产品名称：NCI-H551[h551]细胞​

服务流程： 

（1）客户提供：目的细胞具体信息；

（2）操作过程：细胞复苏培养，细胞发货；

（3）交付内容：细胞系/细胞株，以及细胞使用说明书。

产品名称	NCI-H551[h551]细胞
规格	详见说明书
货号	BH-8010784

培养操作步骤 ：

1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布； 

2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）； 

3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 

4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中； 

5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及细胞化学检测。 

实验要点及说明 ：

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法； 

2．所使用的盖玻片应该为玻璃**，并经过铬酸洗液处理； 

3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻； 

4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率； 

5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。

2. 先不开瓶盖，瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置数小时（4h左右），稳定细胞状态，切忌在温箱内静置过夜。

3. 静置后镜检，拍照，记录细胞状态。建议传代后也拍照记录细胞生长情况。

4. 贴壁细胞：若细胞密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，收集细胞瓶内的培养基，留8ml继续培养至80%左右再传代，瓶盖可稍微拧松。

5. 细胞瓶内的培养基含血清和双抗，可收集后4℃保存备用，可补加2%血清。刚开始传代时建议一半用细胞瓶内的培养基，一半用客户自备的培养基，使细胞逐渐适应培养条件，以免因不适应而造成生长状态不佳。

6. 细胞胰酶消化液建议使用PBS配制，

7. 因为细胞培养过程外因太多，所以我们的售后保障期为一周，超过一周的细胞我们会酌情处理，但不提供免费更换服务。 细胞运输和保存：可选择干冰运输及发送复苏存方式：（1）干冰运输，收到后立即转入液氮冻存或直接复苏；收到后应继续生长，传代达到细胞生长状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

大鼠软骨细胞完全培养基 100mL 磷酸化Ack1抗体

大鼠破骨细胞完全培养基 100mL 磷酸化β抑制蛋白1抗体

大鼠皮肤肥大细胞完全培养基 100mL 磷酸化有丝分裂激酶A抗体

大鼠前脂肪细胞完全培养基 100mL 磷酸化APS抗体

大鼠成骨细胞完全培养基 100mL 有丝分裂激酶A抗体

大鼠关节软骨细胞完全培养基 100mL 干扰素诱导蛋白AIM2抗体

大鼠胎儿真皮成纤维细胞完全培养基 100mL 水通道蛋白-2抗体

大鼠胎儿表皮角质形成层细胞完全培养基 100mL 抑制基因ABI2/精氨酸酪氨酸蛋白激酶结合蛋白抗体

大鼠成年表皮角质形成层细胞完全培养基 100mL ADP核糖基化因子样11抗体

大鼠表皮角质形成细胞完全培养基 100mL ARM重复X连锁蛋白ARMCX3抗体

大鼠皮下脂肪细胞完全培养基 100mL ARM重复X连锁蛋白ARMCX1抗体

大鼠内脏脂肪细胞完全培养基 100mL ARM重复X连锁蛋白ARMCX2抗体

大鼠表皮黑色素细胞完全培养基 100mL 自噬相关蛋白10抗体

大鼠脑动脉血管内皮细胞完全培养基 100mL 酰基辅酶A结合结构域蛋白6抗体

大鼠脑动脉血管平滑肌细胞完全培养基 100mL 氨基酰化酶1抗体

大鼠脑静脉血管内皮细胞完全培养基 100mL 脂肪甘油三酯脂酶抗体

大鼠脑静脉血管平滑肌细胞完全培养基 100mL 磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α1抗体

