人皮肤黑色素瘤细胞+LUC；SK-MEL-2+LUC 上海博湖生物科技有限公司

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产品名称：人皮肤黑色素瘤细胞+LUC；SK-MEL-2+LUC
产品型号：P-X10789
产品**：派瑞曼
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简单介绍：

人皮肤黑色素瘤细胞+LUC；SK-MEL-2+LUC公司正在出售的产品：A549（人非小细胞肺癌细胞） C6（大鼠胶质瘤细胞）磺酰脲类受体1抗体 Anti-SUR1 ZC4H2蛋白抗体 ZC4H2

详情介绍：

细胞接收后的处理：

1）收到细胞后，75%酒精瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。
2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。
3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的完全培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。

4）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议T25培养瓶1：2传代。

人皮肤黑色素瘤细胞+LUC；SK-MEL-2+LUC

英文简称

规格

货号

LUCSK-MEL-2+LUC

1×106

P-X10789

产品详情：

细胞别称；SK-MEL-2-LUC；人皮肤黑色素瘤细胞-LUC；人皮肤黑色素瘤细胞株-荧光素酶标记

种属来源；人

组织来源；皮肤

生长特性；贴壁生长

细胞形态；上皮细胞样

背景介绍；Luciferase SK-MEL-2-LUC细胞稳定表达萤火虫荧光素酶。该细胞株性状稳定，培养时不需要添加维持。可用作萤火虫荧光素酶活性检测中的阳性对照，也可用于活体动物成像实验。该细胞通过慢病毒转染的方式携带Luc基因。

生物等级；1

细胞规格；1x106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装

支原体检测；无

保藏机构；ATCC; HTB-68 KCLB; 30068

培养基；MEM+10%FBS+1%双抗+1.0ug/ml puro

培养条件；气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃

冻存条件；无血清冻存液，液氮储存

干冰运输及复苏好存活细胞

（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。

（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。

一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备DMEM培养基；胎牛血清，10%；双抗，1%。
2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
二．细胞处理：

1）冻存细胞的复苏：：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜

。天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。对于贴壁细胞传代可以参考以下方法：
1、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2、加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3、轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3）细胞冻存:收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。下面T25瓶为例：
1、细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中，可使用血球计数板计数，来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml.
2、1000rpm离心3-5min，去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞，按每1ml冻存液含1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中，标注好名称、代数、日期等信息。
3、将要冻存的细胞置于程序降温盒中，-80度冰箱中过夜，之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。

实验原理：

公司正在出售的产品：

大鼠腺苷受体A2a(ADORA2A)elisa检测试剂盒

造血细胞磷酸酶抗体 Anti-SHP-1

细胞PAR-3蛋白表达荧光定量检测试剂盒

肌球蛋白结合蛋白C抗体

小鼠CD320分子(CD320)elisa检测试剂盒

短链脱氢还原酶12抗体

组织总RNA纯化试剂盒

ZW10

MYBPC1

着丝粒蛋白抗体

2号染色体开放阅读框71抗体

R-钙粘附分子抗体 Anti-R-cadherin/Cadherin 4

C2orf71

磷酸化细胞核受体Rev-Erbα抗体 Anti-Phospho-NR1D1(Ser55/59)

感光细胞转录因子TULP3抗体 Anti-TULP3

DHRS12

大鼠淀粉样前体蛋白(βAPP)elisa生化检测试剂盒

细胞骨架相关蛋白抗体 Anti-SM22 Alpha

βAPP ELISA Kit

核有丝分裂器NuMA蛋白抗体 Anti-NuMA

山羊白介素8(IL-8/CXCL8)elisa生化检测试剂盒

周期素D相关蛋白抗体 Anti-RUNX1T1/ETO

IL-8ELISAKit

跨膜蛋白161A抗体 Anti-TMEM161A

细胞无机磷/游离磷酸根离子比色法定量检测试剂盒

大鼠白细胞活化黏附因子(ALCAM)elisa检测试剂盒免费代测

人γ干扰素诱导蛋白16/p16(IFI16/p16)elisa检测试剂盒

人皮肤黑色素瘤细胞+LUC；SK-MEL-2+LUC小鼠细胞色素P450家族成员27B1(CYP27B1)elisa检测试剂盒

钾离子通道蛋白家族成员1抗体

真核翻译起始因子2C3抗体

KCNE1

Argonaute 3

实验步骤：

1 将目的基因构建到合适的慢病毒载体上，利用293T细胞进行慢病毒包装，获得含目的基因的慢病毒；
2 转染前24 h进行细胞铺板，转染时细胞密度控制在80%左右；
3 天加入适量病毒悬液感染细胞，并置于37 ℃，5% CO2培养箱中孵育；
4 24 h后用新鲜培养基替换含有病毒的培养基，并继续培养；
5 在转染3-4天后开始加药筛选培养，直至显微镜下观察荧光细胞比例为100%，获得稳转细胞系。

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大鼠腺苷受体A2a(ADORA2A)elisa检测试剂盒	造血细胞磷酸酶抗体 Anti-SHP-1
细胞PAR-3蛋白表达荧光定量检测试剂盒	肌球蛋白结合蛋白C抗体
小鼠CD320分子(CD320)elisa检测试剂盒	短链脱氢还原酶12抗体
组织总RNA纯化试剂盒	ZW10
MYBPC1	着丝粒蛋白抗体
2号染色体开放阅读框71抗体	R-钙粘附分子抗体 Anti-R-cadherin/Cadherin 4
C2orf71	磷酸化细胞核受体Rev-Erbα抗体 Anti-Phospho-NR1D1(Ser55/59)
感光细胞转录因子TULP3抗体 Anti-TULP3	DHRS12
大鼠淀粉样前体蛋白(βAPP)elisa生化检测试剂盒	细胞骨架相关蛋白抗体 Anti-SM22 Alpha
βAPP ELISA Kit	核有丝分裂器NuMA蛋白抗体 Anti-NuMA
山羊白介素8(IL-8/CXCL8)elisa生化检测试剂盒	周期素D相关蛋白抗体 Anti-RUNX1T1/ETO
IL-8ELISAKit	跨膜蛋白161A抗体 Anti-TMEM161A
细胞无机磷/游离磷酸根离子比色法定量检测试剂盒	大鼠白细胞活化黏附因子(ALCAM)elisa检测试剂盒免费代测
人γ干扰素诱导蛋白16/p16(IFI16/p16)elisa检测试剂盒	人皮肤黑色素瘤细胞+LUC；SK-MEL-2+LUC小鼠细胞色素P450家族成员27B1(CYP27B1)elisa检测试剂盒
钾离子通道蛋白家族成员1抗体	真核翻译起始因子2C3抗体
KCNE1	Argonaute 3

产品名称：人皮肤黑色素瘤细胞+LUC；SK-MEL-2+LUC