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PCR反应扩增产物出现多条带分析
日期:2024-11-23 17:37
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摘要:
扩增产物出现多条带
(1)引物用量偏大,引物的特异性不高。应调换引物或降低引物的使用量。
(2)循环的次数过多。适当增加模板的量,减少循环次数。
(3)酶的用量偏高或酶的质量不好,应降低酶量或调换另一来源的酶。
(4)退火温度偏低,退火及延伸时间偏长。应提高退火温度,减少变性与延伸时间,也可采用二种温度的PCR扩增。
(5)样品处理不当。
(6)Mg2+浓度偏高,因适当调整Mg2+使用浓度。
(7)若为PCR试剂盒,也可能时试剂盒本身质量有问题。
扩增产物出现多条带
(1)引物用量偏大,引物的特异性不高。应调换引物或降低引物的使用量。
(2)循环的次数过多。适当增加模板的量,减少循环次数。
(3)酶的用量偏高或酶的质量不好,应降低酶量或调换另一来源的酶。
(4)退火温度偏低,退火及延伸时间偏长。应提高退火温度,减少变性与延伸时间,也可采用二种温度的PCR扩增。
(5)样品处理不当。
(6)Mg2+浓度偏高,因适当调整Mg2+使用浓度。
(7)若为PCR试剂盒,也可能时试剂盒本身质量有问题。