注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
服务流程:
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。
产品名称 |
规格 |
货号 |
50T禽流感病毒H5N8亚型PCR检测试剂盒 |
50T |
BH-P63248 |
它具有下列特点:
1. 即开即用,用户只需要提供样品RNA模板。
2. 引物和探针经过优化,灵敏性高。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. 特异性高,引物是根据高度保守区设计,不会跟其他病毒的RNA发生交叉反应。
5. 本产品足够 50 次 20μL 体系的探针法荧光定量 RT-PCR 反应。
6. 本产品只能用于科研。
实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(*好用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
协同刺激分子受体(CMR)ELISA试剂盒 CMR ELISA Kit 过氧化物酶酰基辅酶A氧化酶2抗体英文名称:ACOX2 0.2ml
小乳腺表皮粘蛋白(SBEM)ELISA试剂盒 SBEM ELISA Kit 胆固醇酰基转移酶1抗体英文名称:ACAT1 0.2ml
小而密低密度脂蛋白(sLDL)ELISA试剂盒 sLDL ELISA Kit 磷酸化间变型瘤激酶抗体英文名称:phospho-ALK (Tyr1278 + Tyr1282 + Tyr1283) 0.1ml
小扁豆素结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)ELISA试剂盒 AFP-L3 ELISA Kit 磷酸化ADP核糖基化因子结合蛋白2抗体英文名称:phospho-arfaptin 2 (Ser260) 0.1ml
小扁豆素结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体2(AFP-L2)ELISA试剂盒 AFP-L2 ELISA Kit 磷酸化有丝分裂激酶B/C抗体英文名称:Phospho-Aurora B (Thr232) + Aurora C (Thr198) 0.1ml
小扁豆素结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体1(AFP-L1)ELISA试剂盒 AFP-L1 ELISA Kit 磷酸化腺泡Acinus蛋白抗体英文名称:phospho-Acinus (Ser1180) 0.1ml
相扑结合酶UBC9(UBE2I/UBC9/UBCE9)ELISA试剂盒 UBE2I/UBC9/UBCE9 ELISA Kit 磷酸化肾上腺素能受体β2抗体英文名称:phospho-ADRB2 (Ser346) 0.1ml
腺相关病毒(AAV)ELISA试剂盒 AAV ELISA Kit APS抗体英文名称:APS 0.1ml
腺苷脱氨酶(ADA)ELISA试剂盒 ADA ELISA Kit 激活素受体样激酶1抗体英文名称:ACVRL1 0.2ml
腺苷酸环化酶1(AC-1)ELISA试剂盒 AC-1 ELISA Kit 激活素A受体1B抗体英文名称:ACVR1B 0.2ml
腺苷三磷酸结合盒转运体G2(ABCG2)ELISA试剂盒 ABCG2 ELISA Kit 磷酸化雄受体抗体英文名称:phospho-Androgen Receptor (Ser597) 0.1ml
腺苷三磷酸结合盒转运体A1(ABCA1)ELISA试剂盒 ABCA1 ELISA Kit 磷酸化A-Raf抗体英文名称:phospho-A Raf (Ser214) 0.1ml
腺苷三磷酸结合盒转运蛋白G2(ABCG2)ELISA试剂盒 ABCG2 ELISA Kit 酰基鞘氨醇脱酰酶2抗体英文名称:ASAH2 0.2ml
衔接蛋白酶活化因子1(APAF1)ELISA试剂盒 APAF1 ELISA Kit 腺相关病毒5抗体英文名称:AAV5 capsid VP2 protein 0.2ml
线粒体肽蛋氨酸亚砜还原酶(MSRA)ELISA试剂盒 MSRA ELISA Kit 脂肪细胞特异性粘附分子抗体英文名称:ASAM 0.1ml
50T禽流感病毒H5N8亚型PCR检测试剂盒甘草查尔酮C Licochalcone C 144506-14-9 20mg
甘草素 Liquiritigenin 578-86-9 20mg
异甘草素 Isoliquiritigenin 961-29-5 20mg
水甘草碱 Tabersonine 4429-63-4 20mg
鬼臼 Podophyllotoxin 518-28-5 20mg
鬼臼-4-O-葡萄糖苷 Podophyllotoxin-4-O-glucoside 16481-54-2 10mg
4'-去甲基表鬼臼 4'-Demethylepipodophyllotoxin 6559-91-7 20mg
葛根素 Puerarin 3681-99-0 20mg
3'-甲氧基葛根素 3’- Methoxy Puerarin 117047-07-1 10mg
4'-O-甲基葛根素 4'-O-Methylpuerarin 92117-94-7 10mg
3'-羟基葛根素 3'-hydroxy Puerarin 117076-54-5 20mg
原花青素B3 Procyanidin B3 23567-23-9 3mg
原花青素B4 Procyanidin B4 29106-51-2