50T流感病毒H14亚型PCR检测试剂盒上海博湖生物科技有限公司

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产品名称：50T流感病毒H14亚型PCR检测试剂盒
产品型号：BH-P63234
产品**：博湖
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简单介绍：

50T流感病毒H14亚型PCR检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。

详情介绍：

它具有下列特点：

1. 即开即用，用户只需要提供样品RNA模板。
2. 引物和探针经过优化，灵敏性高。
3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4. 特异性高，引物是根据高度保守区设计，不会跟其他病毒的RNA发生交叉反应。
5. 本产品足够 50 次 20μL 体系的探针法荧光定量 RT-PCR 反应。
6. 本产品只能用于科研。

服务流程：
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

产品名称	规格	货号
50T流感病毒H14亚型PCR检测试剂盒	50T	BH-P63234

实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶（2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（*好用带芯枪头，下同）。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。

注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
血小板衍化生长因子(PDGF)ELISA试剂盒 PDGF ELISA Kit 腺苷酸激酶结构域蛋白1抗体英文名称：AKD1 0.2ml

血小板型磷酸果糖激酶(PFKP)ELISA试剂盒 PFKP ELISA Kit 三磷酸腺苷结合盒转运蛋白7抗体英文名称：ABCA7 0.2ml

血小板相关**球蛋白(PAIg)ELISA试剂盒 PAIg ELISA Kit 磷酸化钠钾ATP酶α1多肽抗体英文名称：phospho-Na+/K+-ATPase Alpha1(Ser 943) 0.2ml

血小板相关抗体IgM(PA-IgM)ELISA试剂盒 PA-IgM ELISA Kit Na+/K+-ATPase α1 钠钾ATP酶α1抗体英文名称：ATP1A1 0.2ml

血小板相关补体3(PAC3)ELISA试剂盒 PAC3 ELISA Kit 肌动蛋白样蛋白6B抗体英文名称：BAF53b 0.2ml

血小板生长因子(PGF)ELISA试剂盒 PGF ELISA Kit 脊髓小脑共济失调蛋白7抗体英文名称：Ataxin 7 0.2ml

血小板**素(TPO)ELISA试剂盒 TPO ELISA Kit 磷酸化非受体酪氨酸激酶c-Abl抗体英文名称：phospho-c-Abl (Tyr70) 0.1ml

血小板膜糖蛋白Ⅳ(GP-Ⅳ)ELISA试剂盒 GP-Ⅳ ELISA Kit β淀粉样前体蛋白结合蛋白1抗体（X11α）英文名称：APBA1 0.1ml

血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA试剂盒 GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61 ELISA Kit 载脂蛋白E抗体英文名称：Apolipoprotein E 0.1ml

血小板碱性蛋白(PBP/CXCL7)ELISA试剂盒 PBP/CXCL7 ELISA Kit 甲胎蛋白AFP抗体英文名称：AFP 0.1ml

血小板活化因子(PAF)ELISA试剂盒 PAF ELISA Kit 阴离子交换蛋白2抗体英文名称：AE2 0.2ml

血小板反应蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)ELISA试剂盒 TSP-1 ELISA Kit 铁调节蛋白1抗体英文名称：Aconitase 1 0.2ml

血纤肽/纤维蛋白肽B(FPB)ELISA试剂盒 FPB ELISA Kit 三磷酸腺苷酶家族蛋白3A抗体英文名称：ATAD3A 0.2ml