A549+luc 人肺癌细胞荧光素酶标记上海博湖生物科技有限公司

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产品名称：A549+luc 人肺癌细胞荧光素酶标记
产品型号：P-X649
产品**：派瑞曼
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简单介绍：

A549+luc 人肺癌细胞荧光素酶标记公司正在出售的产品：UMR-106大鼠骨肉瘤细胞贴壁细胞上皮细胞样UMR-106:UMR106大鼠细胞系组织来源：器官：骨骼；品系：Sprague-Dawley；：骨肉瘤小鼠结蛋白(Des)elisa分析检测试剂盒大鼠促性腺释放受体抗体(GNRHR-Ab)elisa检测试剂盒

详情介绍：

细胞接收后的处理：

1）收到细胞后，75%酒精瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。
2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。
3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的完全培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。

4）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议T25培养瓶1：2传代。

A549+luc 人肺癌细胞荧光素酶标记

英文简称

规格

货号

A549+luc:A549luc

1×106

P-X649

产品详情：

细胞介绍

该细胞系由D.J.Griad通过肺癌组织移植培养建系，患者为58岁白人男性。A549能通过胞苷二磷酸胆碱途径合成含有高含量不饱和脂肪酸的卵磷脂。

该细胞通过慢病毒转染的方式携带Luc基因。

细胞特性

1）来源：肺癌

2）形态：上皮细胞样，多角形；贴壁生长

3）含量：>1×10⁶ 细胞数

4）规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

5）用途：仅供科研使用

细胞诱导构建实验步骤：

1. 转染（1）将A549细胞接种6孔板，每孔细胞数约为1×10⁵ 个，

（2）细胞融合度为50%左右时用于病毒转染，

（3）加入1mL培养基，再加20 μL Luciferase过表达慢病毒，

（4）混匀后继续培养，

（5）12h后观察细胞状态，并更换为新鲜培养基，

（6）当细胞长满板底后，传代至T25培养瓶中。

2. 筛选：用嘌呤霉素4ug/mL抗性筛选6周，稳转细胞记作A549+Luc。

3. 体外荧光素酶活性检测

干冰运输及复苏好存活细胞

（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。

（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。

一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备DMEM培养基；胎牛血清，10%；双抗，1%。
2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
二．细胞处理：

1）冻存细胞的复苏：：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜

。天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。对于贴壁细胞传代可以参考以下方法：
1、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2、加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3、轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3）细胞冻存:收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。下面T25瓶为例：
1、细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中，可使用血球计数板计数，来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml.
2、1000rpm离心3-5min，去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞，按每1ml冻存液含1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中，标注好名称、代数、日期等信息。
3、将要冻存的细胞置于程序降温盒中，-80度冰箱中过夜，之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。

实验原理：

公司正在出售的产品：

HEAT重复内含蛋白5A蛋白抗体 HEATR5A

纤维母细胞生长因子4抗体 FGF4

IQSEC2抗体 IQSEC2

BRD3蛋白抗体 BRD3

配体依赖核受体共抑制因子样蛋白抗体 LCORL

白介素17受体抗体 IL17RA

桥粒糖蛋白1/2抗体 Desmocollin 1 + 2

γ干扰素诱导蛋白202抗体 IFI202

CD39重组兔单克隆抗体 CD39/ENTPD1

线粒体苹果酸脱氢酶2抗体 MDH2

离子型谷氨酸受体4抗体 GLUR4

轴突蛋白3 beta抗体 Neurexin-3-beta

磷酸化CREB转录共激 Phospho-CRTC1 (Ser151)

