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产品名称 | 规格 | 货号 |
50T甲型H1N1流感病毒(2009)PCR检测试剂盒 | 50T |
BH-P63211 |
它具有下列特点:
1. 即开即用,用户只需要提供样品RNA模板。2. 引物和探针经过优化,灵敏性高。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. 特异性高,引物是根据高度保守区设计,不会跟其他病毒的RNA发生交叉反应。
5. 本产品足够 50 次 20μL 体系的探针法荧光定量 RT-PCR 反应。
6. 本产品只能用于科研。
实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(*好用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
BCL7B BCL7B蛋白抗体
BNC2 碱性核蛋白2(锌指蛋白basonuclin2)抗体
BCL7C B细胞白血病/蛋白7抗体
BSCL2 先天性脂肪代谢障碍蛋白2抗体(常染色体显性遗传痉挛性截瘫17)
BTG1 B细胞迁移基因1抗体
BEAN1 脊髓小脑共济失调蛋白BEAN1抗体
B7-H6 B7H6蛋白抗体
BOb-1 B细胞特异性转录因子抗体
BIN1 桥连整合因子蛋白抗体
BADH2 BADH2抗体(水稻)
BCHE(1E8) 丁酰胆碱酯酶单克隆抗体
phospho-beta catenin (Tyr142) 磷酸化β 连环素蛋白抗体
Beta-lactoglobulin β-乳球蛋白抗体
Beta-lactoglobulin β-乳球蛋白抗体
BDKRB2 缓激肽B2受体抗体
Butyrylcholinesterase (NT) 丁酰胆碱酯酶抗体(N端)
BCHE (CT) 丁酰胆碱酯酶抗体(C端)
BLAME BLAME抗体
Batroxobin(5H4) 巴曲霉单克隆抗体
Batroxobin 蛇毒巴曲酶抗体
BrdU 溴脱氧尿苷抗体
BAGE2 /抗原2.2抗体
BAGE3 /抗原2.3抗体
BAGE4 /抗原2.4抗体
BNP 脑钠素/利钠肽抗体
B-Raf B Raf抗体
BRCA1 乳腺癌易感基因1抗体
FANCB 乳腺癌易感基因2抗体
BrdU 溴脱氧尿苷抗体
BTG2 B细胞迁移基因2抗体
BMP2 骨形态发生蛋白2抗体
BMP7 骨形态发生蛋白7抗体
Beta catenin β-连环蛋白/β-连环素/β链接素抗体
Beta catenin β-连环蛋白/β-连环素/β链接素抗体
BCCIP 乳腺癌易感基因2和p21蛋白抑制因子抗体
Blood Group Antigen Precursor 血型抗原前体蛋白抗体
CD238 凯尔血型糖蛋白CD238抗体
BTN2A2 嗜乳脂蛋白亚家族2成员A2抗体
腺苷酸激酶2抗体 TX-A2 ELISA Kit 血栓素A2合成酶(TX-A2)ELISA试剂盒
精子顶体前体蛋白抗体 TX-A2 ELISA Kit 血栓素A2(TX-A2)ELISA试剂盒
黑色素瘤缺失样蛋白1抗体 TpP ELISA Kit 血栓前体蛋白(TpP)ELISA试剂盒
未知糖基化转移酶AER61抗体 CH50 ELISA Kit 血清总补体(CH50)ELISA试剂盒
铁蛋白Fe65抗体 ST ELISA Kit 血清素/血清胺(ST)ELISA试剂盒
抑癌基因ras同源家族1抗体 SAP ELISA Kit 血清淀粉样蛋白P(SAP)ELISA试剂盒
转录激活蛋白2α/TFAP2α/AP-2α抗体 SAA4 ELISA Kit 血清淀粉样蛋白A4(SAA4)ELISA试剂盒
心钠素抗体 SAA3 ELISA Kit 血清淀粉样蛋白A3(SAA3)ELISA试剂盒
丙氨酰tRNA合成酶2抗体 SAA ELISA Kit 血清淀粉样蛋白A(SAA)ELISA试剂盒
丝氨酸抑制蛋白激酶C底物抗体 SDPR ELISA Kit 血清剥夺反应相关蛋白(SDPR)ELISA试剂盒
核突触蛋白α抗体 HSA ELISA Kit 血清白蛋白(HSA)ELISA试剂盒
自噬相关蛋白4B抗体 SGK2 ELISA Kit 血清/糖皮质**调节激酶2(SGK2)ELISA试剂盒
整合素样金属蛋白酶与凝血酶1型-12抗体 GSK2 ELISA Kit 血清/糖皮质**调节激酶2(GSK2)ELISA试剂盒
α-辅肌动蛋白4抗体 HA ELISA Kit 血凝素(HA)ELISA试剂盒
碱性磷酸酶抗体 pFN ELISA Kit 血浆纤维连接蛋白(pFN)ELISA试剂盒
50T甲型H1N1流感病毒(2009)PCR检测试剂盒AU1 tag标签抗体 PS ELISA Kit 血浆抗凝蛋白S(PS)ELISA试剂盒
脂肪细胞增强结合蛋白1 PC ELISA Kit 血浆抗凝蛋白C(PC)ELISA试剂盒
蛋白激酶B KLKB1 ELISA Kit 血浆激肽释放酶(KLKB1)ELISA试剂盒
蛋白激酶B CETP ELISA Kit 血浆胆固醇酯转移蛋白(CETP)ELISA试剂盒
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。