小鼠ELISA试剂盒实验测定与注意事项
小鼠ELISA试剂盒实验测定:
一、定性测定
(1)阳性判定值法(cut-off value,CO值):一般为阴性对照的平均A值加一个常数,试剂制备严格标准化,要先计算出阳性对照A值平均数和阴性对照A值平均数。标本A值≥CO值即为阳性。
(2)抑制率法:在竞争抑制法中结果可用抑制率表示。
抑制率(%)=(A阴性对照A- A待测)/阴性对照X100%,一般以抑制率≥50%为阳性
二、半定量测定
结果一般以滴度表示。将标本连续稀释后,进行ELISA检测,在阳性临界值以上的zui高稀释度即为该标本的“滴度"。
三、定量测定
即用己知量的标准品作一系列稀释后进行ELISA测定,与待测标本同时进行测定,绘制标准曲线,结果以优良量或活性单位表示。
小鼠ELISA试剂盒注意事项:
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间*hao控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,*hao做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔*孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请*后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照小鼠卵泡抑素样蛋白3(FSTL3) ELISA试剂盒说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。