pCMV-C-mCherry (红色荧光蛋白)
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XY2628-100μg
100μg
1086.00元
pCMV-C-mCherry是自行研发的哺乳动物细胞表达质粒,用于表达C端含mCherry (DsRed的突变体,一种非常明亮的红色荧光蛋白)标签的融合蛋白。该质粒含有CMV启动子,可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达。在多克隆位点的后面有一个mCherry的完整编码序列,因此在多克隆位点根据阅读框插入目的基因就可以表达C端含有mCherry标签的融合蛋白。利用mCherry的荧光特性可以比较容易地观察融合蛋白的表达水平和细胞内定位,也可以利用mCherry抗体来检测或**沉淀融合蛋白。mCherry与GFP没有序列同源性,不能使用GFP抗体检测mCherry。该质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后,可以使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。 pCMV-C-mCherry质粒的主要信息如下:
Feature Nucleotide
Position
CMV promoter
1-602
T3 promoter and T3 primer binding site
620-639
Multiple cloning site
651-736
mCherry
741-1451
T7 promoter and T7 primer binding site
1501-1522
SV40 polyAsignal
1534-1917
f1 origin of ss-DNA replication
2055-2361
bla promoter
2386-2510
SV40 promoter
2530-2868
Neomycin/kanamycin resistance ORF
2903-3694
HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal
3695-4153
pUC origin
4282-4949
pCMV-C-mCherry质粒(5001bp)的图谱如下:
pCMV-C-mCherry的多克隆位点的详细图谱如下:
SmaI
SacI SacII NotI XmaI BamHI HindIII
651
GAGCTCCACC
GCGGTGGCGG
CCGCTCTAGC
CCGGGCGGAT
CCAAGCTTCT
CTCGAGGTGG
CGCCACCGCC
GGCGAGATCG
GGCCCGCCTA
GGTTCGAAGA
EcoRI EcoRV SalI BglII XhoI XbaI mCherry
701
GCAGGAATTC
GATATCGTCG
ACAGATCTCT
CGAGTCTAGA
ATGGTGAGCA
CGTCCTTAAG
CTATAGCAGC
TGTCTAGAGA
GCTCAGATCT
TACCACTCGT
751
AGGGCGAGGA
GGATAACATG
GCCATCATCA
AGGAGTTCAT
GCGCTTCAAG
TCCCGCTCCT
CCTATTGTAC
CGGTAGTAGT
TCCTCAAGTA
CGCGAAGTTC
801
GTGCACATGG
AGGGCTCCGT
GAACGGCCAC
GAGTTCGAGA
TCGAGGGCGA
CACGTGTACC
TCCCGAGGCA
CTTGCCGGTG
CTCAAGCTCT
AGCTCCCGCT
851
GGGCGAGGGC
CGCCCCTACG
AGGGCACCCA
GACCGCCAAG
CTGAAGGTGA
CCCGCTCCCG
GCGGGGATGC
TCCCGTGGGT
CTGGCGGTTC
GACTTCCACT
901
CCAAGGGTGG
CCCCCTGCCC
TTCGCCTGGG
ACATCCTGTC
CCCTCAGTTC
GGTTCCCACC
GGGGGACGGG
AAGCGGACCC
TGTAGGACAG
GGGAGTCAAG
951
ATGTACGGCT
CCAAGGCCTA
CGTGAAGCAC
CCCGCCGACA
TCCCCGACTA
TACATGCCGA
GGTTCCGGAT
GCACTTCGTG
GGGCGGCTGT
AGGGGCTGAT
1001
CTTGAAGCTG
TCCTTCCCCG
AGGGCTTCAA
GTGGGAGCGC
GTGATGAACT
GAACTTCGAC
AGGAAGGGGC
TCCCGAAGTT
CACCCTCGCG
CACTACTTGA
1051
TCGAGGACGG
CGGCGTGGTG
ACCGTGACCC
AGGACTCCTC
CCTGCAGGAC
AGCTCCTGCC
GCCGCACCAC
TGGCACTGGG
TCCTGAGGAG
GGACGTCCTG
1101
GGCGAGTTCA
TCTACAAGGT
GAAGCTGCGC
GGCACCAACT
TCCCCTCCGA
CCGCTCAAGT
AGATGTTCCA
CTTCGACGCG
CCGTGGTTGA
AGGGGAGGCT
1151
CGGCCCCGTA
ATGCAGAAGA
AGACCATGGG
CTGGGAGGCC
TCCTCCGAGC
GCCGGGGCAT
TACGTCTTCT
TCTGGTACCC
GACCCTCCGG
AGGAGGCTCG
1201
GGATGTACCC
CGAGGACGGC
GCCCTGAAGG
GCGAGATCAA
GCAGAGGCTG
CCTACATGGG
GCTCCTGCCG
CGGGACTTCC
CGCTCTAGTT
