C-33A人宫颈癌细胞上海博湖生物科技有限公司

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产品名称：C-33A人宫颈癌细胞
产品型号：P-X673
产品厂商：派瑞曼
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简单介绍：

C-33A人宫颈癌细胞公司正在出售的产品：BT-549人乳腺导管癌细胞贴壁生长上皮细胞样BT-549:BT549人细胞系组织来源：乳腺；乳腺导管癌猪内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)elisa检测试剂盒大鼠血栓前体蛋白(TpP)elisa检测试剂盒

详情介绍：

细胞接收后的处理：

1）收到细胞后，75%酒精瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。
2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。
3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的完全培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。

4）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议T25培养瓶1：2传代。

C-33A人宫颈癌细胞

英文简称

规格

货号

C-33A:C33A

1×106

P-X673

产品详情：

细胞别称：C33A; C33a; C33-A; C-33-A; C-33A; C33；人颈癌细胞

种属来源：人

年龄性别：女；66岁

组织来源：

生长特性：贴壁生长

细胞形态：上皮细胞样

背景简介：C-33A细胞是由N·Auersperg从宫颈癌切片中建立的一系列细胞株中的一株。C-33 A细胞一开始就表现出亚二倍体核型及上皮细胞形态：，C-33 A细胞经连续传代可以观察到核型不稳定。C-33A细胞存在成视网膜细胞瘤蛋白(pRB)，但大小不正常；C-33 A细胞p53表达上调，且有一个273位密码子的点突变导致Arg→Cys的替换。

生物等级：1

细胞规格：1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装

支原体检测：无

基因表达情况：

培养基：90%DMEM+10% FBS+PS

培养条件：气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃

冻存条件：无血清冻存液，液氮储存

倍增时间：~32-48 hours

干冰运输及复苏好存活细胞

（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。

（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。

一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备DMEM培养基；胎牛血清，10%；双抗，1%。
2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
二．细胞处理：

1）冻存细胞的复苏：：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜

。天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。对于贴壁细胞传代可以参考以下方法：
1、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2、加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3、轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3）细胞冻存:收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。下面T25瓶为例：
1、细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中，可使用血球计数板计数，来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml.
2、1000rpm离心3-5min，去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞，按每1ml冻存液含1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中，标注好名称、代数、日期等信息。
3、将要冻存的细胞置于程序降温盒中，-80度冰箱中过夜，之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。

实验原理：

公司正在出售的产品：

20号染色体开放阅读框7抗体

仓鼠甲状腺结合球蛋白(TBG)elisa分析检测试剂盒

NDUFAF5

细胞荧光显微镜间接检测试剂盒（含荧光二抗）

6号染色体开放阅读框182抗体

HDVIgMELISAKit

C6ORF182

人丁型肝炎IgM(HDV IgM)elisa分析检测试剂盒

鹿尿酸氧化酶elisa检测试剂盒

TBG ELISA Kit

BCA 蛋白定量试剂盒1000T

MS4A2

小鼠核因子κB抑制因子α(IκBα)elisa检测试剂盒

20号染色体开放阅读框24抗体

跨膜结构域4亚家族成员2抗体

C20orf24

PE-CY5标记的兔抗豚鼠IgM

脂滴相关蛋白TIP47抗体 Anti-TIP47/M6PRBP1

Rabbit Anti-Guinea Pig IgM / PE-Cy5

G蛋白P21 RAC2抗体 Anti-RAC2

磷酸化泌乳素抗体

中性粒细胞弹性蛋白酶ELANE抗体 Anti-Neutrophil Elastase/ELANE

phospho-PRL (Ser163)

基质细胞衍生因子4抗体（钙结合蛋白） Anti-SDF4

人β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)elisa分析检测试剂盒

猪白介素2(IL-2)elisa分析检测试剂盒

Aβ1-42ELISAKit96T

C-33A人宫颈癌细胞IL-2ELISAKit

大鼠钙腔蛋白(CALU)elisa分析检测试剂盒

豚鼠白三烯D4(LTD4)elisa分析检测试剂盒

CALU ELISA kit

LT-D4ELISAKit

实验步骤：

1 将目的基因构建到合适的慢病毒载体上，利用293T细胞进行慢病毒包装，获得含目的基因的慢病毒；
2 转染前24 h进行细胞铺板，转染时细胞密度控制在80%左右；
3 天加入适量病毒悬液感染细胞，并置于37 ℃，5% CO2培养箱中孵育；
4 24 h后用新鲜培养基替换含有病毒的培养基，并继续培养；
5 在转染3-4天后开始加药筛选培养，直至显微镜下观察荧光细胞比例为100%，获得稳转细胞系。

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20号染色体开放阅读框7抗体	仓鼠甲状腺结合球蛋白(TBG)elisa分析检测试剂盒
NDUFAF5	细胞荧光显微镜间接检测试剂盒（含荧光二抗）
6号染色体开放阅读框182抗体	HDVIgMELISAKit
C6ORF182	人丁型肝炎IgM(HDV IgM)elisa分析检测试剂盒
鹿尿酸氧化酶elisa检测试剂盒	TBG ELISA Kit
BCA 蛋白定量试剂盒1000T	MS4A2
小鼠核因子κB抑制因子α(IκBα)elisa检测试剂盒	20号染色体开放阅读框24抗体
跨膜结构域4亚家族成员2抗体	C20orf24
PE-CY5标记的兔抗豚鼠IgM	脂滴相关蛋白TIP47抗体 Anti-TIP47/M6PRBP1
Rabbit Anti-Guinea Pig IgM / PE-Cy5	G蛋白P21 RAC2抗体 Anti-RAC2
磷酸化泌乳素抗体	中性粒细胞弹性蛋白酶ELANE抗体 Anti-Neutrophil Elastase/ELANE
phospho-PRL (Ser163)	基质细胞衍生因子4抗体（钙结合蛋白） Anti-SDF4
人β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)elisa分析检测试剂盒	猪白介素2(IL-2)elisa分析检测试剂盒
Aβ1-42ELISAKit96T	C-33A人宫颈癌细胞IL-2ELISAKit
大鼠钙腔蛋白(CALU)elisa分析检测试剂盒	豚鼠白三烯D4(LTD4)elisa分析检测试剂盒
CALU ELISA kit	LT-D4ELISAKit

产品名称：C-33A人宫颈癌细胞