pCMV-C-CFP (青色荧光蛋白)
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XY2623
1μg
888.00元
pCMV-C-CFP是自行研发的哺乳动物细胞表达质粒，用于表达C端含CFP(Cyan FluorescentProtein, 青色荧光蛋白)标签的融合蛋白。该质粒含有CMV启动子，可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达。在多克隆位点的后面有一个CFP的完整编码序列，因此在多克隆位点根据阅读框插入目的基因就可以表达C端含有CFP标签的融合蛋白。利用CFP的荧光特性可以比较容易地观察融合蛋白的表达水平和细胞内定位，也可以利用CFP抗体来检测或**沉淀融合蛋白。CFP与GFP高度相似，可尝试用GFP抗体检测CFP。该质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后，可以使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。 pCMV-C-CFP质粒的主要信息如下：
Feature Nucleotide
Position
CMV promoter
1-602
T3 promoter and T3 primer binding site
620-639
Multiple cloning site
651-740
CFP
741-1460
T7 promoter and T7 primer binding site
1510-1531
SV40 polyA signal
1543-1926
f1 origin of ss-DNA replication
2064-2370
bla promoter
2395-2519
SV40 promoter
2539-2877
Neomycin/kanamycin resistance ORF
2912-3703
HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal
3704-4162
pUC origin
4291-4958
pCMV-C-CFP质粒(5010bp)的图谱如下：
pCMV-C-CFP的多克隆位点的详细图谱如下：
SmaIPstI
SacI SacII NotI XmaI BamHI HindIII
651
GAGCTCCACC
GCGGTGGCGG
CCGCTCTAGC
CCGGGCGGAT
CCAAGCTTCT
CTCGAGGTGG
CGCCACCGCC
GGCGAGATCG
GGCCCGCCTA
GGTTCGAAGA
EcoRI EcoRV SalI XhoI XbaI CFP
701
GCAGGAATTC
GATATCGTCG
ACAGATCTCT
CGAGTCTAGA
ATGGTGAGCA
CGTCCTTAAG
CTATAGCAGC
TGTCTAGAGA
GCTCAGATCT
TACCACTCGT
751
AGGGCGAGGA
GCTGTTCACC
GGGGTGGTGC
CCATCCTGGT
CGAGCTGGAC
TCCCGCTCCT
CGACAAGTGG
CCCCACCACG
GGTAGGACCA
GCTCGACCTG
801
GGCGACGTAA
ACGGCCACAG
GTTCAGCGTG
TCCGGCGAGG
GCGAGGGCGA
CCGCTGCATT
TGCCGGTGTC
CAAGTCGCAC
AGGCCGCTCC
CGCTCCCGCT
851
TGCCACCTAC
GGCAAGCTGA
CCCTGAAGTT
CATCTGCACC
ACCGGCAAGC
ACGGTGGATG
CCGTTCGACT
GGGACTTCAA
GTAGACGTGG
TGGCCGTTCG
901
TGCCCGTGCC
CTGGCCCACC
CTCGTGACCA
CCCTGACCTG
GGGCGTGCAG
ACGGGCACGG
GACCGGGTGG
GAGCACTGGT
GGGACTGGAC
CCCGCACGTC
951
TGCTTCAGCC
GCTACCCCGA
CCACATGAAG
CAGCACGACT
TCTTCAAGTC
ACGAAGTCGG
CGATGGGGCT
GGTGTACTTC
GTCGTGCTGA
AGAAGTTCAG
1001
CGCCATGCCC
GAAGGCTACG
TCCAGGAGCG
TACCATCTTC
TTCAAGGACG
GCGGTACGGG
CTTCCGATGC
AGGTCCTCGC
ATGGTAGAAG
AAGTTCCTGC
1051
ACGGCAACTA
CAAGACCCGC
GCCGAGGTGA
AGTTCGAGGG
CGACACCCTG
TGCCGTTGAT
GTTCTGGGCG
CGGCTCCACT
TCAAGCTCCC
GCTGTGGGAC
1101
GTGAACCGCA
TCGAGCTGAA
GGGCATCGAC
TTCAAGGAGG
ACGGCAACAT
CACTTGGCGT
AGCTCGACTT
CCCGTAGCTG
AAGTTCCTCC
TGCCGTTGTA
1151
CCTGGGGCAC
AAGCTGGAGT
ACAACTACAT
CAGCCACAAC
GTCTATATCA
GGACCCCGTG
TTCGACCTCA
TGTTGATGTA
GTCGGTGTTG
CAGATATAGT
1201
CCGCCGACAA
