鸡法氏囊抗体试剂盒

【产品名称】

通用名：鸡法氏囊IgY抗体检测试剂盒（酶联**法）

鸡法氏囊抗体试剂盒【包装规格】 96T/盒

【预期用途】 

      鸡法氏囊是目前危害国内养禽业的一种急性接触性病毒性传染病。疫苗**是预防和控制鸡法氏囊发生的*有效途径，而**后抗体水平的高低反映实际的疫苗**效果，直接关系到**鸡群对鸡法氏囊病毒的抵抗力。

    本试剂盒适用于不同品种、不同日龄鸡的血清中鸡法氏囊病毒特异性抗体的检测。可用于鸡法氏囊（全病毒）疫苗**效果评价、**时间的确定分析、地区鸡群鸡法氏囊**状况评价等。

【原    理】

本试剂盒系由预包被鸡法氏囊病毒重组抗原的微孔板和酶标记二抗及其他配套试剂组成，应用酶联**法（ELISA）原理检测鸡血清或血浆中鸡法氏囊病毒特异性抗体。实验时，在包被板中加入对照血清和稀释的待检血清，经温育后，若样品中含有鸡法氏囊病毒的特异性抗体，则将与包被板上抗原结合，经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后；再加入酶标二抗，与包被板上抗原抗体复合物发生特异性结合；再经洗涤除去未结合的酶结合物，在孔中加TMB底物液，与酶反应形成蓝色产物，显色深浅与样品中的特异性抗体含量成正相关；加入终止液终止反应后，产物变为黄色；用酶标仪在450nm波长测定各反应孔中的吸光值，即可知样品是否含有特异性抗体。

【试剂盒组成】

 鸡法氏囊抗体试剂盒【样品制备】  

  取动物全血，按常规方法制备血清，要求血清清亮，无溶血、无污染。样品短期可于2～8℃保存，长期需置-20℃保存。

【样品稀释】  

 用样品稀释液将待检血清按100倍稀释（如5μl血清加入495μl样品稀释液中，混匀）。阴、阳性对照不用稀释。
【洗涤液配制】

 浓缩洗涤液使用前应恢复至室温（25℃左右），并摇动使沉淀的盐溶解，然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释。
鸡法氏囊抗体试剂盒【试验操作方法】

 1.使用前将试剂盒置室温30分钟，恢复至室温。

 2.取所需用量微孔板条，设空白对照1孔、阴性/阳性对照各2孔，未用的板条尽快密封，2～8℃保存。

 3.空白对照孔加样品稀释液100μl；阴性/阳性对照孔分别加入阴性/阳性对照血清100μl；样品孔每孔加入稀释后的血清样品100μl。

 4.混匀，置37℃反应30分钟。

 5.扣去孔内液体，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，重复洗涤5次，拍干。

 6.每孔加酶标记物100μl（空白孔除外）。置37℃反应30分钟。

 7.洗涤，同步骤5。

 8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl，混匀，37℃避光反应10分钟。

 9.每孔加终止液50μl，混匀，用空白孔调零，于450nm(630nm作参比波长）测定各孔吸光值（A450）。

【结果判定】

 1.阴性对照：正常情况下，阴性对照孔A值≤0.10；

 2.阳性对照：正常情况下，阳性对照孔A值≥0.6；

 3.临界值（C.O）的计算：C.O=0.13+阴性对照孔均值（阴性对照孔均值低于0.07时以0.07计算）；

 4.结果判定：样品A值≥C.O为阳性；样品A值＜C.O为阴性。

【试验方法的局限性】

 该试验仅作为定性检测鸡血清或血浆中鸡法氏囊病毒IgY抗体，根据A值高低可作抗体水平强、中、弱的粗略评估。

鸡法氏囊抗体试剂盒【注意事项】

 1.实验操作时需戴手套、穿工作衣，严格健全和执行**隔离制度，各种实验废弃物都应按传染物处理。

 2.终止液具有腐蚀性，应避免接触皮肤和衣物，如不慎接触请立即用大量自来水冲洗。

 3.微孔板从冷藏环境中取出时应恢复至室温方可开袋，未用完的微孔板需放入有干燥剂的密封袋中保存(包被板开封后请于2～8℃避光

   保存，使用期限为1个月)。

 4.浓缩洗涤液在低温时容易结晶，使用时需恢复至室温以完全溶解。

 5.洗涤时各孔均需加满液体，防止孔口有游离酶不能洗净。

 6.用于检测的样品应保持新鲜。

 7.试验结果的判定必须以酶标仪读数为准。

 8.不同批号试剂组分不得混用。

【储  存】

 原包装应储存于2～8℃保鲜冷藏，切勿冷冻。

【有效期】

 有效期12个月;生产日期、有效期、生产批号见外包装。

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