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PCR产物量过少处理办法
日期:2024-11-22 06:45
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摘要:
PCR产物量过少处理办法:
1、退火温度不合适。以2度为梯度设计梯度PCR反应优化退火温度。
2、DNA模板量太少。增加DNA模板量。
3、PCR循环数不足。增加反应循环数。
4、引物量不足。增加体系中引物含量。
5、延伸时间太短。以1 kb/min的原则设置延伸时间。
6、变性时间过长。变性时间过长会导致DNA聚合酶失活。DNA模板中存在抑制剂。确保DNA模板干净。
PCR产物量过少处理办法:
1、退火温度不合适。以2度为梯度设计梯度PCR反应优化退火温度。
2、DNA模板量太少。增加DNA模板量。
3、PCR循环数不足。增加反应循环数。
4、引物量不足。增加体系中引物含量。
5、延伸时间太短。以1 kb/min的原则设置延伸时间。
6、变性时间过长。变性时间过长会导致DNA聚合酶失活。DNA模板中存在抑制剂。确保DNA模板干净。