大鼠脑膜细胞完全培养基 100mL 双调蛋白（结肠直肠细胞源性生长因子）抗体

大鼠神经元细胞完全培养基 100mL 磷酸化水通道蛋白2抗体

大鼠神经胶质细胞完全培养基 100mL 粘附相关激酶抗体

大鼠海马神经元细胞完全培养基 100mL 磷酸化粘附相关激酶抗体

大鼠脑微血管内皮细胞完全培养基 100mL 磷酸化蛋白激酶B抗体

大鼠脑成纤维细胞完全培养基 100mL 磷酸化水通道蛋白2抗体

大鼠神经小胶质细胞完全培养基 100mL 磷酸化APP淀粉样肽前体蛋白抗体

大鼠雪旺氏细胞完全培养基 100mL 磷酸化蛋白激酶B抗体

大鼠小脑颗粒细胞完全培养基 100mL 磷酸化APP淀粉样肽前体蛋白抗体

大鼠嗅鞘细胞完全培养基 100mL 磷酸化活化转录因子4抗体

大鼠视网膜微血管内皮细胞完全培养基 100mL 磷酸化雄体抗体

大鼠小梁网细胞完全培养基 100mL 磷酸化雄受体抗体

大鼠视网膜色素上皮细胞完全培养基 100mL 磷酸化蛋白激酶AKT1,2,3抗体

大鼠视网膜muller细胞 100mL 磷酸化蛋白激酶B抗体

大鼠虹膜色素上皮细胞完全培养基 100mL 磷酸化活化复制因子2抗体

大鼠晶状体上皮细胞完全培养基 100mL 凋亡相关蛋白3抗体

大鼠角膜上皮细胞完全培养基 100mL 自噬相关蛋白18抗体

大鼠角膜内皮细胞完全培养基 100mL 自噬相关蛋白4A抗体

大鼠视网膜神经节细胞完全培养基 100mL 载脂蛋白A4抗体

大鼠角膜成纤维细胞完全培养基 100mL 12脂氧合酶抗体

大鼠脉络膜血管细胞完全培养基 100mL 血管紧张素III抗体

大鼠牙**细胞完全培养基 100mL 腺苷酸环化酶3抗体

小鼠肺微血管内皮细胞完全培养基 100mL 血管动蛋白抗体

小鼠肺血管平滑肌细胞完全培养基 100mL 腺病毒早期E1A蛋白抗体

小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞完全培养基 100mL 磷酸化活化复制因子2抗体

小鼠气管上皮细胞完全培养基 100mL 磷酸化活化复制因子2抗体

小鼠气管平滑肌细胞完全培养基 100mL 磷酸化失调症蛋白1抗体

小鼠肺成纤维细胞完全培养基 100mL 锚蛋白重复结构域蛋白17抗体

小鼠支气管上皮细胞完全培养基 100mL 胞质乙醛脱氢酶1抗体

小鼠支气管成纤维细胞完全培养基 100mL ADP核糖基化样因子ARL3抗体

小鼠肺大静脉平滑肌细胞完全培养基 100mL 花生四烯酸15脂氧合酶1抗体

小鼠肺大动脉平滑肌细胞完全培养基 100mL 乳腺癌增强蛋白2抗体

NCI-H551[h551]细胞小鼠肺大动脉内皮细胞完全培养基 100mL α1微球蛋白抗体

小鼠肺动脉成纤维细胞完全培养基 100mL α晶状体球蛋白B/αB-crystallin抗体

小鼠肺大静脉内皮细胞完全培养基 100mL 腺苷A2b受体/神经生长因子1受体抗体

小鼠气管和支气管上皮细胞完全培养基 100mL AMPK的相关蛋白激酶5抗体

小鼠胰岛细胞完全培养基 100mL 致瘤磷蛋白32相关蛋白1抗体

小鼠胰腺星状细胞完全培养基 100mL 腺苷脱氨酶抗体

小鼠胰腺导管上皮细胞完全培养基 100mL 含锚蛋白重复序列-细胞因子信号抑制物盒蛋白家族4抗体

操作流程：

1、您收到母细胞后，请按照以下方法进行操作：

取出25cm2培养瓶，75%酒精擦拭培养瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2细胞培养箱中静置3-4小时以稳定细胞状态，然后换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。

2、细胞传代：

1）细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；

2）添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5min；

3）弃上清，沉淀细胞用12ml完全培养基重悬，然后按1:2比例进行分瓶传代，*后放入37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；

4）待细胞完全贴壁后，观察培养结果，之后进行换液培养或传代。

3、细胞冻存：

1）细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；

2）添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5min；

3）用适量的冻存液（FBS：DMSO=9 ：1）重悬细胞，并放置于冻存管中；

4）先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃过夜，24h后转入液氮中进行长期保存。使用程序降温盒可直接放入-80℃。 

4、细胞复苏：

1）从液氮中取出细胞冻存管（注意：佩戴防爆管面具），快速将其置入37℃水浴中解冻，直至冻存管中无结晶，然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁；

2）将冻存管中的细胞移至含5ml完全培养基的15ml离心管中， 1000rpm离心5min；

3）弃上清，沉淀用5ml完全培养基重悬，接种25cm2培养瓶，于37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；

4）换用新鲜完全培养基继续培养。