睾丸特异丝氨酸/苏氨酸激酶6抗体 TSSK6

肿瘤坏死因子受体相互作用蛋白抗体 TRIP

骨形态发生蛋白4抗体 BMP4

冰冻切片组织DAP KINASE蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒

L型氨基酸转运蛋白2抗体 LAT2

大鼠整合素αM型((ITG αM/CD11b)elisa检测试剂盒

MS4A4E蛋白抗体 MS4A4E

粪便副伤A（Salmonella Paratyphi A）定性基因检测试剂盒

人瘤病毒18型E4抗体 HPV18 E4

小鼠γ分泌酶elisa分析检测试剂盒

软骨相关蛋白CRTAP抗体 CRTAP

人EB病毒衣壳抗原(EBVCA)抗体(IgM)elisa检测试剂盒

小鼠醛固酮(ALD)elisa分析检测试剂盒

细胞CASEIN KINASE 1激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）

A549+luc 人肺癌细胞荧光素酶标记大鼠含球蛋白样环和上皮生长因子样域酪氨酸激酶2(Tie-2)elisa分析检测试剂盒

酰基转移酶（AAT）测试盒

昆虫膜蛋白提取试剂盒50T

小鼠过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)elisa检测试剂盒免费代测

冰冻切片结缔组织（CONNECTIVE TISSUE）格莫瑞（Gomori）染色试剂盒

实验步骤：

1 将目的基因构建到合适的慢病毒载体上，利用293T细胞进行慢病毒包装，获得含目的基因的慢病毒；
2 转染前24 h进行细胞铺板，转染时细胞密度控制在80%左右；
3 天加入适量病毒悬液感染细胞，并置于37 ℃，5% CO2培养箱中孵育；
4 24 h后用新鲜培养基替换含有病毒的培养基，并继续培养；
5 在转染3-4天后开始加药筛选培养，直至显微镜下观察荧光细胞比例为100%，获得稳转细胞系。

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联系人：

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联系地址：

注：1.可以使用快捷键Alt+S或Ctrl+Enter发送信息!

2.如有必要,请您留下您的详细联系方式!

HEAT重复内含蛋白5A蛋白抗体 HEATR5A	纤维母细胞生长因子4抗体 FGF4
IQSEC2抗体 IQSEC2	BRD3蛋白抗体 BRD3
配体依赖核受体共抑制因子样蛋白抗体 LCORL	白介素17受体抗体 IL17RA
桥粒糖蛋白1/2抗体 Desmocollin 1 + 2	γ干扰素诱导蛋白202抗体 IFI202
CD39重组兔单克隆抗体 CD39/ENTPD1	线粒体苹果酸脱氢酶2抗体 MDH2
离子型谷氨酸受体4抗体 GLUR4	轴突蛋白3 beta抗体 Neurexin-3-beta
磷酸化CREB转录共激 Phospho-CRTC1 (Ser151)	睾丸特异丝氨酸/苏氨酸激酶6抗体 TSSK6
肿瘤坏死因子受体相互作用蛋白抗体 TRIP	骨形态发生蛋白4抗体 BMP4
冰冻切片组织DAP KINASE蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒	L型氨基酸转运蛋白2抗体 LAT2
大鼠整合素αM型((ITG αM/CD11b)elisa检测试剂盒	MS4A4E蛋白抗体 MS4A4E
粪便副伤A（Salmonella Paratyphi A）定性基因检测试剂盒	人瘤病毒18型E4抗体 HPV18 E4
小鼠γ分泌酶elisa分析检测试剂盒	软骨相关蛋白CRTAP抗体 CRTAP
人EB病毒衣壳抗原(EBVCA)抗体(IgM)elisa检测试剂盒	小鼠醛固酮(ALD)elisa分析检测试剂盒
细胞CASEIN KINASE 1激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）	A549+luc 人肺癌细胞荧光素酶标记大鼠含球蛋白样环和上皮生长因子样域酪氨酸激酶2(Tie-2)elisa分析检测试剂盒
酰基转移酶（AAT）测试盒	昆虫膜蛋白提取试剂盒50T
小鼠过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)elisa检测试剂盒免费代测	冰冻切片结缔组织（CONNECTIVE TISSUE）格莫瑞（Gomori）染色试剂盒

产品名称：A549+luc 人肺癌细胞荧光素酶标记