hepg2.2.15人肝癌细胞上海博湖生物科技有限公司

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产品名称：hepg2.2.15人肝癌细胞
产品型号：P-X751
产品**：派瑞曼
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简单介绍：

hepg2.2.15人肝癌细胞公司正在出售的产品：MDBK牛肾细胞贴壁生长上皮细胞样MDBK:MDBK牛细胞系组织来源：肾；正常细胞大鼠抗核膜糖蛋白210抗体(gp210)elisa分析检测试剂盒Rat Anti-glucoprotein 210(gp210) antibody ELISA Kit

详情介绍：

hepg2.2.15人肝癌细胞

英文简称

规格

货号

hepg2.2.15:hepg2215

1×106

P-X751

产品详情：

细胞介绍

乙型肝炎病毒（HBV）是一种引起急性和慢性坏死炎症性肝病及肝细胞癌的DNA病毒。HBV具有特异嗜肝性、非细胞损伤与裂解、易发展为慢性等特征。HepG2．2．15细胞是能够表达HBV抗原和分泌完整HBV颗粒的肝胚瘤细胞系，也是目前用来研究HBV复制．肝细胞对干扰素（IFN）应答为合适的细胞。

细胞特性

1）来源：肝

2）形态：上皮细胞样，贴壁生长

3）含量：>1x106细胞数

4）规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

5）用途：仅供科研使用。

干冰运输及复苏好存活细胞

（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。

（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。

细胞接收后的处理：
1）收到细胞后，75%酒精瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。
2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。
3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的完全培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
4）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议T25培养瓶1：2传代。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备DMEM培养基；胎牛血清，10%；双抗，1%。
2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
二．细胞处理：

1）冻存细胞的复苏：：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜

。天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。对于贴壁细胞传代可以参考以下方法：
1、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2、加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3、轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3）细胞冻存:收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。下面T25瓶为例：
1、细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中，可使用血球计数板计数，来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml.
2、1000rpm离心3-5min，去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞，按每1ml冻存液含1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中，标注好名称、代数、日期等信息。
3、将要冻存的细胞置于程序降温盒中，-80度冰箱中过夜，之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。

实验原理：

实验步骤：

1 将目的基因构建到合适的慢病毒载体上，利用293T细胞进行慢病毒包装，获得含目的基因的慢病毒；
2 转染前24 h进行细胞铺板，转染时细胞密度控制在80%左右；
3 天加入适量病毒悬液感染细胞，并置于37 ℃，5% CO2培养箱中孵育；
4 24 h后用新鲜培养基替换含有病毒的培养基，并继续培养；
5 在转染3-4天后开始加药筛选培养，直至显微镜下观察荧光细胞比例为100%，获得稳转细胞系。

公司正在出售的产品：

AF488标记人CD107a单克隆抗体 human CD107b/AF488

MGEA5抗体

AF680突触核膜蛋白3抗体 Nesprin 3, Alexa Flour 680 conjugated

转录因子相互作用蛋白1抗体 Anti-TTI1

胶质母细胞瘤相关蛋白GBAS抗体 GBAS

C1orf183

精神发育迟滞相关蛋白Rab GDI α抗体 GDI1

1号染色体开放阅读框183抗体

c-Myc应答蛋白抗体 Anti-RCL/c Myc responsive

MGEA5

磷酸化谷氨酸受体1抗体 Anti-Phospho-NMDAR1(Ser897)

Transportin 1

血管内皮生长因子受体2抗体 Anti-VEGFR2/FLK1

睾丸癌中心体相关蛋白抗体

转运蛋白1抗体

DCAF12

Alexa Fluor 555标记兔IgG（型对照)

尿素转运型糖蛋白抗体 Anti-SLC14A1/RACH1

Rabbit IgG / AF555

固生蛋白3抗体 Anti-ODZ3/Teneurin 3

Beta氨基己糖苷酶beta亚基蛋白A链抗体

丝氨酸蛋白酶8抗体 Anti-PRSS8

HEXB chain A

转化生长因子β4抗体TGF β4 Anti-Lefty/TGF beta 4

大鼠胱抑素D(CST5)elisa分析检测试剂盒

兔白介素7(IL7)elisa分析检测试剂盒

CST5 ELISA kit

hepg2.2.15人肝癌细胞IL7ELISAkit

抑制素结合蛋白抗体

γ-氨基丁酸醛脱氢酶抗体

IGSF1

ALDH9A1

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AF488标记人CD107a单克隆抗体 human CD107b/AF488	MGEA5抗体
AF680突触核膜蛋白3抗体 Nesprin 3, Alexa Flour 680 conjugated	转录因子相互作用蛋白1抗体 Anti-TTI1
胶质母细胞瘤相关蛋白GBAS抗体 GBAS	C1orf183
精神发育迟滞相关蛋白Rab GDI α抗体 GDI1	1号染色体开放阅读框183抗体
c-Myc应答蛋白抗体 Anti-RCL/c Myc responsive	MGEA5
磷酸化谷氨酸受体1抗体 Anti-Phospho-NMDAR1(Ser897)	Transportin 1
血管内皮生长因子受体2抗体 Anti-VEGFR2/FLK1	睾丸癌中心体相关蛋白抗体
转运蛋白1抗体	DCAF12
Alexa Fluor 555标记兔IgG（型对照)	尿素转运型糖蛋白抗体 Anti-SLC14A1/RACH1
Rabbit IgG / AF555	固生蛋白3抗体 Anti-ODZ3/Teneurin 3
Beta氨基己糖苷酶beta亚基蛋白A链抗体	丝氨酸蛋白酶8抗体 Anti-PRSS8
HEXB chain A	转化生长因子β4抗体TGF β4 Anti-Lefty/TGF beta 4
大鼠胱抑素D(CST5)elisa分析检测试剂盒	兔白介素7(IL7)elisa分析检测试剂盒
CST5 ELISA kit	hepg2.2.15人肝癌细胞IL7ELISAkit
抑制素结合蛋白抗体	γ-氨基丁酸醛脱氢酶抗体
IGSF1	ALDH9A1

产品名称：hepg2.2.15人肝癌细胞