HCT-8/LUC (STR)人结肠癌细胞带荧光素酶上海博湖生物科技有限公司

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产品名称：HCT-8/LUC (STR)人结肠癌细胞带荧光素酶
产品型号：P-X10403
产品**：派瑞曼
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简单介绍：

HCT-8/LUC (STR)人结肠癌细胞带荧光素酶公司正在出售的产品：小鼠肺腺癌细胞系；LA795 小鼠Lewis肺癌瘤株；LLT 大鼠CD44分子(CD44)elisa检测试剂盒免费代测原钙粘附蛋白β14抗体 PCDHB14

详情介绍：

细胞接收后的处理：

1）收到细胞后，75%酒精瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。
2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。
3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的完全培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。

4）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议T25培养瓶1：2传代。

HCT-8/LUC (STR)人结肠癌细胞带荧光素酶

英文简称

规格

货号

HCT-8/LUC

1×106

P-X10403

产品详情：

种属来源:人

性别年龄： 67 岁，男性

组织来源：结肠

生长特性：贴壁生长

细胞形态: 上皮细胞样

细胞规格: 1 X 10 6cells/T25 或 1 mL 冻存管

培养条件: RPMI1640+10%fetal bovine serum37 ℃, 5% CO2

冻存条件: 90% FBS + 10% DMSO

传代方法：1:3 传代, 2-3 天传 1 代

干冰运输及复苏好存活细胞

（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。

（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。

一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备DMEM培养基；胎牛血清，10%；双抗，1%。
2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
二．细胞处理：

1）冻存细胞的复苏：：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜

。天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。对于贴壁细胞传代可以参考以下方法：
1、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2、加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3、轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3）细胞冻存:收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。下面T25瓶为例：
1、细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中，可使用血球计数板计数，来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml.
2、1000rpm离心3-5min，去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞，按每1ml冻存液含1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中，标注好名称、代数、日期等信息。
3、将要冻存的细胞置于程序降温盒中，-80度冰箱中过夜，之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。

实验原理：

公司正在出售的产品：

线粒体铁转运蛋白2抗体 Anti-SLC25A28/Mitoferrin 2

精子顶端体相关蛋白7抗体 Anti-SPAC7/C13ORF28

原癌基因c-Met相关酪氨酸激酶抗体 Anti-Ron/MST1R

泛素样蛋白NEDD8抗体

抑癌基因NDRG3抗体 Anti-NDRG3

外致密纤维精子尾部蛋白4抗体

斑联蛋白抗体 Anti-Zyxin/ESP 2

Hepatitis C Virus otype 1a NS5

NEDD8

丙型肝炎病毒1a基因型NS5蛋白抗体

Gastrokine 3蛋白抗体

磷酸化蛋白激酶C(T500)抗体 Anti-phospho-PRKCZ(Thr500)

Gastrokine 3

增食欲素B/欲B Anti-Orexin B

胸腺素抗体 Anti-Thymulin

ODF4

大鼠白细胞活化黏附因子(ALCAM)elisa生化检测试剂盒

血管内皮生长因子B抗体 Anti-VEGF-B

ALCAM ELISA Kit

核小体组装蛋白1抗体 Anti-NAP1L1

人基质金属蛋白酶8/中性粒细胞胶原酶(MMP-8)elisa生化检测试剂盒

RhoB蛋白抗体 Anti-Rho B

MMP-8ELISAkit

磷酸化埃兹蛋白抗体 Anti-Phospho-Ezrin (Tyr146)

人Seryl- tRNA合成酶，细胞质(SARS/SERS)elisa生化检测试剂盒

小鼠高灵敏度促甲状腺(U-TSH)elisa生化检测试剂盒

体液镁离子（Mg）浓度化学比色法定量检测试剂盒

HCT-8/LUC (STR)人结肠癌细胞带荧光素酶大鼠β-转导重复相容蛋白(β-TrCP)elisa检测试剂盒

组蛋白赖氨酸N-甲基2G抗体

细胞周期蛋白依赖性激酶调节亚基1抗体

KMT2G

CKS1

实验步骤：

1 将目的基因构建到合适的慢病毒载体上，利用293T细胞进行慢病毒包装，获得含目的基因的慢病毒；
2 转染前24 h进行细胞铺板，转染时细胞密度控制在80%左右；
3 天加入适量病毒悬液感染细胞，并置于37 ℃，5% CO2培养箱中孵育；
4 24 h后用新鲜培养基替换含有病毒的培养基，并继续培养；
5 在转染3-4天后开始加药筛选培养，直至显微镜下观察荧光细胞比例为100%，获得稳转细胞系。

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线粒体铁转运蛋白2抗体 Anti-SLC25A28/Mitoferrin 2	精子顶端体相关蛋白7抗体 Anti-SPAC7/C13ORF28
原癌基因c-Met相关酪氨酸激酶抗体 Anti-Ron/MST1R	泛素样蛋白NEDD8抗体
抑癌基因NDRG3抗体 Anti-NDRG3	外致密纤维精子尾部蛋白4抗体
斑联蛋白抗体 Anti-Zyxin/ESP 2	Hepatitis C Virus otype 1a NS5
NEDD8	丙型肝炎病毒1a基因型NS5蛋白抗体
Gastrokine 3蛋白抗体	磷酸化蛋白激酶C(T500)抗体 Anti-phospho-PRKCZ(Thr500)
Gastrokine 3	增食欲素B/欲B Anti-Orexin B
胸腺素抗体 Anti-Thymulin	ODF4
大鼠白细胞活化黏附因子(ALCAM)elisa生化检测试剂盒	血管内皮生长因子B抗体 Anti-VEGF-B
ALCAM ELISA Kit	核小体组装蛋白1抗体 Anti-NAP1L1
人基质金属蛋白酶8/中性粒细胞胶原酶(MMP-8)elisa生化检测试剂盒	RhoB蛋白抗体 Anti-Rho B
MMP-8ELISAkit	磷酸化埃兹蛋白抗体 Anti-Phospho-Ezrin (Tyr146)
人Seryl- tRNA合成酶，细胞质(SARS/SERS)elisa生化检测试剂盒	小鼠高灵敏度促甲状腺(U-TSH)elisa生化检测试剂盒
体液镁离子（Mg）浓度化学比色法定量检测试剂盒	HCT-8/LUC (STR)人结肠癌细胞带荧光素酶大鼠β-转导重复相容蛋白(β-TrCP)elisa检测试剂盒
组蛋白赖氨酸N-甲基2G抗体	细胞周期蛋白依赖性激酶调节亚基1抗体
KMT2G	CKS1

产品名称：HCT-8/LUC (STR)人结肠癌细胞带荧光素酶