pCMV-N-mCherry (红色荧光蛋白)
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XY2711
1μg
888.00元
pCMV-N-mCherry是自行研发的哺乳动物细胞表达质粒，用于表达N端含mCherry (DsRed的突变体，一种非常明亮的红色荧光蛋白)标签的融合蛋白。该质粒含有CMV启动子，可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达。在多克隆位点的前面有一个mCherry的完整编码序列，因此在多克隆位点根据阅读框插入目的基因就可以表达N端含有mCherry标签的融合蛋白。利用mCherry的荧光特性可以比较容易地观察融合蛋白的表达水平和细胞内定位，也可以利用mCherry抗体来检测或**沉淀融合蛋白。mCherry与GFP没有序列同源性，不能使用GFP抗体检测mCherry。该质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后，可以使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。 pCMV-N-mCherry质粒的主要信息如下：
Feature Nucleotide
Position
CMV promoter
1-602
T3 promoter and T3 primer binding site
620-639
mCherry
677-1384
Multiple cloning site
1385-1474
T7 promoter and T7 primer binding site
1494-1515
SV40 polyA signal
1527-1910
f1 origin of ss-DNA replication
2048-2354
bla promoter
2379-2503
SV40 promoter
2523-2861
Neomycin/kanamycin resistance ORF
2896-3687
HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal
3688-4146
pUC origin
4275-4942
pCMV-N-mCherry质粒(4994bp)的图谱如下：
pCMV-N-mCherry的多克隆位点的详细图谱如下：
SacI mCherry
651
GAGCTCTAGC
GCTACCGGTC
GCCACC
ATGG
TGAGCAAGGG
CGAGGAGGAT
CTCGAGATCG
CGATGGCCAG
CGGTGG
TACC
ACTCGTTCCC
GCTCCTCCTA
701
AACATGGCCA
TCATCAAGGA
GTTCATGCGC
TTCAAGGTGC
ACATGGAGGG
TTGTACCGGT
AGTAGTTCCT
CAAGTACGCG
AAGTTCCACG
TGTACCTCCC
751
CTCCGTGAAC
GGCCACGAGT
TCGAGATCGA
GGGCGAGGGC
GAGGGCCGCC
GAGGCACTTG
CCGGTGCTCA
AGCTCTAGCT
CCCGCTCCCG
CTCCCGGCGG
801
CCTACGAGGG
CACCCAGACC
GCCAAGCTGA
AGGTGACCAA
GGGTGGCCCC
GGATGCTCCC
GTGGGTCTGG
CGGTTCGACT
TCCACTGGTT
CCCACCGGGG
851
CTGCCCTTCG
CCTGGGACAT
CCTGTCCCCT
CAGTTCATGT
ACGGCTCCAA
GACGGGAAGC
GGACCCTGTA
GGACAGGGGA
GTCAAGTACA
TGCCGAGGTT
901
GGCCTACGTG
AAGCACCCCG
CCGACATCCC
CGACTACTTG
AAGCTGTCCT
CCGGATGCAC
TTCGTGGGGC
GGCTGTAGGG
GCTGATGAAC
TTCGACAGGA
951
TCCCCGAGGG
CTTCAAGTGG
GAGCGCGTGA
TGAACTTCGA
GGACGGCGGC
AGGGGCTCCC
GAAGTTCACC
CTCGCGCACT
ACTTGAAGCT
CCTGCCGCCG
1001
GTGGTGACCG
TGACCCAGGA
CTCCTCCCTG
CAGGACGGCG
AGTTCATCTA
CACCACTGGC
ACTGGGTCCT
GAGGAGGGAC
GTCCTGCCGC
TCAAGTAGAT
1051
CAAGGTGAAG
CTGCGCGGCA
CCAACTTCCC
CTCCGACGGC
CCCGTAATGC
GTTCCACTTC
GACGCGCCGT
GGTTGAAGGG
GAGGCTGCCG
GGGCATTACG
1101
AGAAGAAGAC
CATGGGCTGG
GAGGCCTCCT
CCGAGCGGAT
GTACCCCGAG
TCTTCTTCTG
GTACCCGACC
CTCCGGAGGA
GGCTCGCCTA
CATGGGGCTC
1151
GACGGCGCCC
TGAAGGGCGA
GATCAAGCAG
AGGCTGAAGC
TGAAGGACGG
CTGCCGCGGG
