英文简称
规格
货号
SK-HEP-1-LUC-EGFP
1×106
P-X11322
产品详情：
细胞别称；SK-HEP-1-LUC-EGFP；人肝癌细胞-荧光素酶标记-绿色荧光蛋白；人肝癌细胞-LUC-EGFP
种属来源；人
年龄性别；男，52岁
组织来源；肝脏
生长特性；贴壁生长
细胞形态；上皮细胞样
puro药筛浓度；SK-HEP-1-LUC-EGFP细胞puro药筛浓度为1.0ug/ml，培养过程中建议使用0.5ug/ml浓度puro维持
细胞代数；10代以内
背景简介；SK-HEP-1细胞已被鉴定为内皮来源。SK-HEP-1细胞为异倍体女性人(XX)，染色体在亚三倍体范围内。在裸鼠中，SK-HEP-1细胞能形成与肝癌相一致的大细胞癌。Luciferase SK-HEP-1细胞稳定表达萤火虫荧光素酶。该细胞株性状稳定，培养时不需要添加维持。可用作萤火虫荧光素酶活性检测中的阳性对照，也可用于活体动物成像实验。SK-HEP-1细胞通过慢病毒转染的方式携带Luc和EGFP基因。
STR位点；Amelogenin:X；CSF1PO:11,12；D13S317:8,12；D16S539:12；D18S51:13,15；D21S11:29,31；D3S1358:15,16；D5S818:10,13；D7S820:8,11；D8S1179:13,14；FGA:17；PentaD:13,14；PentaE:13,21；TH01:7,9；TPOX:9；vWA:14,17
生物等级；1
细胞规格；1×106cells/T25或1mL冻存管
支原体检测；无
培养基；DMEM+10%FBS+PS+1. 0ug/ml puro
培养条件；气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃
干冰运输及复苏好存活细胞
（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
1）收到细胞后，75%酒精瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。
2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。
3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的完全培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
4）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议T25培养瓶1：2传代。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备DMEM培养基；胎牛血清，10%；双抗，1%。
2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
二．细胞处理：
1）冻存细胞的复苏：：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜
。天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。对于贴壁细胞传代可以参考以下方法：1、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2、加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3、轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3）细胞冻存:收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。下面T25瓶为例：
1、细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中，可使用血球计数板计数，来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml.
2、1000rpm离心3-5min，去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ，按每1ml冻存液含1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中，标注好名称、代数、日期等信息。
3、将要冻存的细胞置于程序降温盒中，-80度冰箱中过夜，之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
实验原理：
实验步骤：
1 将目的基因构建到合适的慢病毒载体上，利用293T细胞进行慢病毒包装，获得含目的基因的慢病毒；
2 转染前24 h进行细胞铺板，转染时细胞密度控制在80%左右；
3 天加入适量病毒悬液感染细胞，并置于37 ℃，5% CO2培养箱中孵育；
4 24 h后用新鲜培养基替换含有病毒的培养基，并继续培养；
5 在转染3-4天后开始加药筛选培养，直至显微镜下观察荧光细胞比例为100%，获得稳转细胞系。
公司正在出售的产品：
|
仓鼠细胞色素P450,家族7亚科A多肽1(CYP7A1)elisa生化检测试剂盒 |
鱼胰岛素(INS)elisa检测试剂盒免费代测 |
|
CYP7A1 ELISA kit |
人SPARC相关模块化钙结合蛋白2(SMOC2)elisa检测试剂盒 |
|
人端粒酶逆转录酶(TERT)elisa生化检测试剂盒 |
血液S-腺苷甲硫（SAM或AdoMet）酶连续循环比色法定量检测试剂盒 |
|
HumanTERTELISAKit |
大鼠阿立新A(Orexin A)elisa分析检测试剂盒 |
|
组织半胱-10（CASPASE-10）活性荧光定量检测试剂盒 |
小鼠肌苷三磷酸酶(ITPA)elisa检测试剂盒 |
|
人HSP60 IgG抗体elisa分析检测试剂盒 |
四分子交联体3/四旋蛋白3/四次跨膜蛋白3抗体 TSPAN3 |
|
大鼠toll样受体3(TLR3)elisa检测试剂盒 |
糖蛋白P43抗体 RBMX/hnRNP G |
|
小鼠绒毛膜促性腺β(β-CG)elisa分析检测试剂盒 |
Prader-Willi综合征相关蛋白抗体 FSD2 |
|
畸胎瘤衍化生长因子单克隆抗体 CRIPTO |
RasGTP酶激活蛋白IQGAP3抗体 IQGAP3 |
|
血管内皮生长因子受体1抗体 VEGFR1 |
2’,3’-环腺苷酸-3’-磷酸二酯酶抗体 CNPase |
|
岩藻糖转移酶1抗体 FUT1 |
3号染色体开放阅读框36抗体 C3orf36 |
|
蛋白酶体复合物C5抗体 PRPS1L1 |
肌球蛋白1E抗体 MYO1E |
|
凋亡相关蛋白1抗体 RYBP |
FITC标记小鼠CD49b单克隆抗体 mouse CD49b/FITC |
|
Fcγ球蛋白IgG结合蛋白抗体 FCGBP |
人肝癌细胞;SK-HEP-1-luc-EGFP磷脂酰肌醇激酶（PI3Kβ）抗体 PI3 Kinase p110 beta |
|
钠离子通道β1抗体 SCN1B |
细胞CASPASE-7蛋白表达荧光定量检测试剂盒 |
|
即用型正常兔血清 100ml |
小鼠T-细胞激活连接蛋白(LAT)elisa检测试剂盒 |
![SW 626 [SW-626, SW626]人卵巢癌细胞](http://y3.yzimgs.com/uploads/543188/2024918-13499611.jpg?imageView2/2/w/200/h/200|watermark/2/text/5LiK5rW35Y2a5rmW55Sf54mp56eR5oqA5pyJ6ZmQ5YWs5Y-4/font/5a6L5L2T/fontsize/300/fill/I0E3QTlBOA==/gravity/SouthEast)
![SW 156 [SW-156, SW156]人肾细胞癌细胞](http://y1.yzimgs.com/uploads/543188/2024918-134910262.jpg?imageView2/2/w/200/h/200|watermark/2/text/5LiK5rW35Y2a5rmW55Sf54mp56eR5oqA5pyJ6ZmQ5YWs5Y-4/font/5a6L5L2T/fontsize/300/fill/I0E3QTlBOA==/gravity/SouthEast)
![NCI-H920 [H920] 人非小细胞肺癌细胞](http://y2.yzimgs.com/uploads/543188/2024918-134912242.jpg?imageView2/2/w/200/h/200|watermark/2/text/5LiK5rW35Y2a5rmW55Sf54mp56eR5oqA5pyJ6ZmQ5YWs5Y-4/font/5a6L5L2T/fontsize/300/fill/I0E3QTlBOA==/gravity/SouthEast)
![NCI-H889 [H889] 人小细胞肺癌细胞](http://y1.yzimgs.com/uploads/543188/2024918-13491379.jpg?imageView2/2/w/200/h/200|watermark/2/text/5LiK5rW35Y2a5rmW55Sf54mp56eR5oqA5pyJ6ZmQ5YWs5Y-4/font/5a6L5L2T/fontsize/300/fill/I0E3QTlBOA==/gravity/SouthEast)