CGTCTCCGAC
1251
AAGCTGAAGG
ACGGCGGCCA
CTACGACGCT
GAGGTCAAGA
CCACCTACAA
TTCGACTTCC
TGCCGCCGGT
GATGCTGCGA
CTCCAGTTCT
GGTGGATGTT
1301
GGCCAAGAAG
CCCGTGCAGC
TGCCCGGCGC
CTACAACGTC
AACATCAAGT
CCGGTTCTTC
GGGCACGTCG
ACGGGCCGCG
GATGTTGCAG
TTGTAGTTCA
1351
TGGACATCAC
CTCCCACAAC
GAGGACTACA
CCATCGTGGA
ACAGTACGAA
ACCTGTAGTG
GAGGGTGTTG
CTCCTGATGT
GGTAGCACCT
TGTCATGCTT
1401
CGCGCCGAGG
GCCGCCACTC
CACCGGCGGC
ATGGACGAGC
TGTACAAGTA
GCGCGGCTCC
CGGCGGTGAG
GTGGCCGCCG
TACCTGCTCG
ACATGTTCAT
ApaI
1451
GGGGCCCGGT
ACCTTAATTA
ATTAAGGTAC
CAGGTAAGTG
TACCCAATTC
CCCCGGGCCA
TGGAATTAAT
TAATTCCATG
GTCCATTCAC
ATGGGTTAAG
pCMV-C-mCherry中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pCMV-C-mCherry)包括:
AclI
AfeI
AflII
AgeI
AscI
AsiSI
BaeI
BcgI
BlpI
BmgBI
BsiWI
BsmBI
BspEI
BspQI
BssHII
BstZ17I
EarI
EcoNI
FseI
NruI
PmeI
PmlI
PpuMI
PshAI
PspXI
SapI
ScaI
SpeI
SwaI
XmnI
pCMV-C-mCherry中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pCMV-C-mCherry once)包括:
NdeI
CA`TA,TG
240
PflMI
CCAN,NNN`NTGG
1177
SnaBI
TAC|GTA
346
Bpu10I
CC`TNA,GC
1282
CspCI
,NN`(N)11CAA(N)5GTGG(N)10,NN`
380
BbvCI
CC`TCA,GC
NheI
G`CTAG,C
597
BsgI
GTGCAG(N)14,NN`
1333
BmtI
G,CTAG`C
SgrAI
CR`CCGG,YG
1422
SacI
G,AGCT`C
XcmI
CCANNNN,N`NNNNTGG
1426
Eco53kI
GAG|CTC
653
BsrGI
T`GTAC,A
1441
BstXI
CCAN,NNNN`NTGG
659
PspOMI
G`GGCC,C
1452
SacII
CC,GC`GG
660
G,GGCC`C
NotI
GC`GGCC,GC
668
PvuI
CG,AT`CG
1532
TspMI
C`CCGG,G
680
BclI
T`GATC,A
1688
XmaI
MfeI
C`AATT,G
1781
CCC|GGG
682
HpaI
GTT|AAC
1794
BamHI
G`GATC,C
687
BtsI
GCAGTG,NN`
1868
HindIII
A`AGCT,T
693
MluI
A`CGCG,T
1917
EcoRI
G`AATT,C
705
DraIII
CAC,NNN`GTG
2144
EcoRV
GAT|ATC
713
SfiI
GGCCN,NNN`NGGCC
2803
SalI
G`TCGA,C
717
ClaI
AT`CG,AT
2871
AccI
GT`MK,AC
718
BspDI
BglII
A`GATC,T
723
PflFI
GACN`N,NGTC
3149
XhoI
C`TCGA,G
729
Tth111I
PaeR7I
BsrDI
GCAATG,NN`
3262
XbaI
T`CTAG,A
735
RsrII
CG`GWC,CG
3547
AhdI
GACNN,N`NNGTC
934
BstBI
TT`CG,AA
3713
SbfI
CC,TGCA`GG
1092
BsaI
GGTCTCN`NNNN,
4020
BbsI
GAAGACNN`NNNN,
1176
PciI
A`CATG,T
4949
pCMV-C-mCherry质粒中推荐使用的测序引物序列如下: T3 primer (620-639): 5′-AATTAACCCTCACTAAAGGG-3′ C-mCherry primer (852-873): 5′CCTCGTAGGGGCGGCCCTCGCC-3′ pCMV-C-mCherry的全序列信息:XY2628 pCMV-C-mCherry-seq.txt pCMV-C-mCherry质粒转染细胞后的表达效果请参考图1。
图1. pCMV-C-mCherry质粒转染细胞后的表达效果图。左侧为明场照片,右侧为荧光照片。
包装清单:
包装
XY2628-1μg
1μg
—
说明书
1份
保存条件: -20℃保存。 注意事项: 本质粒未经书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。 本产品**于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或**,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。 为了您的**和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。