pET-N-His-C-His
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XY2902
1μg
888.00元
pET-N-His-C-His是一种用于表达N端或C端含有His标签(His tag)的目的蛋白的原核表达质粒，也可以用于表达N端和C端都 含有His标签的目的蛋白。本质粒为卡那霉素抗性。 本质粒含有T7启动子/lac操纵子，可以在异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)的诱导下高效启动目的蛋白表达。在多克隆位点的前面和后面，各有一个His标签的编码序列，每个His标签编码6个组氨酸(6X His)。在多克隆位点按照读码框插入目的基因并带上终止密码子，就可以表达仅N端带有His标签的目的蛋白，如果在NdeI和多克隆酶切位点之间按照读码框插入不带有终止密码子的目的基因，这样就可以表达仅C端带有His标签的目的蛋白，如果在多克隆位点按照读码框插入不带有终止密码子的目的基因，这样就可以表达N端和C端都带有His标签的目的蛋白。 通常可以采用如BeyoGold™ His-tag Purification Resin (XY2210/XY2218/XY2220)或His标签蛋白纯化试剂盒(XY2226)等纯化本质粒表达的目的蛋白，也可以使用His-tag抗体(XY367)检测和少量地分离纯化目的蛋白。 pET-N-His-C-His质粒的主要信息如下：
Feature Nucleotide
Position
f1 origin
12-467
Kanamycin resistance ORF
563-1645
PBR 322 origin
2084
LacI coding sequence
3518-4597
T7 promoter
4988-5004
His tag coding sequence
5079-5096
Multiple cloning site(BamHI-XhoI)
5097-5144
5145-5162
T7 Terminator
5230-5276
pET-N-His-C-His质粒(5301bp)的图谱如下：
pET-N-His-C-His的多克隆位点的详细图谱如下：
rbs
NdeI
His tag
BamHI
5052
TAACTTTAAG
AAGGAG
ATAT
ACATATG
CAC
CATCATCATC
ATCAT
GGATC
ATTGAAATTC
TTCCTC
TATA
TGTATAC
GTG
GTAGTAGTAG
TAGTA
CCTAG
PstI
HindIII
EcoRI EcoRV SalI
BglII XhoI
5102
CAAGCTTCTG
CAGGAATTCG
ATATCGTCGA
CAGATCTCTC
GAGCACCACC
GTTCGAAGAC
GTCCTTAAGC
TATAGCAGCT
GTCTAGAGAG
CTCGTGGTGG
5152
ACCACCACCA
C
TGAGATCCG
GCTGCTAACA
AAGCCCGAAAG
GAAGCTGAG
TGGTGGTGGT
G
ACTCTAGGC
CGACGATTGT
TTCGGGCTTTC
CTTCGACTC
pET-N-His-C-His中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pET-N-His-C-His)包括：
AatII
Acc65I
AflII
AgeI
AhdI
AleI
AscI
AvrII
BaeI
BbvCI
BfuAI
BmgBI
BmtI
BsaI
BseRI
BsiWI
BspMI
BsrGI
Bsu36I
CspCI
EagI
Eco53kI
FseI
KpnI
MfeI
NcoI
NheI
NotI
PacI
PmeI
PmlI
PspXI
RsrII
SacI
SacII
SbfI
SexAI
SfiI
SnaBI
SpeI
SrfI
StuI
ZraI
pET-N-His-C-His中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pET-N-His-C-His once)包括：
DraIII
CAC,NNN`GTG
242
PspOMI
G`GGCC,C
4035
PsiI
TTA|TAA
370
NmeAIII
GCCGAG(N)19,NN`
4041
PvuI
CG,AT`CG
943
BstEII
G`GTNAC,C
4060
AsiSI
GCG,AT`CGC
MluI
A`CGCG,T
4242
TspMI
C`CCGG,G
1067
BstAPI
GCAN,NNN`NTGC
4563
XmaI
SphI
G,CATG`C
4771
SmaI
CCC|GGG
1069
SgrAI
CR`CCGG,YG
4923
NruI
TCG|CGA
1286
AcuI
CTGAAG(N)14,NN`
1597
XbaI
T`CTAG,A
5034
AlwNI
CAG,NNN`CTG
1729
CA`TA,TG
5074
BssSI
C`ACGA,G
1968
G`GATC,C
5097
BstZ17I
GTA|TAC
2374
A`AGCT,T
5103
Tth111I
GACN`N,NGTC
2399
C,TGCA`G
5109
PflFI
EcoRI
G`AATT,C
5115
PpuMI
RG`GWC,CY
3136
EcoRV
GAT|ATC
5123
FspI
TGC|GCA
3164
SalI
G`TCGA,C
5127
BglI
GCCN,NNN`NGGC
3182
BglII
A`GATC,T
5133
PshAI
GACNN|NNGTC
3401
XhoI
C`TCGA,G
5139
HpaI
GTT|AAC
3740
PaeR7I
BssHII
G`CGCG,C
3831
BlpI
GC`TNA,GC
5218
ApaI
G,GGCC`C
StyI
C`CWWG,G
5240
pET-N-His-C-His质粒中推荐使用的测序引物序列如下： T7 primer (4988-5004): 5′-TAATACGACTCACTATA-3′ pET-R primer (5215-5234): 5′-TGCTAGTTATTGCTCAGCGG-3′ pET-N-His-C-His的全序列信息：XY2902 pET-N-His-C-His.txt。 包装清单：
包装
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说明书
1份
保存条件： -20℃保存。 注意事项： 本质粒未经书面许可不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。 本产品**于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或**，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。 为了您的**和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。