ACTTCCCGCT
CTAGTTCGTC
TCCGACTTCG
ACTTCCTGCC
1201
CGGCCACTAC
GACGCTGAGG
TCAAGACCAC
CTACAAGGCC
AAGAAGCCCG
GCCGGTGATG
CTGCGACTCC
AGTTCTGGTG
GATGTTCCGG
TTCTTCGGGC
1251
TGCAGCTGCC
CGGCGCCTAC
AACGTCAACA
TCAAGTTGGA
CATCACCTCC
ACGTCGACGG
GCCGCGGATG
TTGCAGTTGT
AGTTCAACCT
GTAGTGGAGG
1301
CACAACGAGG
ACTACACCAT
CGTGGAACAG
TACGAACGCG
CCGAGGGCCG
GTGTTGCTCC
TGATGTGGTA
GCACCTTGTC
ATGCTTGCGC
GGCTCCCGGC
BamHIHindIII
1351
CCACTCCACC
GGCGGCATGG
ACGAGCTGTA
CAAG
GGATCC
AAGCTTCTGC
GGTGAGGTGG
CCGCCGTACC
TGCTCGACAT
GTTC
CCTAGG
TTCGAAGACG
EcoRIEcoRVSalIBglIIXhoIXbaISpeIApaI
1401
AGGAATTCGA
TATCGTCGAC
AGATCTCTCG
AGTCTAGAAC
TAGTGGGCCC
TCCTTAAGCT
ATAGCAGCTG
TCTAGAGAGC
TCAGATCTTG
ATCACCCGGG
pCMV-N-mCherry中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pCMV-N-mCherry)包括：
AclI
AflII
AscI
AsiSI
BaeI
BcgI
BlpI
BmgBI
BsiWI
BsmBI
BspEI
BspQI
BssHII
BstXI
BstZ17I
EarI
EcoNI
FseI
NotI
NruI
PmeI
PmlI
PpuMI
PshAI
PspXI
SacII
SapI
ScaI
SmaI
SwaI
TspMI
XmaI
XmnI
pCMV-N-mCherry中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pCMV-N-mCherry once)包括：
NdeI
CA`TA,TG
240
BglII
A`GATC,T
1421
SnaBI
TAC|GTA
346
PaeR7I
C`TCGA,G
1427
CspCI
,NN`(N)11CAA(N)5GTGG(N)10,NN`
382
XhoI
NheI
G`CTAG,C
597
XbaI
T`CTAG,A
1433
BmtI
G,CTAG`C
SpeI
A`CTAG,T
1439
SacI
G,AGCT`C
PspOMI
G`GGCC,C
1445
Eco53kI
GAG|CTC
653
ApaI
G,GGCC`C
AfeI
AGC|GCT
660
PvuI
CG,AT`CG
1525
AgeI
A`CCGG,T
664
BclI
T`GATC,A
1681
AhdI
GACNN,N`NNGTC
871
MfeI
C`AATT,G
1774
SbfI
CC,TGCA`GG
1032
HpaI
GTT|AAC
1787
BbsI
GAAGACNN`NNNN,
1112
BtsI
GCAGTG,NN`
1861
PflMI
CCAN,NNN`NTGG
1113
MluI
A`CGCG,T
1910
BbvCI
CC`TCA,GC
1215
DraIII
CAC,NNN`GTG
2137
Bpu10I
CC`TNA,GC
SfiI
GGCCN,NNN`NGGCC
2796
BsgI
GTGCAG(N)14,NN`
1269
ClaI
AT`CG,AT
2864
SgrAI
CR`CCGG,YG
1358
BspDI
XcmI
CCANNNN,N`NNNNTGG
1362
EagI
C`GGCC,G
2930
BsrGI
T`GTAC,A
1377
Tth111I
GACN`N,NGTC
3142
BamHI
G`GATC,C
1385
PflFI
HindIII
A`AGCT,T
1391
BsrDI
GCAATG,NN`
3257
EcoRI
G`AATT,C
1403
RsrII
CG`GWC,CG
3540
EcoRV
GAT|ATC
1411
BstBI
TT`CG,AA
3706
SalI
G`TCGA,C
1415
BsaI
GGTCTCN`NNNN,
4013
AccI
GT`MK,AC
1416
PciI
A`CATG,T
4942
pCMV-N-mCherry质粒中推荐使用的测序引物序列如下： N-mCherry primer (1284-1303): 5′-AGTTGGACATCACCTCCCAC-3′ T7 primer (1494-1515): 5′-GTAATACGACTCACTATAGGGC-3′ pCMV-N-mCherry的全序列信息：XY2711 pCMV-N-mCherry-seq.txt pCMV-N-mCherry质粒转染细胞后的表达效果
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