pET-N-His-TEV
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XY2905
1μg
888.00元
pET-N-His-TEV是一种用于表达N端含有His标签(His tag)的原核表达质粒。本质粒N端His标签后含有TEV酶切位点，可通 过TEV Protease (P2307/P2308)切除N端的His标签。本质粒为卡那霉素抗性。 本质粒含有T7启动子/lac操纵子，可以在异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)的诱导下高效启动目的蛋白表达。在多克隆位点的前面，带有一个His标签的编码序列，含有6个组氨酸(6X His)。因此在多克隆位点根据阅读框插入目的基因就可以表达N端含有His标签的目的蛋白。 本载体在N端His标签与多克隆位点之间含有TEV蛋白酶(TEV Protease)识别的七肽序列ENLYFQG，对应的核酸序列为 GAGAACCTGTACTTCCAAGGG，因此可在目的蛋白纯化后用TEV蛋白酶切除N端His标签。TEV蛋白酶酶切发生在七肽序列的Q和G之间，因此在酶切去除His标签的时候目的蛋白的N端会留下一个额外的氨基酸残基G。 通常可以采用如BeyoGold™ His-tag Purification Resin (XY2210/XY2218/XY2220)或His标签蛋白纯化试剂盒(XY2226)等纯化本质粒表达的目的蛋白，也可以使用His-tag抗体(XY367)检测和少量地分离纯化目的蛋白。 pET-N-His-TEV质粒的主要信息如下：
Feature Nucleotide
Position
f1 origin
12-467
Kanamycin resistance ORF
563-1645
PBR 322 origin
2084
LacI coding sequence
3518-4597
T7 promoter
4988-5004
His tag coding sequence
5079-5096
TEV Protease recogniton site sequence
5097-5117
Multiple cloning site(BamHI-XhoI)
5118-5165
T7 Terminator
5251-5297
pET-N-His-TEV质粒(5304bp)的图谱如下：
pET-N-His-TEV的多克隆位点的详细图谱如下：
rbs
NdeI
His tag
5052
TAACTTTAAG
AAGGAGATAT
ACATATG
CAC
CATCATCATC
ATCAT
GAGAA
ATTGAAATTC
TTCCTCTATA
TGTATAC
GTG
GTAGTAGTAG
TAGTA
CTCTT
TEV
PstI
↓
BamHI HindIII
EcoRI EcoRV SalI
5102
CCTGTACTTC
CAAGGGGGAT
CCAAGCTTCT
GCAGGAATTC
GATATCGTCG
GGACATGAAG
GTTCCCCCTA
GGTTCGAAGA
CGTCCTTAAG
CTATAGCAGC
BglII XhoI
5152
ACAGATCTCT
CGAGTGAGAT
CCGGCTGCTA
ACAAAGCCCG
AAAGGAAGCT
TGTCTAGAGA
GCTCACTCTA
GGCCGACGAT
TGTTTCGGGC
TTTCCTTCGA
pET-N-His-TEV中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pET-N-His-TEV)包括：
AatII
Acc65I
AflII
AgeI
AhdI
AleI
AscI
AvrII
BaeI
BbvCI
BfuAI
BmgBI
BmtI
BsaI
BseRI
BsiWI
BspMI
BsrGI
BstBI
Bsu36I
CspCI
DraI
EagI
Eco53kI
FseI
KpnI
MfeI
MscI
NcoI
NheI
NotI
PacI
PmeI
PmlI
PspXI
RsrII
SacI
SacII
SbfI
ScaI
SexAI
SfiI
SnaBI
SpeI
SrfI
StuI
SwaI
ZraI
pET-N-His-TEV中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pET-N-His-TEV once)包括：
DraIII
CAC,NNN`GTG
242
BssHII
G`CGCG,C
3831
PsiI
TTA|TAA
370
ApaI
G,GGCC`C
4035
PvuI
CG,AT`CG
943
PspOMI
G`GGCC,C
AsiSI
GCG,AT`CGC
NmeAIII
GCCGAG(N)19,NN`
4041
TspMI
C`CCGG,G
1067
BstEII
G`GTNAC,C
4060
XmaI
MluI
A`CGCG,T
4242
SmaI
CCC|GGG
1069
BstAPI
GCAN,NNN`NTGC
4563
NruI
TCG|CGA
1286
SphI
G,CATG`C
4771
AcuI
CTGAAG(N)14,NN`
1597
SgrAI
CR`CCGG,YG
4923
AlwNI
CAG,NNN`CTG
1729
BssSI
C`ACGA,G
1968
XbaI
T`CTAG,A
5034
PciI
A`CATG,T
2141
CA`TA,TG
5074
SapI
GCTCTTCN`NNN,
2258
BamHI
G`GATC,C
5118
BspQI
HindIII
A`AGCT,T
5124
BstZ17I
GTA|TAC
2374
C,TGCA`G
5130
Tth111I
GACN`N,NGTC
2399
EcoRI
G`AATT,C
5136
PflFI
EcoRV
GAT|ATC
5144
PpuMI
RG`GWC,CY
3136
SalI
G`TCGA,C
5148
FspI
TGC|GCA
3164
BglII
A`GATC,T
5154
BglI
GCCN,NNN`NGGC
3182
XhoI
C`TCGA,G
5160
PshAI
GACNN|NNGTC
3401
PaeR7I
HpaI
GTT|AAC
3740
BlpI
GC`TNA,GC
5221
pET-N-His-TEV质粒中推荐使用的测序引物序列如下： T7 primer (4988-5004): 5′-TAATACGACTCACTATA-3′ pET-R primer (5218-5237): 5′-TGCTAGTTATTGCTCAGCGG-3′ pET-N-His-TEV的全序列信息：XY2905 pET-N-His-TEV.txt。 包装清单：
包装
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说明书
1份
保存条件： -20℃保存。 注意事项： 本质粒未经书面许可不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。 本产品**于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或**，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。 为了您的**和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。