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PCR反应扩增产物出现多条带分析

日期:2024-11-23 17:37
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摘要: 扩增产物出现多条带 (1)引物用量偏大,引物的特异性不高。应调换引物或降低引物的使用量。 (2)循环的次数过多。适当增加模板的量,减少循环次数。 (3)酶的用量偏高或酶的质量不好,应降低酶量或调换另一来源的酶。 (4)退火温度偏低,退火及延伸时间偏长。应提高退火温度,减少变性与延伸时间,也可采用二种温度的PCR扩增。 (5)样品处理不当。 (6)Mg2+浓度偏高,因适当调整Mg2+使用浓度。 (7)若为PCR试剂盒,也可能时试剂盒本身质量有问题。

扩增产物出现多条带

1)引物用量偏大,引物的特异性不高。应调换引物或降低引物的使用量。

2)循环的次数过多。适当增加模板的量,减少循环次数。

3)酶的用量偏高或酶的质量不好,应降低酶量或调换另一来源的酶。

4)退火温度偏低,退火及延伸时间偏长。应提高退火温度,减少变性与延伸时间,也可采用二种温度的PCR扩增。

5)样品处理不当。

6)Mg2+浓度偏高,因适当调整Mg2+使用浓度。

7)若为PCR试剂盒,也可能时试剂盒本身质量有问题。