猪伪狂犬抗体试剂盒
【产品名称】
通用名:猪伪狂犬病毒IgG抗体检测试剂盒(酶联**法)
英文名:Diagnostic Kit for Antibodies to Porcine Pseudorabies disease virus (ELISA)
猪伪狂犬抗体试剂盒【包装规格】 96T/盒
【预期用途】
本试剂盒用于检测猪血清中猪伪狂犬病毒抗体。评估猪场猪伪狂犬疫苗**状况,感染猪的血清学诊断。本试剂盒不能区别疫苗**和野毒感染。
【原 理】
本试剂盒系由预包被猪伪狂犬病毒(PRV)抗原的微孔板和酶标记二抗及其他配套试剂组成,应用酶联**法(ELISA)原理检测猪血清或血浆中猪伪狂犬病毒特异性抗体。实验时,在包被板中加入对照血清和稀释的待检血清,经温育后,若样品中含有猪伪狂犬病毒的特异性抗体,则将与包被板上抗原结合,经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后;再加入酶标二抗,与包被板上抗原抗体复合物发生特异性结合;再经洗涤除去未结合的酶结合物,在孔中加TMB底物液,与酶反应形成蓝色产物,显色深浅与样品中的特异性抗体含量成正相关;加入终止液终止反应后,产物变为黄色;用酶标仪在450nm波长测定各反应孔中的吸光值,即可知样品是否含有特异性抗体。
猪伪狂犬抗体试剂盒【试剂盒组成】
1.
猪伪狂犬病毒抗原预包被微孔板条
96T×1
2.
酶标记物 (红盖)
11ml×1
3.
样品稀释液 (黄盖)
25ml×1
4.
20X浓缩洗涤液 (透明盖)
5.
底物液A (白盖)
6ml×1
6.
底物液B (黑盖)
7.
终止液 (黄盖)
8.
阳性对照 (红盖,已灭活)
0.5ml×1
9.
阴性对照 (绿盖,已灭活)
10.
盖板膜
1张
11.
自封袋
1个
12.
说明书
1份
【样品制备】
取动物全血,按常规方法制备血清,要求血清清亮,无溶血、无污染。样品短期可于2~8℃保存,长期需置-20℃保存。
猪伪狂犬抗体试剂盒【样品稀释】
用样品稀释液将待检血清按40倍稀释(如5μl血清加入195μl样品稀释液中,混匀)。阴、阳性对照不用稀释。
【洗涤液配制】
浓缩洗涤液使用前应恢复至室温(25℃左右),并摇动使沉淀的盐溶解,然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释。
【试验操作方法】
1.使用前将试剂盒置室温30分钟,恢复至室温。
2.取所需用量包被微孔板条,设空白、阴性及阳性对照各2孔,未用的板条尽快密封,2~8℃保存。
3.阴性、阳性对照孔分别加入阴性、阳性对照血清100μl;样品孔每孔加入稀释后的血清样本100μl;空白对照孔不加。
4.混匀,置37℃反应30分钟。
5.扣去孔内液体,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,重复洗涤5次,拍干。
6.每孔加酶标记物100μl(空白孔除外)。置37℃反应30分钟。
7.洗涤,同步骤5。
8.每孔依次加显色剂A、显色剂B各50μl,混匀,37℃避光反应10分钟。
9.每孔加终止液50μl,混匀,用空白孔调零,于450nm(630nm作参比波长)测定各孔吸光值(A)。
猪伪狂犬抗体试剂盒【结果判定】
1.样品A值≥0.38为阳性;样品A值在0.2到0.38之间为可疑;样品A值<0.2为阴性。
2.本实验结果为阴性或可疑时表明猪抗体水平不足,建议补打相应疫苗。
【试验方法的局限性】
该试验仅作为定性检测猪伪狂犬病毒IgG抗体,不能区别疫苗**和野毒感染。
【注意事项】
1.实验操作时需戴手套、穿工作衣,严格健全和执行**隔离制度,各种实验废弃物都应按传染物处理。
2.终止液具有腐蚀性,应避免接触皮肤和衣物,如不慎接触请立即用大量自来水冲洗。
3.微孔板从冷藏环境中取出时应恢复至室温方可开袋,未用完的微孔板需放入有干燥剂的密封袋中保存(包被板开封后请于2~8℃避光
保存,使用期限为1个月)
4.浓缩洗涤液在低温时容易结晶,使用时需恢复至室温以完全溶解。
5.洗涤时各孔均需加满液体,防止孔口有游离酶不能洗净。
6.用于检测的样品应保持新鲜。
7.试验结果的判定必须以酶标仪读数为准。
8.不同批号试剂组分不得混用。
【储 存】
原包装应储存于2~8℃保鲜冷藏,切勿冷冻。
【有效期】
有效期12个月;生产日期、有效期、生产批号见外包装。