人肺癌细胞;NCI-H3255 上海博湖生物科技有限公司

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产品名称：人肺癌细胞;NCI-H3255
产品型号：P-X11208
产品**：派瑞曼
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简单介绍：

人肺癌细胞;NCI-H3255公司正在出售的产品：人舌头鳞癌细胞；人前列腺癌细胞;PC3-LUC-EGFP 锌指蛋白分泌模块化钙结合蛋白2/平滑肌相关蛋白2SMOC2

详情介绍：

细胞接收后的处理：

1）收到细胞后，75%酒精瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。
2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。
3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的完全培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。

4）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议T25培养瓶1：2传代。

人肺癌细胞;NCI-H3255

英文简称

规格

货号

NCI-H3255

1×106

P-X11208

产品详情：

细胞别称；H3255；NCI-H3255；人肺癌细胞

种属来源；人

组织来源；肺

生长特性；贴壁生长

细胞形态；上皮细胞样

细胞代数；10代以内

细胞规格；1x106cells/T25或1mL冻存管

支原体检测；无

培养基；90%RPMI-1640+10% FBS

培养条件；气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃

冻存条件；无血清冻存液，液氮储存

干冰运输及复苏好存活细胞

（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。

（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。

一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备DMEM培养基；胎牛血清，10%；双抗，1%。
2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
二．细胞处理：

1）冻存细胞的复苏：：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜

。天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。对于贴壁细胞传代可以参考以下方法：
1、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2、加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3、轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3）细胞冻存:收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。下面T25瓶为例：
1、细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中，可使用血球计数板计数，来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml.
2、1000rpm离心3-5min，去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞，按每1ml冻存液含1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中，标注好名称、代数、日期等信息。
3、将要冻存的细胞置于程序降温盒中，-80度冰箱中过夜，之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。

实验原理：

公司正在出售的产品：

10倍合成基础培养液

S100B蛋白抗体 Anti-S100B

豚鼠主要组织相容性复合体(MHC/GPLA)elisa检测试剂盒

核糖体再循环因子MRRF抗体

大鼠肾上腺素能a1A受体(ADRA1A)elisa检测试剂盒

肌球蛋白14抗体

石蜡切片脂质过氧化物亚油酸（linoleic acid）荧光染色试剂盒

UCHL5IP

MRRF

泛素羧基末端水解酶5互相作用蛋白1抗体

烯醇化酶超家族成员1抗体

RAS的GTP酶激活蛋白抗体 Anti-RASA2

ENOSF1

神经生长因子受体相关蛋白1抗体 Anti-NADE/NGFRAP1

TBC结构域TBCD4蛋白抗体 Anti-TBCD4/TBC1D4

Myosin-14

大鼠干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)elisa生化检测试剂盒

8-羟基脱氧鸟苷抗体 Anti-8-OHdG/8 Hydroxyguanosine

SCF/MGF ELISA kit

神经肿瘤Nova2抗原抗体 Anti-Nova2

豚鼠促肾上腺皮质(ACTH)elisa生化检测试剂盒

维生素K依赖的蛋白C轻链抗体 Anti-protein C light chain

ACTHELISAkit

味觉2型受体蛋白家族49抗体 Anti-TAS2R49

小鼠前列腺素E2(PGE2)elisa生化检测试剂盒

组织包埋试剂盒

大鼠TNFα IRelisa检测试剂盒

人肺癌细胞;NCI-H3255人F-肌动蛋白(F-actin)elisa检测试剂盒免费代测

1号染色体开放阅读框73抗体

6号染色体开放阅读框226抗体

INTS7/C1orf73

C6orf226

实验步骤：

1 将目的基因构建到合适的慢病毒载体上，利用293T细胞进行慢病毒包装，获得含目的基因的慢病毒；
2 转染前24 h进行细胞铺板，转染时细胞密度控制在80%左右；
3 天加入适量病毒悬液感染细胞，并置于37 ℃，5% CO2培养箱中孵育；
4 24 h后用新鲜培养基替换含有病毒的培养基，并继续培养；
5 在转染3-4天后开始加药筛选培养，直至显微镜下观察荧光细胞比例为100%，获得稳转细胞系。

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10倍合成基础培养液	S100B蛋白抗体 Anti-S100B
豚鼠主要组织相容性复合体(MHC/GPLA)elisa检测试剂盒	核糖体再循环因子MRRF抗体
大鼠肾上腺素能a1A受体(ADRA1A)elisa检测试剂盒	肌球蛋白14抗体
石蜡切片脂质过氧化物亚油酸（linoleic acid）荧光染色试剂盒	UCHL5IP
MRRF	泛素羧基末端水解酶5互相作用蛋白1抗体
烯醇化酶超家族成员1抗体	RAS的GTP酶激活蛋白抗体 Anti-RASA2
ENOSF1	神经生长因子受体相关蛋白1抗体 Anti-NADE/NGFRAP1
TBC结构域TBCD4蛋白抗体 Anti-TBCD4/TBC1D4	Myosin-14
大鼠干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)elisa生化检测试剂盒	8-羟基脱氧鸟苷抗体 Anti-8-OHdG/8 Hydroxyguanosine
SCF/MGF ELISA kit	神经肿瘤Nova2抗原抗体 Anti-Nova2
豚鼠促肾上腺皮质(ACTH)elisa生化检测试剂盒	维生素K依赖的蛋白C轻链抗体 Anti-protein C light chain
ACTHELISAkit	味觉2型受体蛋白家族49抗体 Anti-TAS2R49
小鼠前列腺素E2(PGE2)elisa生化检测试剂盒	组织包埋试剂盒
大鼠TNFα IRelisa检测试剂盒	人肺癌细胞;NCI-H3255人F-肌动蛋白(F-actin)elisa检测试剂盒免费代测
1号染色体开放阅读框73抗体	6号染色体开放阅读框226抗体
INTS7/C1orf73	C6orf226

产品名称：人肺癌细胞;NCI-H3255