CAKI-2人肾透明细胞癌上海博湖生物科技有限公司

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产品名称：CAKI-2人肾透明细胞癌
产品型号：P-X683
产品**：派瑞曼
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简单介绍：

CAKI-2人肾透明细胞癌公司正在出售的产品：Caco-2人结肠腺癌细胞贴壁生长上皮细胞样Caco-2:Caco2人细胞系组织来源：结肠大鼠骨成型蛋白受体1A(BMPR-1A)elisa分析检测试剂盒小鼠凝血因子Ⅹ(FⅩ)elisa检测试剂盒

详情介绍：

细胞接收后的处理：

1）收到细胞后，75%酒精瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。
2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。
3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的完全培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。

4）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议T25培养瓶1：2传代。

CAKI-2人肾透明细胞癌

英文简称

规格

货号

CAKI-2:CAKI2

1×106

P-X683

产品详情：

细胞别称：CAKI-2; CaKi-2; caki-2; CAKI 2; Caki 2; Caki2; CAKI2

种属来源：人

年龄性别：男；69岁

组织来源：肾透明细胞癌

生长特性：贴壁生长

细胞形态：上皮细胞样

背景简介：Caki-2细胞源自一位69岁白人男性的初期肾腺癌组织。

生物等级：1

细胞规格：1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装

支原体检测：无

基因表达情况：

保藏机构：ATCC; HTB-47 DSMZ; ACC-54 ECACC; 93120819

培养基：McCoy’s 5A+10% FBS+PS

培养条件：气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃

冻存条件：无血清冻存液，液氮储存

倍增时间：

STR鉴定位点Amelogenin：X，Y；CSF1PO：10，12；D13S317：10；D16S539：9，13；D18S51：17；D19S433：13，14；D21S11：27，31；D2S1338：17，20；D3S1358：14；D5S818：11；D7S820：12；D8S1179：10；FGA：22；TH01：6；TPOX：9，11；vWA：16，17；

干冰运输及复苏好存活细胞

（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。

（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。

一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备DMEM培养基；胎牛血清，10%；双抗，1%。
2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
二．细胞处理：

1）冻存细胞的复苏：：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜

。天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。对于贴壁细胞传代可以参考以下方法：
1、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2、加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3、轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3）细胞冻存:收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。下面T25瓶为例：
1、细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中，可使用血球计数板计数，来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml.
2、1000rpm离心3-5min，去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞，按每1ml冻存液含1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中，标注好名称、代数、日期等信息。
3、将要冻存的细胞置于程序降温盒中，-80度冰箱中过夜，之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。

实验原理：

公司正在出售的产品：

E3泛素连接酶NEDD4结合蛋白2抗体

核转录因子κB抑制作用Ras样2蛋白抗体

N4BP2

辣椒素受体3抗体 Anti-TRPV3

3号染色体开放阅读框49抗体

C8orf45

C3orf49

8号染色体开放阅读框45抗体

磷酸化突触后密度蛋白93抗体 Anti-Phospho-PSD93 (Tyr340)

NKIRAS2

B细胞白血病前体蛋白转录因子3抗体 Anti-PBX3

phospho-PRKCQ (Ser676)

滑膜肉瘤X染色体相关2抗体 Anti-SSX2/CT5.2

二肽氨基肽酶3抗体

磷酸化蛋白激酶C theta抗体

DPP3

大鼠癌胚抗原(CEA)elisa分析检测试剂盒

磷酸化赖氨酸缺陷型蛋白激酶1抗体 Anti-Phospho-WNK1(Thr60)

CEA ELISA Kit

神经营养因子HNT抗体 Anti-Neurotrimin/HNT

人踝蛋白(talin)elisa分析检测试剂盒

环指蛋白75抗体 Anti-ROC1/RNF75

HumantalinELISAKit

神经肌肉接头蛋白SNTA1抗体 Anti-Syntrophin/SNTA1/Syntrophin Alpha1

小鼠基质细胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)elisa检测试剂盒

载玻片细胞IGF 蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒

快速SDS-PAGE凝胶配制试剂盒 30-50T

CAKI-2人肾透明细胞癌绵羊白介素2(IL-2)elisa分析检测试剂盒

附睾特异蛋白9抗体

β细胞素抗体

LCN9

Beta cellulin

实验步骤：

1 将目的基因构建到合适的慢病毒载体上，利用293T细胞进行慢病毒包装，获得含目的基因的慢病毒；
2 转染前24 h进行细胞铺板，转染时细胞密度控制在80%左右；
3 天加入适量病毒悬液感染细胞，并置于37 ℃，5% CO2培养箱中孵育；
4 24 h后用新鲜培养基替换含有病毒的培养基，并继续培养；
5 在转染3-4天后开始加药筛选培养，直至显微镜下观察荧光细胞比例为100%，获得稳转细胞系。

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E3泛素连接酶NEDD4结合蛋白2抗体	核转录因子κB抑制作用Ras样2蛋白抗体
N4BP2	辣椒素受体3抗体 Anti-TRPV3
3号染色体开放阅读框49抗体	C8orf45
C3orf49	8号染色体开放阅读框45抗体
磷酸化突触后密度蛋白93抗体 Anti-Phospho-PSD93 (Tyr340)	NKIRAS2
B细胞白血病前体蛋白转录因子3抗体 Anti-PBX3	phospho-PRKCQ (Ser676)
滑膜肉瘤X染色体相关2抗体 Anti-SSX2/CT5.2	二肽氨基肽酶3抗体
磷酸化蛋白激酶C theta抗体	DPP3
大鼠癌胚抗原(CEA)elisa分析检测试剂盒	磷酸化赖氨酸缺陷型蛋白激酶1抗体 Anti-Phospho-WNK1(Thr60)
CEA ELISA Kit	神经营养因子HNT抗体 Anti-Neurotrimin/HNT
人踝蛋白(talin)elisa分析检测试剂盒	环指蛋白75抗体 Anti-ROC1/RNF75
HumantalinELISAKit	神经肌肉接头蛋白SNTA1抗体 Anti-Syntrophin/SNTA1/Syntrophin Alpha1
小鼠基质细胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)elisa检测试剂盒	载玻片细胞IGF 蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒
快速SDS-PAGE凝胶配制试剂盒 30-50T	CAKI-2人肾透明细胞癌绵羊白介素2(IL-2)elisa分析检测试剂盒
附睾特异蛋白9抗体	β细胞素抗体
LCN9	Beta cellulin

产品名称：CAKI-2人肾透明细胞癌