产品名称：SNU-398人肝癌细胞

SNU-398人肝癌细胞

英文名称	SNU398：SNU-398	产品形态	上皮细胞样 多数贴壁少量悬浮，
货号	P-X971	产品分类	人
规格	1×106	包装	株
来源	肝组织	用途	仅供科研研究使用

细胞特性：

细胞介绍

SNU-398 于 1990 年由 J.-G. Park 及其同事取自一名韩国患者的间变性肝细胞癌，该患者已通过脂质体加多柔比星和丝裂霉素-C 的组合进行了经导管动脉栓塞。既可以附着细胞也可以悬浮细胞。悬浮的细胞是可行的，不应丢弃。通过温和离心 (125 xg) 回收悬浮细胞，以与贴壁细胞群一起进行继代培养。

细胞特性

1） 来源：人，肝组织

2） 形态：上皮样，多数贴壁少量悬浮，

3） 含量：>1x10^6 细胞数

4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

5）用途：仅供科研使用。

干冰运输及复苏好存活细胞

细胞接收后的处理：
1）收到细胞后，75%酒精瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。
2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据
3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的完全培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
4）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。  收到细胞后次传代建议T25培养瓶1：2传代 。                      
一．培养基及培养冻存条件准备：
1） 准备MEM（推荐iCell-0012）培养基；胎牛血清，10%；双抗，1%。
2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。

3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。

二、细胞培养操作:

1) 复苏细胞：将含有 1 mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 4 mL 培养基混 合均匀。在 1000 rpm 条件下离心 3 min，弃去上清液，加 1-2 mL 培养基后吹匀。然后将所有 细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜 (或将细胞悬液加入 6 cm 皿中，加入约 4 mL 培养基，培养过夜) 。天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。 a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
b、加 1 mL 消化液 (0.25%Trypsin-0.53mM EDTA) 于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，弃去 消化液，将培养瓶置于 37℃培养箱中消化 1 -3min (视细胞消化情况而定) ，然后在显微镜下 观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心5 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。        。
c、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。
3) 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例；
a、收集细胞，装入无菌离心管中，1000 rpm 条件下离心 4 min，弃去上清液， 用 PBS 清洗一遍，弃尽 PBS，进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度 5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻 存管冻存 1mL 细胞悬液，注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h 后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
三、培养注意事项:

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象 发生请及时和我们联系。 
2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需 细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由 客户自行承担。 
3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度 变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。 
4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，弃上 清。加 5 mL PBS 重悬细胞，再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，，用新鲜的完全培养基重悬 细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。 
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。 
6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通 交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞 的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。 
7. 该细胞仅供科研使用。 
8. 备注：运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培 养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议 1：2 传代 。 
9. 注意：  1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。

公司正在出售的产品：

人S100钙结合蛋白A12/钙粒蛋白C(S100A12)elisa生化检测试剂盒	WBP2蛋白抗体  Anti-WBP2
组织FLT3激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）	甲基CpG结合域蛋白3样2抗体
小鼠嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)elisa检测试剂盒	X染色体开放阅读框26抗体
大鼠基质金属蛋白酶9/明胶酶B(MMP-9/Gelatinase B) elisa检测试剂盒	TMC6
MBD3L2	疣状表皮发育蛋白1抗体
19号染色体开放阅&#	环指蛋白74抗体（重组激活基因1）  Anti-RAG1/RNF74
C19orf43	神经连接蛋白2抗体  Anti-NLGN2
外纺锤体样蛋白1抗体  Anti-Separase	CXorf26
HRP标记的标记猪IgG	液泡蛋白分选受体SORCS抗体  Anti-SORCS1
Pig IgG / HRP	蛋白酶体PSMα4/20S Proteasome α4抗体  Anti-PSMA4
GW182蛋白抗体	桩蛋白Paxillin抗体  Anti-Paxillin
GW182	T细胞白血病同源蛋白2抗体  Anti-TLX2
大鼠基质金属蛋白酶4(MMP-4)elisa生化检测试剂盒	小鼠Ⅱ型胶原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)elisa生化检测试剂盒
MMP-4 ELISA Kit	SNU-398人肝癌细胞MouseHELIX-ⅡELISAKit
造血干细胞特异性相关结合蛋白3抗体	肌动蛋白相关蛋白1抗体
HS1BP3	ACTR1A