原理是由一对引物介导,能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增,经过n个热循环扩增,扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0<E<1,扩增效率=倍,使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。
产品名称:50T肠出血性大肠杆菌 O104:H4 PCR检测试剂盒
货号:BH-P63473
规格:50T
分类:荧光 PCR 法
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;本公司产品仅于科研。
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,*后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括优良定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNA或RNA的优良定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
特点优势:
1. 特异性:所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性
6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
CD146分子(CD146)ELISA试剂盒 CD146 ELISA Kit 结合转化激活因子CITED1抗体英文名称:CITED1 0.2ml
CD134分子(CD134)ELISA试剂盒 CD134 ELISA Kit Ⅱ型胶原α1蛋白/软骨钙素抗体英文名称:Collagen II 0.1ml
CD117分子(CD117)ELISA试剂盒 CD117 ELISA Kit CSMD2蛋白抗体英文名称:CSMD2 0.2ml
CD10分子(CD10)ELISA试剂盒 CD10 ELISA Kit CSMD3蛋白抗体英文名称:CSMD3 0.2ml
CC趋化因子受体7(CCR7)ELISA试剂盒 CCR7 ELISA Kit 钙调神经磷酸酶CSTP1抗体英文名称:CSTP1 0.2ml
CC趋化因子受体5(CCR5)ELISA试剂盒 CCR5 ELISA Kit CTAGE6蛋白抗体英文名称:CTAGE6 0.2ml
CC趋化因子受体2(CCR2)ELISA试剂盒 CCR2 ELISA Kit 皮肤T细胞瘤相关抗原4抗体英文名称:CTAGE4 0.2ml
CC趋化因子受体1(CCR1)ELISA试剂盒 CCR1 ELISA Kit 膜蛋白CLDND2抗体英文名称:CLDND2 0.2ml
CC趋化因子7(CCL7/MCP3/SCYA6/SCYA7)ELISA试剂盒 CCL7/MCP3/SCYA6/SCYA7 ELISA Kit 含半胱氨酸和组氨酸丰富域蛋白1抗体英文名称:CHORDC1 0.2ml
CC趋化因子5(CCL5/D17S136E/SCYA5)ELISA试剂盒 CCL5/D17S136E/SCYA5 ELISA Kit 猪圆环病毒Ⅱ型衣壳蛋白英文名称:capsid protein 0.2ml
CCAAT增强子结合蛋白ε(C/EBPε)ELISA试剂盒 C/EBPε ELISA Kit 肽CAMP抗体英文名称:Cathelicidin 0.1ml
CCAAT增强子结合蛋白δ(C/EBPδ)ELISA试剂盒 C/EBPδ ELISA Kit 卷曲螺旋结构域蛋白134抗体英文名称:CCDC134 0.2ml
CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)ELISA试剂盒 C/EBPα ELISA Kit 卷曲螺旋结构域蛋白69抗体英文名称:CCDC69 0.2ml
Ca2+激活K+通道蛋白2(KCNN2)ELISA试剂盒 KCNN2 ELISA Kit 卷曲螺旋结构域蛋白70抗体英文名称:CCDC70 0.2ml
cAMP反应元件结合蛋白(CREB)ELISA试剂盒 CREB ELISA Kit 卷曲螺旋结构域蛋白98抗体英文名称:CCDC98 0.2ml
50T肠出血性大肠杆菌 O104:H4 PCR检测试剂盒40uL×4 双脱氧dNTP溶液(10mM) ddNTP Solution -20℃保存
100次 dNTP和引物**剂 dNTP-Primer Erasol -20℃保存
10mL PCR Mix染料 PCR Mix Dye -20℃保存
0.3mL 可逆型Taq DNA聚合酶抑制剂 Taq DNA Polymerase Inhibitor -20℃保存
500U Taq酶抗体 Taq Antibody -20℃保存
30次 DNA 修复混合液 DNA Repair Mix -20℃保存
150次 DNA 修复混合液 DNA Repair Mix -20℃保存
100次 即用型PCR试剂盒2.0 Instant PCR Kit 2.0 -20℃保存
600次 即用型PCR试剂盒2.0 Instant PCR Kit 2.0 -20℃保存
0.5mL 探针标记专用PCR Mix
1mL 2X PCR Mix(即用型PCR试剂盒3.0) Instant PCR Kit 3.0 -20℃保存
9 mL 2X PCR Mix(即用型PCR试剂盒3.0) Instant PCR Kit 3.0 -20℃保存
1.5mL 2X HotStart PCR Mix(即用型热启动PCR试剂盒) Instant Hotstart PCR Mix -20℃保存
技术原理:
DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。
在聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。( DNA高温变性低温复性)
发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。