3679..3726
                     /note="HSV TK poly(A) signal"
                     /note="herpesvirus thymidine kinase polyadenylation signal"
     rep_origin      4055..4643
                     /direction=RIGHT
                     /note="ori"
                     /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of 
                     replication"
ORIGIN
        1 tagttattaa tagtaatcaa ttacggggtc attagttcat agcccatata tggagttccg
       61 cgttacataa cttacggtaa atggcccgcc tggctgaccg cccaacgacc cccgcccatt
      121 gacgtcaata atgacgtatg ttcccatagt aacgccaata gggactttcc attgacgtca
      181 atgggtggag tatttacggt aaactgccca cttggcagta catcaagtgt atcatatgcc
      241 aagtacgccc cctattgacg tcaatgacgg taaatggccc gcctggcatt atgcccagta
      301 catgacctta tgggactttc ctacttggca gtacatctac gtattagtca tcgctattac
      361 catggtgatg cggttttggc agtacatcaa tgggcgtgga tagcggtttg actcacgggg
      421 atttccaagt ctccacccca ttgacgtcaa tgggagtttg ttttggcacc aaaatcaacg
      481 ggactttcca aaatgtcgta acaactccgc cccattgacg caaatgggcg gtaggcgtgt
      541 acggtgggag gtctatataa gcagagctgg tttagtgaac cgtcagatcc gctagcatgc
      601 tgctatccgt gccgttgctg ctcggcctcc tcggcctggc cgtcgccgac cggtcgcaca
      661 ccatggcctc ctccgagaac gtcatcaccg agttcatgcg cttcaaggtg cgcatggagg
      721 gcaccgtgaa cggccacgag ttcgagatcg agggcgaggg cgagggccgc ccctacgagg
      781 gccacaacac cgtgaagctg aaggtgacca agggcggccc cctgcccttc gcctgggaca
      841 tcctgtcccc ccagttccag tacggctcca aggtgtacgt gaagcacccc gccgacatcc
      901 ccgactacaa gaagctgtcc ttccccgagg gcttcaagtg ggagcgcgtg atgaacttcg
      961 aggacggcgg cgtggcgacc gtgacccagg actcctccct gcaggacggc tgcttcatct
     1021 acaaggtgaa gttcatcggc gtgaacttcc cctccgacgg ccccgtgatg cagaagaaga
     1081 ccatgggctg ggaggcctcc accgagcgcc tgtacccccg cgacggcgtg ctgaagggcg
     1141 agacccacaa ggccctgaag ctgaaggacg gcggccacta cctggtggag ttcaagtcca
     1201 tctacatggc caagaagccc gtgcagctgc ccggctacta ctacgtggac gccaagctgg
     1261 acatcacctc ccacaacgag gactacacca tcgtggagca gtacgagcgc accgagggcc
     1321 gccaccacct gttcctgaga tcgtacaaga aggacgagct gtaaagatct cgagctcaag
     1381 cttcgaattc tgcagtcgac ggtaccgcgg gcccgggatc caccggatct agataactga
     1441 tcataatcag ccataccaca tttgtagagg ttttacttgc tttaaaaaac ctcccacacc
     1501 tccccctgaa cctgaaacat aaaatgaatg caattgttgt tgttaacttg tttattgcag
     1561 cttataatgg ttacaaataa agcaatagca tcacaaattt cacaaataaa gcattttttt
     1621 cactgcattc tagttgtggt ttgtccaaac tcatcaatgt atcttaaggc gtaaattgta
     1681 agcgttaata ttttgttaaa attcgcgtta aatttttgtt aaatcagctc attttttaac
     1741 caataggccg aaatcggcaa aatcccttat aaatcaaaag aatagaccga gatagggttg
     1801 agtgttgttc cagtttggaa caagagtcca ctattaaaga acgtggactc caacgtcaaa
     1861 gggcgaaaaa ccgtctatca gggcgatggc ccactacgtg aaccatcacc ctaatcaagt
     1921 tttttggggt cgaggtgccg taaagcacta aatcggaacc ctaaagggag cccccgattt
     1981 agagcttgac ggggaaagcc ggcgaacgtg gcgagaaagg aagggaagaa agcgaaagga
     2041 gcgggcgcta gggcgctggc aagtgtagcg gtcacgctgc gcgtaaccac cacacccgcc
     2101 gcgcttaatg cgccgctaca gggcgcgtca ggtggcactt ttcggggaaa tgtgcgcgga
     2161 acccctattt gtttattttt ctaaatacat tcaaatatgt atccgctcat gagacaataa
     2221 ccctgataaa tgcttcaata atattgaaaa aggaagagtc ctgaggcgga aagaaccagc
