SK-MEL-28人黑素瘤细胞上海博湖生物科技有限公司

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产品名称：SK-MEL-28人黑素瘤细胞
产品型号：P-X9223
产品**：派瑞曼
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简单介绍：

SK-MEL-28人黑素瘤细胞公司正在出售的产品：WB-F344（大鼠肝上皮样干细胞） HL-60（人原髓细胞白血病细胞）大鼠5'-AMP活化蛋白激酶α-2催化亚基(PRKAA2)elisa生化检测试剂盒利钠肽受体A抗体 Natriuretic Peptide Receptor A

详情介绍：

细胞接收后的处理：

1）收到细胞后，75%酒精瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。
2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。
3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的完全培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。

4）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议T25培养瓶1：2传代。

SK-MEL-28人黑素瘤细胞

英文简称

规格

货号

Loucy：Loucy

1×106

P-X9223

产品详情：

细胞介绍

该细胞是T. Takahashi和他同事分离的一系列黑色素瘤中的一株。

细胞特性

1）来源：人黑色素瘤

2）形态：多边形贴壁生长

3）含量：>1x10^6 细胞数

4）规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

5）用途：仅供科研使用。

干冰运输及复苏好存活细胞

（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。

（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。

一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备DMEM培养基；胎牛血清，10%；双抗，1%。
2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
二．细胞处理：

1）冻存细胞的复苏：：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜

。天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。对于贴壁细胞传代可以参考以下方法：
1、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2、加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3、轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3）细胞冻存:收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。下面T25瓶为例：
1、细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中，可使用血球计数板计数，来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml.
2、1000rpm离心3-5min，去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞，按每1ml冻存液含1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中，标注好名称、代数、日期等信息。
3、将要冻存的细胞置于程序降温盒中，-80度冰箱中过夜，之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。

实验原理：

公司正在出售的产品：

细胞总乳酸比色法定量检测试剂盒

载玻片细胞BAD蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒

蔗糖酶测试盒

Ran结合蛋白11抗体

超氧化物歧化酶（SOD）试剂盒

转录调节因子C/EBPδ抗体

小鼠抗凝血酶Ⅲ抗体(AT-Ⅲ)elisa检测试剂盒

R Cadherin

IPO11

R Cadherin/CDH4

β淀粉样前体蛋白结合蛋白2抗体

小鼠D-多巴色素变位酶(DDT)elisa检测试剂盒

APBA2

大鼠血管内皮生长因子B(VEGFB)elisa检测试剂盒

细胞乙醇比色法定量检测试剂盒

CEBP Delta

Cy5.5标记的驴抗人IgG H&L

泛素蛋白连接酶U抗体 Anti-UBE2U

Donkey Anti-Human IgG H&L / Cy5.5

组蛋白精氨酸甲基转移酶5抗体 Anti-PRMT5

ZCWPW2蛋白抗体

磷酸化磷脂酰肌醇激酶（PI3Kβ）抗体 Anti-phospho-PI3 Kinase p110 beta(Ser1070)

ZCWPW2

固醇调节元件结合蛋白裂解激活蛋白抗体 Anti-SCAP/SREBF chaperone protein

牛血清白蛋白(ALB)elisa生化检测试剂盒

小鼠谷氨酸脱羧酶自身抗体IgG(GAD-Ab-IgG)elisa生化检测试剂盒

ALB ELISA kit

SK-MEL-28人黑素瘤细胞GAD-Ab-IgGELISAKit

仓鼠核因子κB(NF-κB)elisa生化检测试剂盒

人调宁蛋白-1(CNN1)elisa生化检测试剂盒

NF-κB Elisa Kit

CNN1ELISAKit

实验步骤：

1 将目的基因构建到合适的慢病毒载体上，利用293T细胞进行慢病毒包装，获得含目的基因的慢病毒；
2 转染前24 h进行细胞铺板，转染时细胞密度控制在80%左右；
3 天加入适量病毒悬液感染细胞，并置于37 ℃，5% CO2培养箱中孵育；
4 24 h后用新鲜培养基替换含有病毒的培养基，并继续培养；
5 在转染3-4天后开始加药筛选培养，直至显微镜下观察荧光细胞比例为100%，获得稳转细胞系。

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细胞总乳酸比色法定量检测试剂盒	载玻片细胞BAD蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒
蔗糖酶测试盒	Ran结合蛋白11抗体
超氧化物歧化酶（SOD）试剂盒	转录调节因子C/EBPδ抗体
小鼠抗凝血酶Ⅲ抗体(AT-Ⅲ)elisa检测试剂盒	R Cadherin
IPO11	R Cadherin/CDH4
β淀粉样前体蛋白结合蛋白2抗体	小鼠D-多巴色素变位酶(DDT)elisa检测试剂盒
APBA2	大鼠血管内皮生长因子B(VEGFB)elisa检测试剂盒
细胞乙醇比色法定量检测试剂盒	CEBP Delta
Cy5.5标记的驴抗人IgG H&L	泛素蛋白连接酶U抗体 Anti-UBE2U
Donkey Anti-Human IgG H&L / Cy5.5	组蛋白精氨酸甲基转移酶5抗体 Anti-PRMT5
ZCWPW2蛋白抗体	磷酸化磷脂酰肌醇激酶（PI3Kβ）抗体 Anti-phospho-PI3 Kinase p110 beta(Ser1070)
ZCWPW2	固醇调节元件结合蛋白裂解激活蛋白抗体 Anti-SCAP/SREBF chaperone protein
牛血清白蛋白(ALB)elisa生化检测试剂盒	小鼠谷氨酸脱羧酶自身抗体IgG(GAD-Ab-IgG)elisa生化检测试剂盒
ALB ELISA kit	SK-MEL-28人黑素瘤细胞GAD-Ab-IgGELISAKit
仓鼠核因子κB(NF-κB)elisa生化检测试剂盒	人调宁蛋白-1(CNN1)elisa生化检测试剂盒
NF-κB Elisa Kit	CNN1ELISAKit

产品名称：SK-MEL-28人黑素瘤细胞