它具有下列特点:
1. 即开即用,用户只需要提供样品RNA模板。
2. 引物和探针经过优化,灵敏性高。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. 特异性高,引物是根据高度保守区设计,不会跟其他病毒的RNA发生交叉反应。
5. 本产品足够 50 次 20μL 体系的探针法荧光定量 RT-PCR 反应。
6. 本产品只能用于科研。
服务流程:
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。
产品名称 |
规格 |
货号 |
50T肉毒杆菌PCR检测试剂盒(荧光PCR) |
50T |
BH-P63488 |
实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(*好用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4-羟基壬烯酸(HNE)ELISA试剂盒 HNE ELISA Kit 1号染色体开放阅读框41抗体英文名称:C1orf41 0.2ml
40S核糖体蛋白S19(RPS19)ELISA试剂盒 RPS19 ELISA Kit 1号染色体开放阅读框144抗体英文名称:C1orf144 0.2ml
3氧代5α类固醇4脱氢酶2(SRD5A2)ELISA试剂盒 SRD5A2 ELISA Kit 4号染色体开放阅读框3抗体英文名称:C4orf3 0.2ml
3型1-磷酸鞘氨醇受体(S1P3)ELISA试剂盒 S1P3 ELISA Kit 组织蛋白酶S抗体英文名称:Cathepsin S 0.2ml
3-硝基酪氨酸(3-NT)ELISA试剂盒 3-NT ELISA Kit 细胞死亡诱导蛋白抗体英文名称:Cell death inducing protein 0.2ml
3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A合酶1(HMGCS1)ELISA试剂盒 HMGCS1 ELISA Kit 前列腺雄抑制信号蛋白1抗体英文名称:Cipar1 0.2ml
3-葡萄糖苷酸孕二醇(PdG)ELISA试剂盒 PdG ELISA Kit 磷酸化心肌肌钙蛋白抗体英文名称:phospho-cardiac Troponin I (Thr143) 0.2ml
28S抗核糖体抗体(28S rRNP)ELISA试剂盒 28S rRNP ELISA Kit 脊髓灰质炎受体相关蛋白1抗体英文名称:PVRL1 0.2ml
26S蛋白酶体非ATP酶调节亚基11(PSMD11)ELISA试剂盒 PSMD11 ELISA Kit 19号染色体开放阅读框73抗体英文名称:C19orf73 0.1ml
26S蛋白酶体(26S PSM)ELISA试剂盒 26S PSM ELISA Kit 整合素αM抗体Integrin αM英文名称:CD11b 0.1ml
25羟基维生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA试剂盒 25(OH)D3/25 HVD3 ELISA Kit 轴突蛋白4/少突胶质细胞抗体英文名称:CASPR 0.2ml
25羟基维生素D3(25 HVD3)ELISA试剂盒 25 HVD3 ELISA Kit 轴突相关CNTP2蛋白抗体(少突胶质细胞)英文名称:Caspr2 0.2ml
25羟基维生素D2(25 HVD2)ELISA试剂盒 25 HVD2 ELISA Kit 酪蛋白激酶δ1抗体英文名称:CSNK1D 0.2ml
2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)ELISA试剂盒 2,3-DPG ELISA Kit 1号染色体开放阅读框191抗体英文名称:C1orf191 0.2ml
20S蛋白酶体(20SP)ELISA试剂盒 20SP ELISA Kit 活化白细胞粘附分子抗体英文名称:CD166 0.1ml
50T肉毒杆菌PCR检测试剂盒(荧光PCR)100次 鱼类种属鉴定PCR Mix(线粒体CO1基因) Animal DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存
100次 鸟类种属鉴定PCR Mix(线粒体CO1基因) Animal DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存
100次 哺乳动物种属鉴定PCR Mix(线粒体CO1基因) Animal DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存
100次 植物种属鉴定PCR Mix 1(细胞核ITS) Plant DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存
100次 植物种属鉴定PCR Mix 2(细胞核 ITS2) Plant DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存
100次 植物种属鉴定PCR Mix 3(质体 atpF-H) Plant DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存
100次 植物种属鉴定PCR Mix 4(质体 matK) Plant DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存
100次 植物种属鉴定PCR Mix 5(质体 psbK-I) Plant DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存
100次 植物种属鉴定PCR Mix 6(质体 rbcL) Plant DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存
100次 植物种属鉴定PCR Mix 7(质体 rpoB) Plant DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存
100次 植物种属鉴定PCR Mix 8(质体 rpoC1) Plant DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存
100次 植物种属鉴定PCR Mix 9(质体 trnH-psbA) Plant DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存
100次 植物种属鉴定PCR Mix 10(质体 trnL-F) Plant DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存