     2281 tgtggaatgt gtgtcagtta gggtgtggaa agtccccagg ctccccagca ggcagaagta
     2341 tgcaaagcat gcatctcaat tagtcagcaa ccaggtgtgg aaagtcccca ggctccccag
     2401 caggcagaag tatgcaaagc atgcatctca attagtcagc aaccatagtc ccgcccctaa
     2461 ctccgcccat cccgccccta actccgccca gttccgccca ttctccgccc catggctgac
     2521 taattttttt tatttatgca gaggccgagg ccgcctcggc ctctgagcta ttccagaagt
     2581 agtgaggagg cttttttgga ggcctaggct tttgcaaaga tcgatcaaga gacaggatga
     2641 ggatcgtttc gcatgattga acaagatgga ttgcacgcag gttctccggc cgcttgggtg
     2701 gagaggctat tcggctatga ctgggcacaa cagacaatcg gctgctctga tgccgccgtg
     2761 ttccggctgt cagcgcaggg gcgcccggtt ctttttgtca agaccgacct gtccggtgcc
     2821 ctgaatgaac tgcaagacga ggcagcgcgg ctatcgtggc tggccacgac gggcgttcct
     2881 tgcgcagctg tgctcgacgt tgtcactgaa gcgggaaggg actggctgct attgggcgaa
     2941 gtgccggggc aggatctcct gtcatctcac cttgctcctg ccgagaaagt atccatcatg
     3001 gctgatgcaa tgcggcggct gcatacgctt gatccggcta cctgcccatt cgaccaccaa
     3061 gcgaaacatc gcatcgagcg agcacgtact cggatggaag ccggtcttgt cgatcaggat
     3121 gatctggacg aagagcatca ggggctcgcg ccagccgaac tgttcgccag gctcaaggcg
     3181 agcatgcccg acggcgagga tctcgtcgtg acccatggcg atgcctgctt gccgaatatc
     3241 atggtggaaa atggccgctt ttctggattc atcgactgtg gccggctggg tgtggcggac
     3301 cgctatcagg acatagcgtt ggctacccgt gatattgctg aagagcttgg cggcgaatgg
     3361 gctgaccgct tcctcgtgct ttacggtatc gccgctcccg attcgcagcg catcgccttc
     3421 tatcgccttc ttgacgagtt cttctgagcg ggactctggg gttcgaaatg accgaccaag
     3481 cgacgcccaa cctgccatca cgagatttcg attccaccgc cgccttctat gaaaggttgg
     3541 gcttcggaat cgttttccgg gacgccggct ggatgatcct ccagcgcggg gatctcatgc
     3601 tggagttctt cgcccaccct agggggaggc taactgaaac acggaaggag acaataccgg
     3661 aaggaacccg cgctatgacg gcaataaaaa gacagaataa aacgcacggt gttgggtcgt
     3721 ttgttcataa acgcggggtt cggtcccagg gctggcactc tgtcgatacc ccaccgagac
     3781 cccattgggg ccaatacgcc cgcgtttctt ccttttcccc accccacccc ccaagttcgg
     3841 gtgaaggccc agggctcgca gccaacgtcg gggcggcagg ccctgccata gcctcaggtt
     3901 actcatatat actttagatt gatttaaaac ttcattttta atttaaaagg atctaggtga
     3961 agatcctttt tgataatctc atgaccaaaa tcccttaacg tgagttttcg ttccactgag
     4021 cgtcagaccc cgtagaaaag atcaaaggat cttcttgaga tccttttttt ctgcgcgtaa
     4081 tctgctgctt gcaaacaaaa aaaccaccgc taccagcggt ggtttgtttg ccggatcaag
     4141 agctaccaac tctttttccg aaggtaactg gcttcagcag agcgcagata ccaaatactg
     4201 ttcttctagt gtagccgtag ttaggccacc acttcaagaa ctctgtatca ccgcctacat
     4261 acctcgctct gctaatcctg ttaccagtgg ctgctgccag tggcgataag tcgtgtctta
     4321 ccgggttgga ctcaagacga tagttaccgg ataaggcgca gcggtcgggc tgaacggggg
     4381 gttcgtgcac acagcccagc ttggagcgaa cgacctacac cgaactgaga tacctacagc
     4441 gtgagctatg agaaagcgcc acgcttcccg aagggagaaa ggcggacagg tatccggtaa
     4501 gcggcagggt cggaacagga gagcgcacga gggagcttcc agggggaaac gcctggtatc
     4561 tttatagtcc tgtcgggttt cgccacctct gacttgagcg tcgatttttg tgatgctcgt
     4621 caggggggcg gagcctatgg aaaaacgcca gcaacgcggc ctttttacgg ttcctggcct
     4681 tttgctggcc ttttgctcac atgttctttc ctgcgttatc ccctgattct gtggataacc
     4741 gtattaccgc catgcat
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