GCAGAAGAAC
GGCATCAAGG
CCCACTTCAA
GATCCGCCAC
GGCGGCTGTT
CGTCTTCTTG
CCGTAGTTCC
GGGTGAAGTT
CTAGGCGGTG
1251
AACATCGAGG
ACGGCAGCGT
GCAGCTCGCC
GACCACTACC
AGCAGAACAC
TTGTAGCTCC
TGCCGTCGCA
CGTCGAGCGG
CTGGTGATGG
TCGTCTTGTG
1301
CCCCATCGGC
GACGGCCCCG
TGCTGCTGCC
CGACAACCAC
TACCTGAGCA
GGGGTAGCCG
CTGCCGGGGC
ACGACGACGG
GCTGTTGGTG
ATGGACTCGT
1351
CCCAGTCCGC
CCTGAGCAAA
GACCCCAACG
AGAAGCGCGA
TCACATGGTC
GGGTCAGGCG
GGACTCGTTT
CTGGGGTTGC
TCTTCGCGCT
AGTGTACCAG
1401
CTGCTGGAGT
TCGTGACCGC
CGCCGGGATC
ACTCTCGGCA
TGGACGAGCT
GACGACCTCA
AGCACTGGCG
GCGGCCCTAG
TGAGAGCCGT
ACCTGCTCGA
ApaI
1451
GTACAAGTAA
GGGCCCGGTA
CCTTAATTAA
TTAAGGTACC
AGGTAAGTGT
CATGTTCATT
CCCGGGCCAT
GGAATTAATT
AATTCCATGG
TCCATTCACA
pCMV-C-CFP中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pCMV-C-CFP)包括：
AclI
AfeI
AflII
AgeI
AhdI
AscI
AsiSI
BaeI
BbsI
BbvCI
BlpI
BmgBI
BsiWI
BsmBI
BspEI
BspQI
BssHII
BstEII
BstZ17I
EarI
EcoNI
FseI
NruI
PflMI
PmeI
PmlI
PpuMI
PshAI
PspXI
SapI
SbfI
ScaI
SgrAI
SpeI
SwaI
XcmI
XmnI
pCMV-C-CFP中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pCMV-C-CFP once)包括：
NdeI
CA`TA,TG
240
PspOMI
G`GGCC,C
1461
SnaBI
TAC|GTA
346
ApaII
G,GGCC`C
CspCI
,NN`(N)11CAA(N)5GTGG(N)10,NN`
380
PvuI
CG,AT`CG
1541
NheI
G`CTAG,C
597
BclI
T`GATC,A
1697
BmtI
G,CTAG`C
MfeI
C`AATT,G
1790
SacI
G,AGCT`C
HpaI
GTT|AAC
1803
Eco53kI
GAG|CTC
653
MluI
A`CGCG,T
1926
BstXI
CCAN,NNNN`NTGG
659
BsaXI
,NNN`(N)9AC(N)5CTCC(N)7,NNN`
2087
SacII
CC,GC`GG
660
DraIII
CAC,NNN`GTG
2153
NotI
GC`GGCC,GC
668
SfiI
GGCCN,NNN`NGGCC
2812
TspMI
C`CCGG,G
680
StuI
AGG|CCT
2861
XmaI
ClaI
AT`CG,AT
2880
SmaI
CCC|GGG
682
BspDI
BamHI
G`GATC,C
687
KasI
G`GCGC,C
3039
HindIII
A`AGCT,T
693
NarI
GG`CG,CC
3040
PstI
C,TGCA`G
699
SfoI
GGC|GCC
3041
EcoRI
G`AATT,C
705
PluTI
G,GCGC`C
EcoRV
GAT|ATC
713
MscI
TGG|CCA
3122
SalI
G`TCGA,C
717
Tth111I
GACN`N,NGTC
3158
AccI
GT`MK,AC
718
PflFI
BglII
A`GATC,T
723
BsrDI
GCAATG,NN`
3271
XhoI
C`TCGA,G
729
RsrII
CG`GWC,CG
3556
PaeR7I
BstBI
TT`CG,AA
3722
XbaI
T`CTAG,A
735
BsaI
GGTCTCN`NNNN,
4029
BcgI
,NN`(N)10CGA(N)6TGC(N)10,NN`
829
ApaLI
G`TGCA,C
4644
BsrGI
T`GTAC,A
1450
PciI
A`CATG,T
4958
pCMV-C-CFP质粒中推荐使用的测序引物序列如下： T3 primer (620-639): 5′-AATTAACCCTCACTAAAGGG-3′ C-CFP primer (852-873): 5′- GGGTCAGCTTGCCGTAGGTGGC -3′ pCMV-C-CFP的全序列信息：XY2623 pCMV-C-CFP-seq.txt pCMV-C-CFP质粒转染细胞后的表达效果请参考图1。
图1. pCMV-C-CFP质粒转染细胞后的表达效果图。左侧为明场照片，右侧为荧光照片。
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