pCMV-N-DsRed (红色荧光蛋白)
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XY2705
1μg
888.00元
pCMV-N-DsRed是自行研发的哺乳动物细胞表达质粒，用于表达N端含DsRed (Discosoma sp. red fluorescent protein，香菇珊瑚红色荧光蛋白)标签的融合蛋白。该质粒含有CMV启动子，可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达。在多克隆位点的前面有一个DsRed的完整编码序列，并且在DsRed前面加入Kozak序列，因此在多克隆位点根据阅读框插入目的基因就可以表达N端含有DsRed标签的融合蛋白。利用DsRed的荧光特性可以比较容易地观察融合蛋白的表达水平和细胞内定位，也可以利用DsRed抗体来检测或**沉淀融合蛋白。DsRed与GFP没有序列同源性，不能使用GFP抗体检测DsRed。该质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后，可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。 pCMV-N-DsRed质粒的主要信息如下：
Feature Nucleotide
Position
CMV promoter
1-602
T3 promoter and T3 primer binding site
620-639
Kozak sepuence
656-662
DsRed
663-1337
Multiple cloning site
1338-1403
T7 promoter and T7 primer binding site
1446-1468
SV40 polyA signal
1481-1863
f1 origin of ss-DNA replication
2001-2307
bla promoter
2332-2451
SV40 promoter
2476-2814
Neomycin/kanamycin resistance ORF
2849-3641
HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal
3642-4099
pUC origin
4226-4892
pCMV-N-DsRed质粒(4947bp)的图谱如下：
pCMV-N-DsRed的多克隆位点的详细图谱如下：
SacI Kozak DsRedM
651
GAGCTCGCCA
CC
ATGGACAA
CACCGAGGAC
GTCATCAAGG
AGTTCATGCA
CTCGAGCGGT
GG
TACCTGTT
GTGGCTCCTG
CAGTAGTTCC
TCAAGTACGT
701
GTTCAAGGTG
CGCATGGAGG
GCTCCGTGAA
CGGCCACTAC
TTCGAGATCG
CAAGTTCCAC
GCGTACCTCC
CGAGGCACTT
GCCGGTGATG
AAGCTCTAGC
751
AGGGCGAGGG
CGAGGGCAAG
CCCTACGAGG
GCACCCAGAC
CGCCAAGCTG
TCCCGCTCCC
GCTCCCGTTC
GGGATGCTCC
CGTGGGTCTG
GCGGTTCGAC
801
CAGGTGACCA
AGGGCGGCCC
CCTGCCCTTC
GCCTGGGACA
TCCTGTCCCC
GTCCACTGGT
TCCCGCCGGG
GGACGGGAAG
CGGACCCTGT
AGGACAGGGG
851
CCAGTTCCAG
TACGGCTCCA
AGGCCTACGT
GAAGCACCCC
GCCGACATCC
GGTCAAGGTC
ATGCCGAGGT
TCCGGATGCA
CTTCGTGGGG
CGGCTGTAGG
901
CCGACTACAT
GAAGCTGTCC
TTCCCCGAGG
GCTTCACCTG
GGAGCGCTCC
GGCTGATGTA
CTTCGACAGG
AAGGGGCTCC
CGAAGTGGAC
CCTCGCGAGG
951
ATGAACTTCG
AGGACGGCGG
CGTGGTGGAG
GTGCAGCAGG
ACTCCTCCCT
TACTTGAAGC
TCCTGCCGCC
GCACCACCTC
CACGTCGTCC
TGAGGAGGGA
1001
GCAGGACGGC
ACCTTCATCT
ACAAGGTGAA
GTTCAAGGGC
GTGAACTTCC
CGTCCTGCCG
TGGAAGTAGA
TGTTCCACTT
CAAGTTCCCG
CACTTGAAGG
1051
CCGCCGACGG
CCCCGTAATG
CAGAAGAAGA
CTGCCGGCTG
GGAGCCCTCC
GGCGGCTGCC
GGGGCATTAC
GTCTTCTTCT
GACGGCCGAC
CCTCGGGAGG
1101
ACCGAGAAGC
TGTACCCCCA
GGACGGCGTG
CTGAAGGGCG
AGATCTCCCA
TGGCTCTTCG
ACATGGGGGT
