HT-29人结肠癌细胞上海博湖生物科技有限公司

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产品名称：HT-29人结肠癌细胞
产品型号：P-X10099
产品**：派瑞曼
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简单介绍：

HT-29人结肠癌细胞公司正在出售的产品：NCI-H2342细胞 NCI-H1944人非小细胞肺癌细胞 NCI-H1435 人肺腺癌细胞 MOLT-4人白血病细胞小鼠杂交瘤细胞；HB Hepama-1(HP-1)

详情介绍：

HT-29人结肠癌细胞

英文简称

规格

货号

TUHR10TKB：TUHR10TKB

1×106

P-X10099

产品详情：

细胞别称；HT 29; HT29；HT-29；人结肠癌细胞

种属来源；人

年龄性别；女；44岁

组织来源；结肠

生长特性；贴壁生长

细胞形态；上皮细胞样

细胞代数；10代以内

特别注意；该细胞贴壁及展开较慢，24h后有部分细胞依然有一部分细胞未展开贴壁属于正常现象，传代后24- 48h内尽量不要移动

背景介绍；HT-29细胞系由J.Fogh在1964年用移植培养方法和含15%FBS的F12培养液从原发性肿瘤分离。近来，已建株的培养细胞用含血清McCoy’s 5A培液培养。该细胞系在裸鼠中致瘤，也能在类固醇处理的地鼠中致瘤。

STR位点；Amelogenin：X；CSF1PO：11，12；D13S317：11，12；D16S539：11，12；D18S51：13；D19S433：14；D21S11：29，30；D2S1338：19，23；D3S1358：15，16.3；D5S818：11，12；D7S820：10；D8S1179：10，16；FGA：20，22；TH01：6，9；TPOX：8，9；vWA：17，19；

染色体；64~69

倍增时间；~36-60 hours

致瘤性；Yes, in nude mice; forms well differentiated adenocarcinoma consistent with colonic primary (grade I); tumors also form in steroid treated hamsters.

受体表达情况；human adrenergic alpha2A, urokinase receptor (u-PAR), vitamin D (moderate expression), urokinase receptor (u-PAR); vitamin D (moderate expression), human adrenergic alpha2A

基因表达情况；secretory component of IgA; carcinoembryonic antigen (CEA); transforming growth factor beta binding protein; mucin, myc+; ras+; myb+; fos+; sis+; p53+; abl -; ros -; src -, Blood Type A; Rh+; HLA A1, A3, B12, B17, Cw5, HT-29 cells are negative for CD4, but there is cell surface expression of galactose ceramide (a possible alternative receptor for HIV).

细胞规格；1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装

支原体检测；无

保藏机构；ATCC; HTB-38 BCRJ; 0111 CCLV; CCLV-RIE 0960 DSMZ; ACC-299 ECACC; 91072201；中国典型培养物保藏中心细胞库

培养基；90%5A+10% FBS+PS

培养条件；气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃

冻存条件；无血清冻存液，液氮储存

干冰运输及复苏好存活细胞

（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。

（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。

细胞接收后的处理：
1）收到细胞后，75%酒精瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。
2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。
3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的完全培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
4）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议T25培养瓶1：2传代。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备DMEM培养基；胎牛血清，10%；双抗，1%。
2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
二．细胞处理：

1）冻存细胞的复苏：：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜

。天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。对于贴壁细胞传代可以参考以下方法：
1、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2、加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3、轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3）细胞冻存:收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。下面T25瓶为例：
1、细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中，可使用血球计数板计数，来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml.
2、1000rpm离心3-5min，去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞，按每1ml冻存液含1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中，标注好名称、代数、日期等信息。
3、将要冻存的细胞置于程序降温盒中，-80度冰箱中过夜，之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。

