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  • 产品名称:人肝癌细胞+LUC;SK-HEP-1-LUC

  • 产品型号:P-X11313
  • 产品**:派瑞曼
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简单介绍:
人肝癌细胞+LUC;SK-HEP-1-LUC公司正在出售的产品:SNU-46鳞状细胞癌,扁平上皮癌细胞 骨形态形成蛋白拮抗蛋白抗体 TNF-α ELISA Kit 猴肿瘤坏死因子定量elisa kit 甘氨酸受体α1+甘氨酸受体α2抗体 SJSA-1骨肉瘤细胞
详情介绍:

细胞接收后的处理:


1)收到细胞后,75%酒精瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3)贴壁细胞:细胞在37℃培养箱中放置2-3h,显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况,有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下,可去除培养瓶中灌液培养基(若有未贴壁的细胞需要离心回收,重悬打入到原培养瓶中),加入新配制的完全培养基6-8mL,放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上,可以对细胞进行传代处理。传代过程中,若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。

4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议T25培养瓶1:2传代。

人肝癌细胞+LUC;SK-HEP-1-LUC


英文简称

规格

货号

SK-HEP-1-LUC

1×106

P-X11313

产品详情:


细胞别称;SK-HEP-1-LUC;人肝癌细胞-荧光素酶标记;SK-HEP-1-LUC-人肝癌细胞

种属来源;人

年龄性别;男,52

组织来源;肝脏

生长特性;贴壁生长

细胞形态;上皮细胞样

细胞代数;10代以内

背景简介;SK-HEP-1细胞已被鉴定为内皮来源。SK-HEP-1细胞为异倍体女性人(XX),染色体在亚三倍体范围内。在裸鼠中,SK-HEP-1细胞能形成与肝癌相一致的大细胞癌。Luciferase SK-HEP-1细胞稳定表达萤火虫荧光素酶。该细胞株性状稳定,培养时不需要添加维持。可用作萤火虫荧光素酶活性检测中的阳性对照,也可用于活体动物成像实验。SK-HEP-1细胞通过慢病毒转染的方式携带Luc基因。

STR位点;Amelogenin:XCSF1PO:11,12D13S317:8,12D16S539:12D18S51:13,15D21S11:29,31D3S1358:15,16D5S818:10,13D7S820:8,11D8S1179:13,14FGA:17PentaD:13,14PentaE:13,21TH01:7,9TPOX:9vWA:14,17

生物等级;1

细胞规格;1×106cells/T251mL冻存管

支原体检测;无

保藏机构;ATCC; HTB-52 DSMZ; ACC-141 ECACC; 91091816

培养基;DMEM+10%FBS+PS+1. 0ug/ml puro

培养条件;气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃

干冰运输及复苏好存活细胞

(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。

(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。


一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备DMEM培养基;胎牛血清,10%;双抗,1%。
2)培养条件:气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二.细胞处理:

1)冻存细胞的复苏::将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜

。天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。对于贴壁细胞传代可以参考以下方法:
1、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2、加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。 
3、轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3)细胞冻存:收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。下面T25瓶为例:
1、细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml.
2、1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。
3、将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。

实验原理:


公司正在出售的产品:

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活性检测试剂盒-AlamarBlue1000T

KIF1C

胞粘蛋白结合调节蛋白抗体  Anti-PSCDBP/CYTIP

斯钙素抗体  Anti-Stanniocalcin 1

人肝癌细胞+LUC;SK-HEP-1-LUC溶质载体蛋白家族21成员2抗体  Anti-PGT/Slco2a1

突触囊泡融合蛋白Unc18-3抗体  Anti-Unc18-3

Goat Anti-Rabbit IgG H&L / Streptavidin

链霉亲和素标记山羊抗兔IgG H&L

半乳糖凝集素2抗体

实验步骤:


1 将目的基因构建到合适的慢病毒载体上,利用293T细胞进行慢病毒包装,获得含目的基因的慢病毒;
2 转染前24 h进行细胞铺板,转染时细胞密度控制在80%左右;
3 天加入适量病毒悬液感染细胞,并置于37 ℃,5% CO2培养箱中孵育;
4 24 h后用新鲜培养基替换含有病毒的培养基,并继续培养;
5 在转染3-4天后开始加药筛选培养,直至显微镜下观察荧光细胞比例为100%,获得稳转细胞系。


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