HPAF-II 人胰腺癌细胞上海博湖生物科技有限公司

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产品名称：HPAF-II 人胰腺癌细胞
产品型号：P-X769
产品**：派瑞曼
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简单介绍：

HPAF-II 人胰腺癌细胞公司正在出售的产品：HFL1人肺成纤维细胞贴壁细胞成纤维细胞样HFL1:HFL1人细胞系组织来源：肺人骨髓抑制因子1(MPIF-1/CCL23)elisa分析检测试剂盒细胞CDK5/P25激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）

详情介绍：

HPAF-II 人胰腺癌细胞

英文简称

规格

货号

HPAF-II :HPAFII

1×106

P-X769

产品详情：

细胞别称：HPAF II; HPAFII; HPAF-2; HPAF2; HPAF/CD18; CD18/HPAF; HPAF-II/CD18; CD-18; CD18; CD 18

种属来源：人

年龄性别：男；44岁

组织来源：胰腺

生长特性：贴壁生长

细胞形态：上皮细胞样

背景简介：HPAF-II是一种人胰腺腺癌细胞系，来源于一名44岁高加索男性的腹膜腹水，该男性患有原发性胰腺腺癌，并转移至肝脏，横膈膜和结。

生物等级：1

细胞规格：1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装

支原体检测：无

基因表达情况：

保藏机构：ATCC; CRL-1997

培养基：MEM（ATCC改良）＋10% FBS＋1% P/S

培养条件：气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃

冻存条件：无血清冻存液，液氮储存

倍增时间：26 hours (PubMed=2734279); 70 hours (PubMed=25984343)

STR鉴定位点Amelogenin：X；CSF1PO：10,11；D2S1338：16,19；D3S1358：14,18；D5S818：11,13；D7S820：10,13；D8S1179：11,12；D13S317：12；D16S539：11,13；D18S51：13；D19S433：12；D21S11：30,31；FGA：21,24；PentaD：9,13；PentaE：10,13；TH01：9；TPOX：8；vWA：17；D6S1043：12；D12S391：17；D2S441：11,14；

干冰运输及复苏好存活细胞

（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。

（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。

细胞接收后的处理：
1）收到细胞后，75%酒精瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。
2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。
3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的完全培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
4）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议T25培养瓶1：2传代。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备DMEM培养基；胎牛血清，10%；双抗，1%。
2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
二．细胞处理：

1）冻存细胞的复苏：：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜

。天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。对于贴壁细胞传代可以参考以下方法：
1、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2、加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3、轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3）细胞冻存:收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。下面T25瓶为例：
1、细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中，可使用血球计数板计数，来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml.
2、1000rpm离心3-5min，去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞，按每1ml冻存液含1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中，标注好名称、代数、日期等信息。
3、将要冻存的细胞置于程序降温盒中，-80度冰箱中过夜，之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。

实验原理：

实验步骤：

1 将目的基因构建到合适的慢病毒载体上，利用293T细胞进行慢病毒包装，获得含目的基因的慢病毒；
2 转染前24 h进行细胞铺板，转染时细胞密度控制在80%左右；
3 天加入适量病毒悬液感染细胞，并置于37 ℃，5% CO2培养箱中孵育；
4 24 h后用新鲜培养基替换含有病毒的培养基，并继续培养；
5 在转染3-4天后开始加药筛选培养，直至显微镜下观察荧光细胞比例为100%，获得稳转细胞系。

公司正在出售的产品：

狗氨基乙酰丙酸,delta-脱水酶(ALAD)elisa分析检测试剂盒

磷酸二酯酶6β抗体

ALAD ELISA kit

磷酸化血管**素受体2抗体 Anti-Phospho-Tie2 (Ser1119)

人单核细胞趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)elisa分析检测试剂盒

HOXA5

HumanMCP-4ELISAkit

源异型盒基因HOXA5蛋白抗体

磷酸核糖胺咪唑羧化酶抗体 Anti-PAICS

PDE6B

PDZ结构域PDZK6蛋白抗体 Anti-PDZD6

Rabbit Anti-Mouse IgG H&L / RBITC

肌浆/内质网钙ATP酶2抗体 Anti-Serca2/SERCA2 ATPase

磷酸化紧密连接蛋白6抗体

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大鼠5'-核苷酸酶,胞膜(NT5E/CD73)elisa分析检测试剂盒

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人干扰素活化基因205(Ifi205)elisa分析检测试剂盒

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Ifi205ELISAKit

分选连接蛋白9抗体 Anti-SNX9/SH3PX1

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小鼠N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)elisa检测试剂盒

冰冻切片组织TNF BETA蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒

HPAF-II 人胰腺癌细胞D-二聚体D-Dimer试剂盒 R1：18ml×1 R2：6ml×1 胶乳增强

麻疹(MeV)核蛋白抗体

源转录因子DLX3抗体

Measles nucleoprotein

DLX3

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狗氨基乙酰丙酸,delta-脱水酶(ALAD)elisa分析检测试剂盒	磷酸二酯酶6β抗体
ALAD ELISA kit	磷酸化血管**素受体2抗体 Anti-Phospho-Tie2 (Ser1119)
人单核细胞趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)elisa分析检测试剂盒	HOXA5
HumanMCP-4ELISAkit	源异型盒基因HOXA5蛋白抗体
磷酸核糖胺咪唑羧化酶抗体 Anti-PAICS	PDE6B
PDZ结构域PDZK6蛋白抗体 Anti-PDZD6	Rabbit Anti-Mouse IgG H&L / RBITC
肌浆/内质网钙ATP酶2抗体 Anti-Serca2/SERCA2 ATPase	磷酸化紧密连接蛋白6抗体
罗丹明标记的兔抗小鼠IgG H&L	phospho-Claudin 6 (Tyr219)
大鼠5'-核苷酸酶,胞膜(NT5E/CD73)elisa分析检测试剂盒	调节蛋白1抗体 Anti-ZHX2
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Ifi205ELISAKit	分选连接蛋白9抗体 Anti-SNX9/SH3PX1
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冰冻切片组织TNF BETA蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒	HPAF-II 人胰腺癌细胞D-二聚体D-Dimer试剂盒 R1：18ml×1 R2：6ml×1 胶乳增强
麻疹(MeV)核蛋白抗体	源转录因子DLX3抗体
Measles nucleoprotein	DLX3

产品名称：HPAF-II 人胰腺癌细胞