实验原理：

实验步骤：

1 将目的基因构建到合适的慢病毒载体上，利用293T细胞进行慢病毒包装，获得含目的基因的慢病毒；
2 转染前24 h进行细胞铺板，转染时细胞密度控制在80%左右；
3 天加入适量病毒悬液感染细胞，并置于37 ℃，5% CO2培养箱中孵育；
4 24 h后用新鲜培养基替换含有病毒的培养基，并继续培养；
5 在转染3-4天后开始加药筛选培养，直至显微镜下观察荧光细胞比例为100%，获得稳转细胞系。

公司正在出售的产品：

小鼠Wnt-10b蛋白(WNT10B)elisa生化检测试剂盒

土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶（S-NAG）测试盒

蛋白杂交封闭溶液

NF-kappa-B抑制子beta抗体

/酵母菌ATP生物发光法定量检测试剂盒

巨噬细胞炎性蛋白16抗体

F-12营养培养基 500ml

PKN2

IkB beta

蛋白激酶N2抗体

α1微球蛋白抗体

大鼠球蛋白A(IgA)elisa检测试剂盒免费代测

Alpha 1 microglobulin

3-OMD高效液相色谱电化学定量检测试剂盒

小鼠硬骨素(SOST)elisa检测试剂盒

CCL16/LEC

辣根过氧化物酶标记的羊抗豚鼠IgG H&L

辣椒素受体5抗体 Anti-TRPV5

Goat Anti-Guinea Pig IgG H&L / HRP

细胞色素b245轻链抗体 Anti-p22-phox/Cytochrome b245 Light Chain

泛素特异性蛋白酶50抗体

卷曲螺旋结构域蛋白139抗体 Anti-PUS10/CCDC139

USP50

磷酸化酪氨酸蛋白激酶Fyn/同步原基因抗体 Anti-phospho-SLK/FYN (Tyr530)

犬白介素4(IL-4)elisa生化检测试剂盒

小鼠肌酸激酶同工酶MM(CK-MM)elisa生化检测试剂盒

IL-4 ELISA Kit

HT-29人结肠癌细胞CK-MMELISAKit

猴子α1微球蛋白(α1-MG)elisa生化检测试剂盒

人肺炎衣原体(Cpn)抗体(IgG)elisa生化检测试剂盒

α1-MG ELISA Kit

HumanChlamydiapneumoniae(Cpn)antibody(IgG)ELISAKit

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小鼠Wnt-10b蛋白(WNT10B)elisa生化检测试剂盒	土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶（S-NAG）测试盒
蛋白杂交封闭溶液	NF-kappa-B抑制子beta抗体
/酵母菌ATP生物发光法定量检测试剂盒	巨噬细胞炎性蛋白16抗体
F-12营养培养基 500ml	PKN2
IkB beta	蛋白激酶N2抗体
α1微球蛋白抗体	大鼠球蛋白A(IgA)elisa检测试剂盒免费代测
Alpha 1 microglobulin	3-OMD高效液相色谱电化学定量检测试剂盒
小鼠硬骨素(SOST)elisa检测试剂盒	CCL16/LEC
辣根过氧化物酶标记的羊抗豚鼠IgG H&L	辣椒素受体5抗体 Anti-TRPV5
Goat Anti-Guinea Pig IgG H&L / HRP	细胞色素b245轻链抗体 Anti-p22-phox/Cytochrome b245 Light Chain
泛素特异性蛋白酶50抗体	卷曲螺旋结构域蛋白139抗体 Anti-PUS10/CCDC139
USP50	磷酸化酪氨酸蛋白激酶Fyn/同步原基因抗体 Anti-phospho-SLK/FYN (Tyr530)
犬白介素4(IL-4)elisa生化检测试剂盒	小鼠肌酸激酶同工酶MM(CK-MM)elisa生化检测试剂盒
IL-4 ELISA Kit	HT-29人结肠癌细胞CK-MMELISAKit
猴子α1微球蛋白(α1-MG)elisa生化检测试剂盒	人肺炎衣原体(Cpn)抗体(IgG)elisa生化检测试剂盒
α1-MG ELISA Kit	HumanChlamydiapneumoniae(Cpn)antibody(IgG)ELISAKit

产品名称：HT-29人结肠癌细胞