HCT-15/Taxol人结直肠癌紫杉醇耐药株上海博湖生物科技有限公司

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产品名称：HCT-15/Taxol人结直肠癌紫杉醇耐药株
产品型号：P-X739
产品**：派瑞曼
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简单介绍：

HCT-15/Taxol人结直肠癌紫杉醇耐药株公司正在出售的产品：MA-104恒河猴肾细胞贴壁细胞上皮细胞样MA-104:MA104非洲绿猴细胞系组织来源：肾脏大鼠巨噬细胞炎症蛋白1α(MIP-1α/CCL3)elisa分析检测试剂盒MIP-1α ELISA Kit

详情介绍：

细胞接收后的处理：

1）收到细胞后，75%酒精瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。
2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。
3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的完全培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。

4）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议T25培养瓶1：2传代。

HCT-15/Taxol人结直肠癌紫杉醇耐药株

英文简称

规格

货号

HCT-15/Taxol:HCT15Taxol

1×106

P-X739

产品详情：

细胞介绍

注：本培养基是不直接添加紫杉醇的。如果客户需要直接添加的我们可以按照客户的意愿添加紫杉醇。

细胞特性

1）来源：人结肠癌

2）形态：上皮细胞样，贴壁生长

3）含量：>1x106细胞数

4）规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

5）用途：仅供科研使用。

干冰运输及复苏好存活细胞

（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。

（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。

一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备DMEM培养基；胎牛血清，10%；双抗，1%。
2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
二．细胞处理：

1）冻存细胞的复苏：：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜

。天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。对于贴壁细胞传代可以参考以下方法：
1、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2、加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3、轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3）细胞冻存:收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。下面T25瓶为例：
1、细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中，可使用血球计数板计数，来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml.
2、1000rpm离心3-5min，去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞，按每1ml冻存液含1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中，标注好名称、代数、日期等信息。
3、将要冻存的细胞置于程序降温盒中，-80度冰箱中过夜，之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。

实验原理：

公司正在出售的产品：

磷酸化酶激酶γ1

MGAT4C蛋白抗体

PHKG1

瞬时受体电位离子通道蛋白/M亚家族抗体 Anti-TRPM2

卷曲螺旋结构域蛋白37抗体

DTX2

CCDC37

锌离子结合蛋白DTX2抗体

RAS癌基因相关蛋白RAB6B抗体 Anti-RAB6B

MGAT4C

磷酸化泛素连接酶NEDD4-2抗体 Anti-Phospho-NEDD4L (Ser342)

Transketolase (CT)

血管内皮细胞生长因子受体3抗体 Anti-VEGFR3

线粒体核糖体蛋白L9抗体

转酮醇酶(转羟乙醛酶)抗体(C端)

MRP-L9

Alexa Fluor 488标记小鼠IgG（型对照)

5-羟色胺受体1A抗体 Anti-5-HTR1A

Mouse IgG / AF488

肿瘤/睾丸抗原135抗体 Anti-ODF3/CT135

转录因子HES7抗体

组蛋白精氨酸甲基转移酶6抗体 Anti-PRMT6

HES7

转录因子12抗体 Anti-TCF12/HEB

大鼠胱抑素S(CST4)elisa分析检测试剂盒

兔半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)elisa分析检测试剂盒

CST4 ELISA kit

HCT-15/Taxol人结直肠癌紫杉醇耐药株Cys-CELISAKit

球蛋白κ可变区1-5抗体

19号染色体开放阅读框38/HIDE1抗体

IGKV1-5

C19orf38

实验步骤：

1 将目的基因构建到合适的慢病毒载体上，利用293T细胞进行慢病毒包装，获得含目的基因的慢病毒；
2 转染前24 h进行细胞铺板，转染时细胞密度控制在80%左右；
3 天加入适量病毒悬液感染细胞，并置于37 ℃，5% CO2培养箱中孵育；
4 24 h后用新鲜培养基替换含有病毒的培养基，并继续培养；
5 在转染3-4天后开始加药筛选培养，直至显微镜下观察荧光细胞比例为100%，获得稳转细胞系。

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内容：

联系人：

联系电话：

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联系地址：

注：1.可以使用快捷键Alt+S或Ctrl+Enter发送信息!

2.如有必要,请您留下您的详细联系方式!

磷酸化酶激酶γ1	MGAT4C蛋白抗体
PHKG1	瞬时受体电位离子通道蛋白/M亚家族抗体 Anti-TRPM2
卷曲螺旋结构域蛋白37抗体	DTX2
CCDC37	锌离子结合蛋白DTX2抗体
RAS癌基因相关蛋白RAB6B抗体 Anti-RAB6B	MGAT4C
磷酸化泛素连接酶NEDD4-2抗体 Anti-Phospho-NEDD4L (Ser342)	Transketolase (CT)
血管内皮细胞生长因子受体3抗体 Anti-VEGFR3	线粒体核糖体蛋白L9抗体
转酮醇酶(转羟乙醛酶)抗体(C端)	MRP-L9
Alexa Fluor 488标记小鼠IgG（型对照)	5-羟色胺受体1A抗体 Anti-5-HTR1A
Mouse IgG / AF488	肿瘤/睾丸抗原135抗体 Anti-ODF3/CT135
转录因子HES7抗体	组蛋白精氨酸甲基转移酶6抗体 Anti-PRMT6
HES7	转录因子12抗体 Anti-TCF12/HEB
大鼠胱抑素S(CST4)elisa分析检测试剂盒	兔半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)elisa分析检测试剂盒
CST4 ELISA kit	HCT-15/Taxol人结直肠癌紫杉醇耐药株Cys-CELISAKit
球蛋白κ可变区1-5抗体	19号染色体开放阅读框38/HIDE1抗体
IGKV1-5	C19orf38

产品名称：HCT-15/Taxol人结直肠癌紫杉醇耐药株