细胞接收后的处理：
1）收到细胞后，75%酒精瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。
2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。
3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的完全培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
4）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议T25培养瓶1：2传代。
英文简称
规格
货号
C3H/10T1/2-clone8
1×106
P-X9553
产品详情：
细胞别称；C3H/10T1/2-clone8; C3H/10T1/2 CL8; C3H10T1/2CL8; 10T1/2; C3H10T1-2; C3H10T1/2; C3H-10T1/2; C3H 10T1/2; C3H/10T1/2
种属来源；小鼠
组织来源；胚胎
生长特性；贴壁生长
细胞形态；成纤维细胞样
细胞代数；10代以内
背景简介；1C3H/10T1/2, Clone 8细胞是由C·Reznikoff等人于1972从C3H系小鼠胚胎细胞分离。C3H/10T1/2, Clone 8细胞对过度长满的细胞有丝分裂抑制非常敏感，在同源小鼠中不产生肿瘤，无自然转化的背景；C3H/10T1/2, Clone 8细胞也不含明显内源性转化鼠类白血病或肉瘤病毒。
生物等级；1
细胞规格；1x106cells/T25或1mL冻存管
支原体检测；无
保藏机构；ATCC; CCL-226 ECACC; 99072801
培养基；MEM+10% FBS+PS+2mM L-glutamine
培养条件；气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃
冻存条件；无血清冻存液，液氮储存
干冰运输及复苏好存活细胞
（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
1）准备DMEM培养基；胎牛血清，10%；双抗，1%。
2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
二．细胞处理：
1）冻存细胞的复苏：：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜
。天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。对于贴壁细胞传代可以参考以下方法：1、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2、加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3、轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3）细胞冻存:收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。下面T25瓶为例：
1、细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中，可使用血球计数板计数，来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml.
2、1000rpm离心3-5min，去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ，按每1ml冻存液含1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中，标注好名称、代数、日期等信息。
3、将要冻存的细胞置于程序降温盒中，-80度冰箱中过夜，之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
实验原理：
公司正在出售的产品：
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活化B细胞因子1抗体 |
大鼠端粒酶(TE)elisa检测试剂盒 |
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MSC/Musculin |
（含一抗和AP二抗） |
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髓鞘蛋白P0样蛋白2抗体 |
蔗糖含量测试盒 |
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EVA1 |
小鼠催乳素释放(PRH)elisa分析检测试剂盒 |
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大鼠β-防御素(β-Defensins)elisa检测试剂盒 |
组蛋白H3-K36（mono/di/tri）甲基化检测试剂盒 |
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小鼠生长分化因子3(GDF3)elisa检测试剂盒 |
细胞角蛋白79抗体 KRT79 |
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人Q热科克斯体2(Q fever)抗体(IgG)elisa分析检测试剂盒 |
细胞死亡激活剂CIDE-B抗体 CIDEB |
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组织CLK1激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C） |
UBX结构域域蛋白D2抗体 UBXD2 |
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快速蛋白A抗体 SPDYA |
α-1抗胰蛋白酶抗体 AAT |
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真核翻译起始因子5抗体 EIF5 |
APC标记人/小鼠CD11b单克隆抗体 human/mouse CD11b/APC |
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植物延展素-β EXPB-2 |
ATP依赖RNA解旋酶DDX49抗体 DDX49 |
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钙调蛋白结合转录激活因子1抗体 CAMTA1 |
抗肌萎缩蛋白抗体 Dystrophin |
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肝脏X受体α+肝脏X受体β抗体 LXR alpha + LXR beta |
KIAA1841蛋白抗体 KIAA1841 |
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I类组织相容性H-2抗原D-Dalpha链抗体 H2-D1 |
C3H/10T1/2, Clone 8小鼠胚胎肉瘤细胞亲环蛋白（亲环素）E抗体 Cyclophilin E |
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人类白细胞抗原G抗体 HLA G |
大鼠纤维蛋白原(Fb)elisa检测试剂盒免费代测 |
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膜功能低渗膨胀法（HOST）检测试剂盒 |
植物N-乙酰转移酶（NAT）活性比色法定量检测试剂盒 |
实验步骤：
1 将目的基因构建到合适的慢病毒载体上，利用293T细胞进行慢病毒包装，获得含目的基因的慢病毒；
2 转染前24 h进行细胞铺板，转染时细胞密度控制在80%左右；
3 天加入适量病毒悬液感染细胞，并置于37 ℃，5% CO2培养箱中孵育；
4 24 h后用新鲜培养基替换含有病毒的培养基，并继续培养；
5 在转染3-4天后开始加药筛选培养，直至显微镜下观察荧光细胞比例为100%，获得稳转细胞系。
