人胃癌细胞+luc;NCI-N87-LUC-EGFP-PURO 上海博湖生物科技有限公司

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产品名称：人胃癌细胞+luc;NCI-N87-LUC-EGFP-PURO
产品型号：P-X11312
产品**：派瑞曼
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简单介绍：

人胃癌细胞+luc;NCI-N87-LUC-EGFP-PURO公司正在出售的产品：SNU-475肝核糖核酸结合蛋白1抗体 mitochondrial(Mn-SOD/SOD2)ELISA Kit 马锰超氧化物歧化酶定量elisa kit 高度发散源异型盒

详情介绍：

细胞接收后的处理：

1）收到细胞后，75%酒精瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。
2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。
3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的完全培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。

4）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议T25培养瓶1：2传代。

人胃癌细胞+luc;NCI-N87-LUC-EGFP-PURO

英文简称

规格

货号

NCI-N87-EGFP-LUC

1×106

P-X11312

产品详情：

细胞别称；NCI-N87-EGFP-LUC；人胃癌细胞-绿色荧光蛋白-荧光素酶标记；NCI-N87-绿色荧光蛋白-荧光素酶标记

种属来源；人

组织来源；胃

生长特性；贴壁生长

形态特征；上皮细胞样

特别注意；NCI-N87-LUC-EGFP细胞培养过程中会长空泡，属于正常现象

puro药筛浓度；NCI-N87细胞puro药筛浓度为0.5ug/ml，培养过程中建议使用0.2ug/ml浓度puro维持

背景简介；NCI-N87细胞表达表面糖蛋白癌胚抗原(CEA)和TAG 72, 并且没有多巴胺脱羧酶(DDC)活性。它们的血管活性的肠肽(VIP)受体活性极低并缺乏胃泌受体。它们表达蕈毒碱胆碱受体。没有证据表明存在N-myc, L-myc, myb和EGF受体基因的重组。这个细胞株表达的c-myc和c-erb-B 2 RNA水平与其它细胞株相当。以下基因不表达: N-myc, L-myc, c-cis, IGF-2, 或胃泌释放肽。据报道NCI-N87 细胞的植板率为4.3%。Luciferase NCI-N87细胞稳定表达萤火虫荧光素酶和绿色荧光蛋白。该细胞株性状稳定，培养时不需要添加维持。可用作萤火虫荧光素酶活性检测中的阳性对照，也可用于活体动物成像实验。NCI-N87细胞通过慢病毒转染的方式携带Luc基因。

STR位点；Amelogenin：X，Y；CSF1PO：8,12；D13S317：8,11；D16S539：9，13；D18S51：17；D19S433：14,14.2；D21S11：30；D2S1338：23，24；D3S1358：14；D5S818：12,13；D7S820：10,11；D8S1179：14；FGA：20,21；TH01：9；TPOX：9,11；vWA：15，16；

保藏机构；ATCC; CRL-5822；中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心

产品规格；1x106cells/T25细胞培养瓶

培养基；90%RPMI-1640+10%FBS

培养条件；气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃

干冰运输及复苏好存活细胞

（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。

（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。

一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备DMEM培养基；胎牛血清，10%；双抗，1%。
2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
二．细胞处理：

1）冻存细胞的复苏：：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜

。天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。对于贴壁细胞传代可以参考以下方法：
1、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2、加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3、轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3）细胞冻存:收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。下面T25瓶为例：
1、细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中，可使用血球计数板计数，来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml.
2、1000rpm离心3-5min，去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞，按每1ml冻存液含1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中，标注好名称、代数、日期等信息。
3、将要冻存的细胞置于程序降温盒中，-80度冰箱中过夜，之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。

实验原理：

公司正在出售的产品：

转化生长因子β2(TGFβ2)elisa生化检测试剂盒

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HumanCalprotectin检测试剂盒

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人钙卫蛋白elisa分析检测试剂盒

humanResistinELISAKIT

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HSPC302/TBCK

人P16elisa检测试剂盒

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大鼠脂多糖（LPS）elisa检测试剂盒

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山羊甲状腺素(T4)elisa检测试剂盒免费代测

PELO

乳品三聚氰胺快速显色定性检测试剂盒（家用型/工业型）

FLJ36492蛋白抗体

活体细胞线粒体膜通道孔（MPTP）红色荧光（TMRM）检测试剂盒

CCDC144B

凋亡相关蛋白6抗体 Anti-PDCD6/ALG2

转录中介因子Tif1γ抗体 Anti-TIF1 gamma/Trim33

人胃癌细胞+luc;NCI-N87-LUC-EGFP-PURO磷酸化蛋白酪氨酸激酶9抗体 Anti-phospho-PTK9/TWF1(Tyr321)

丝氨酸蛋白酶抑制剂B10抗体 Anti-SERPINB10

Donkey Anti-Human IgG H&L / RBITC

罗丹明标记的驴抗人IgG H&L

突触融合蛋白结合蛋白5抗体

实验步骤：

1 将目的基因构建到合适的慢病毒载体上，利用293T细胞进行慢病毒包装，获得含目的基因的慢病毒；
2 转染前24 h进行细胞铺板，转染时细胞密度控制在80%左右；
3 天加入适量病毒悬液感染细胞，并置于37 ℃，5% CO2培养箱中孵育；
4 24 h后用新鲜培养基替换含有病毒的培养基，并继续培养；
5 在转染3-4天后开始加药筛选培养，直至显微镜下观察荧光细胞比例为100%，获得稳转细胞系。

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转化生长因子β2(TGFβ2)elisa生化检测试剂盒	CTGF检测试剂盒
TGFβ2 ELISA Kit	HumanCalprotectin检测试剂盒
人抵抗素(Resistin)elisa生化检测试剂盒	人钙卫蛋白elisa分析检测试剂盒
humanResistinELISAKIT	PⅢCP ELISA Kit
小鼠抗环胍氨酸肽抗体(Anti-CCP-antibody)elisa检测试剂盒	大鼠Ⅲ型前胶原C端肽(PⅢCP)elisa分析检测试剂盒
大鼠α葡萄糖苷酶(a-Glu)elisa检测试剂盒	TBC结构域的蛋白激酶样蛋白抗体
总胆汁酸（TBA）定量检测试剂盒	HSPC302/TBCK
人P16elisa检测试剂盒	2-氨基乙硫醇双加氧酶抗体
大鼠脂多糖（LPS）elisa检测试剂盒	ADO
PELO蛋白抗体	山羊甲状腺素(T4)elisa检测试剂盒免费代测
PELO	乳品三聚氰胺快速显色定性检测试剂盒（家用型/工业型）
FLJ36492蛋白抗体	活体细胞线粒体膜通道孔（MPTP）红色荧光（TMRM）检测试剂盒
CCDC144B	凋亡相关蛋白6抗体 Anti-PDCD6/ALG2
转录中介因子Tif1γ抗体 Anti-TIF1 gamma/Trim33	人胃癌细胞+luc;NCI-N87-LUC-EGFP-PURO磷酸化蛋白酪氨酸激酶9抗体 Anti-phospho-PTK9/TWF1(Tyr321)
丝氨酸蛋白酶抑制剂B10抗体 Anti-SERPINB10	Donkey Anti-Human IgG H&L / RBITC
罗丹明标记的驴抗人IgG H&L	突触融合蛋白结合蛋白5抗体

产品名称：人胃癌细胞+luc;NCI-N87-LUC-EGFP-PURO