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操作对ELISA法手工测定的影响小结
日期:2024-11-22 11:40
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摘要:操作对ELISA法手工测定的影响小结
操作对ELISA法手工测定的影响小结:
1、检测前先将试剂盒从冰箱取出置室温平衡20min后使用,试剂用完及时放回冰箱冷藏,以免造成试验结果假性降低。
2、 加样时注意勿触及包被板底部,以免擦伤包被物使抗体(抗原)脱落而影响实验结果的准确性。
3、洗涤不充分,会使结果假性增高,过分洗涤呈假阴性。
4、比色时应保持包被孔底部无异物、无水汽,特别是冬季板从37℃水浴箱取出时,底部留有水汽,应将板底擦干后进行比色,水汽或孔内气泡也会使OD值升高。
5、抗原与抗体反应达到完全平衡,依赖于温度与时间。温度高于45℃易引起失活及标记物脱落,温度低于4℃,影响反应速度。总之,由于ELISA实验的影响因素较多,在实际工作中必须操作规范、仔细,避免和排除各种因素的影响,使之得到准确可靠的检验结果。