氧钒核糖核苷复合物(RNase抑制剂)

氧钒核糖核苷复合物(RNase抑制剂)

      氧钒核糖核苷复合物(Ribonucleoside Vanadyl Complexes, RVC)是一种常用的核糖核酸酶(ribonucleases, RNase)抑制剂，即RNA酶抑制剂，浓度为200mM，广泛用于各种RNA样品的分离纯化和检测过程中以抑制RNA降解。
      本产品通过一种优化的方法将四种rNTP的等摩尔混合物与氧化钒混合反应而成，可以和RNase以非共价键结合，形成稳定的复合物，从而抑制RNase活性。
      本产品是一种常用的RNase抑制剂，可广泛用于各种需要防止RNA降解的RNA分离、纯化和检测过程。本产品可以用于mRNA的纯化过程中，作为RNase的抑制剂；也可用于细胞裂解和蔗糖梯度法细胞组分分离过程中，以抑制RNase活性；还可以用于原位杂交中保护RNA探针，以及DNase I消化DNA时保护RNA等。
      本产品可以抑制绝大多数核糖核酸酶，但以下是例外：DNase I、S1 nuclease及Bacillus cereus ribonuclease。由于本产品不抑制DNase I，所以当用DNase I消化去除RNA样品中的DNA时，可以采用本产品来抑制RNase。
      本产品不适合用于体外翻译体系。
      有报道称0.4mM以上浓度的RVC对PCR聚合酶有一定的抑制作用，所以本试剂不推荐直接用于反转录体系中，反转录体系中可以选用另外一种RNase抑制剂(XY0102)。也可以通过后续提到的方法抽提去除RVC后再用于PCR反应。
      很多时候RNA样品中的RVC不必去除，可以直接用于后续的电泳、功能检测等。例如，使用本产品纯化获得的mRNA未经去除RVC，可以直接用于蛙卵的注射实验。
      如果需要去除RNA样品中的RVC，可以直接使用等体积苯酚进行抽提。如果苯酚中含有抗氧化剂8-羟基喹啉(8-
hydroxyquinoline)，抽提含有RVC的RNA样品后会发现苯酚的颜色会变黑。当苯酚抽提样品2-4次后，苯酚的颜色不再明显变色，提示RVC已经被充分去除了。也可以在RNA沉淀前，加入RVC的摩尔数10倍量的EDTA以充分分解和失活RVC，这样可以在RNA沉淀时去除已经分解和失活的RVC。
      RVC浓度越高，对于RNase的抑制效果越强。参考图1，20mM的RVC可以完全抑制0.00025U/ml的RNase A。本产品浓度为200mM，一般细胞裂解液中推荐使用终浓度20mM，也可以根据经验或文献选择不同的浓度。每一批的本产品都经过RNase活性抑制的检测，检测结果参考图1。

      图1. 不同浓度的RVC对RNase A的抑制效果图。总RNA和0.00025U/ml RNase A以及指定浓度的RVC一起孵育20分钟后进行电泳检测。本图仅作参考，不同的样品不同的检测条件，实际获得的结果可能和上图有所差别。
包装清单：

保存条件：
      -20℃保存，至少一年有效。
注意事项：
      **次使用时建议分装，避免反复冻融。
      去垢剂SDS以及螯合剂EDTA可以抑制RVC的活性，请勿和RVC同时使用。 
      本产品**于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或**，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
      为了您的**和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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