CCTGCCGCAC
GACTTCCCGC
TCTAGAGGGT
1151
CGCCCTGAAG
CTGAAGGACG
GCGGCCACTA
CACCTGCGAC
TTCAAGACCG
GCGGGACTTC
GACTTCCTGC
CGCCGGTGAT
GTGGACGCTG
AAGTTCTGGC
1201
TGTACAAGGC
CAAGAAGCCC
GTGCAGCTGC
CCGGCAACCA
CTACGTGGAC
ACATGTTCCG
GTTCTTCGGG
CACGTCGACG
GGCCGTTGGT
GATGCACCTG
1251
TCCAAGCTGG
ACATCACCAA
CCACAACGAG
GACTACACCG
TGGTGGAGCA
AGGTTCGACC
TGTAGTGGTT
GGTGTTGCTC
CTGATGTGGC
ACCACCTCGT
BamHI HindIII
1301
GTACGAGCAC
GCCGAGGCCC
GCCACTCCGG
CTCCCAG
GGA
TCCAAGCTTC
CATGCTCGTG
CGGCTCCGGG
CGGTGAGGCC
GAGGGTC
CCT
AGGTTCGAAG
EcoRI EcoRV SalI XhoI XbaI SpeI ApaI
1351
TGCAGGAATT
CGATATCGTC
GACAGATCTC
TCGAGTCTAG
AACTAGTGGG
ACGTCCTTAA
GCTATAGCAG
CTGTCTAGAG
AGCTCAGATC
TTGATCACCC
pCMV-N-DsRed中���有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pCMV-N-DsRed)包括：
AclI
AflII
AgeI
AscI
AsiSI
BaeI
BcgI
BlpI
BmgBI
Bpu10I
BsiWI
BsmBI
BspQI
BssHII
BstXI
BstZ17I
EarI
EcoNI
NruI
PmeI
PmlI
PpuMI
PshAI
PspXI
SapI
ScaI
SgrAI
SmaI
SrfI
SwaI
XcmI
XmaI
XmnI
pCMV-N-DsRed中的单酶切位点（Restriction enzymes that cut pCMV-N-DsRed once）包括：
NdeI
CA`TA,TG
240
PspOMI
G`GGCC,C
1398
SnaBI
TAC|GTA
346
ApaI
G,GGCC`C
CspCI
,NN`(N)11CAA(N)5GTGG(N)10,NN`
380
PvuI
CG,AT`CG
1478
NheI
G`CTAG,C
597
BclI
T`GATC,A
1634
BmtI
G,CTAG`C
MfeI
`AATT,G
1727
SacI
G,AGCT`C
HpaI
GTT|AAC
1740
Eco53kI
GAG|CTC
653
BtsI
GCAGTG,NN`
1814
BstEII
G`GTNAC,C
803
MluI
A`CGCG,T
1863
AhdI
GACNN,N`NNGTC
841
SfiI
GGCCN,NNN`NGGCC
2749
AfeI
AGC|GCT
945
ClaI
AT`CG,AT
2873
SbfI
CC,TGCA`GG
999
BspDI
BbsI
GAAGACNN`NNNN,
1083
EagI
C`GGCC,G
2939
BsrGI
T`GTAC,A
KasI
G`GCGC,C
3032
PflMI
CCAN,NNN`NTGG
1241
PluTI
G,GCGC`C
AleI
CACNN|NNGTG
1290
NarI
GG`CG,CC
3033
BamHI
G`GATC,C
1338
SfoI
GGC|GCC
3034
HindIII
A`AGCT,T
1344
MscI
TGG|CCA
3115
EcoRI
G`AATT,C
1356
PflFI
GACN`N,NGTC
3151
EcoRV
GAT|ATC
1364
Tth111I
SalI
G`TCGA,C
1368
BsrDI
GCAATG,NN`
3264
AccI
GT`MK,AC
1369
RsrII
CG`GWC,CG
3549
PaeR7I
C`TCGA,G
1380
BstBI
TT`CG,AA
3715
XhoI
BsaI
GGTCTCN`NNNN,
4022
XbaI
T`CTAG,A
1386
ApaLI
G`TGCA,C
4637
SpeI
A`CTAG,T
1392
PciI
A`CATG,T
4951
pCMV-N-DsRed质粒中推荐使用的测序引物序列如下： N-DsRed primer (1284-1303): 5′- TACACCGTGGTGGAGCAGTA -3′ T7 primer (1447-1468): 5′- GTAATACGACTCACTATAGGGC -3′ pCMV-N-DsRed的全序列信息：XY2705 pCMV-N-DsRed-seq.txt pCMV-N-DsRed质粒转染细胞后的表达效果请参考图1。
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