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ELISA实验洗涤过程操作技巧小结
日期：2025-01-08 22:13
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摘要：
聚苯乙烯因其具有较强的吸附蛋白质的性能而被广泛用于ELISA实验的固相载体，聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的，因此需要通过洗涤清 除在反应过程中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质。洗涤在 ELISA 过程中虽不是一个反应步骤，但却决定着实验的成败。上述提到的血清中存在红细胞或纤维蛋白原，可以在加样前离心时得到控制，同样也可以通过适当增加洗涤次数和浸泡时间减轻或避免对实验结果的影响，同样，对于血液存在的非特异性的IgG,实验者很难在加样时将其去除，那么解决的佳时机就是洗涤过程。
ELISA在洗涤过程中需注...
聚苯乙烯因其具有较强的吸附蛋白质的性能而被广泛用于ELISA实验的固相载体，聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的，因此需要通过洗涤清 除在反应过程中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质。洗涤在 ELISA 过程中虽不是一个反应步骤，但却决定着实验的成败。上述提到的血清中存在红细胞或纤维蛋白原，可以在加样前离心时得到控制，同样也可以通过适当增加洗涤次数和浸泡时间减轻或避免对实验结果的影响，同样，对于血液存在的非特异性的IgG,实验者很难在加样时将其去除，那么解决的佳时机就是洗涤过程。
ELISA在洗涤过程中需注意以下几点：
(1)、板要平整，尤其是在用洗板机洗板的过程中，往往是3排一起洗，如果板不平，就很可能造成洗液有残留，从而导致非特异性结合不能清 除干净，对实验结果造成干扰。
(2)、洗液温度，实验表明，洗液温度也会影响洗板的干净程度，尤其是冬天温度过低时容易出现“花板”问题。因此，好保持室温在20℃-30℃。
(3)、洗液要注满孔，孔壁洗涤不干净也易造成“花板”现象。
(4)、洗液要新鲜配置，洗液要临用前新鲜配制，放置时间过长易产生絮状物或混浊，造成赌孔或花板。
(5)、洗板次数不够或洗涤间隔时间过短也会造成由于洗板不净而造成“花板”。