产品简介：
| 产品名称 |
规格 |
检测方法 |
适用样本 |
保存温度 |
货号 |
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高尔基体蛋白提取试剂盒 |
50T/100T |
pull-down、co-IP等 |
动物细胞 |
2-8℃ |
BH-D85210 |
1.离心机
2.振荡器3.匀浆机/匀浆器
4.涡旋混匀器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
试剂准备：
1.PBS 缓冲液
2.蛋白定量试剂盒耗材准备：
1.离心管
2.吸头3.一次性手套
使用方法：
旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
蛋白酶抑制剂在 2-8℃时是固体状态，从冰箱取出后恢复至室温或 37℃短时间水浴，变成液体状态后离心
至管底部再开盖。
实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
注意事项：
1. 正式实验前请选取几个样本做预实验，以优化实验条件，取得佳实验效果。
2. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，
避免开盖时试剂损失。
3. 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
4. 样品或试剂被污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
5. 好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗
并彻底残留清洁剂。
6. 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。
phospho-Androgen Receptor (Ser94) 磷酸化雄激受体抗体 变形杆菌
phospho-Androgen Receptor (Tyr363) 磷酸化雄体抗体 植物乳杆菌
ANKK1 锚定蛋白重复结构域蛋白激酶ANKK1抗体 干酷乳杆菌
phospho-alpha Adducin (Thr445) 磷酸化内收蛋白抗体 保加利亚乳杆菌
Annexin A11 膜粘连蛋白11抗体 潮湿纤维单胞菌
Annexin A13 膜粘连蛋白13抗体 产黄纤维单胞菌
phospho-ACTH (Ser168) 磷酸化促肾上腺皮质抗体 黄色短杆菌
phospho-AKT1 (Ser246) 磷酸化蛋白激酶AKT1抗体 球型芽孢杆菌
phospho-AKT1/3 (Tyr473) 磷酸化蛋白激酶B抗体 大肠埃希氏菌
phospho-alpha 1 Sodium Potassium ATPase (Tyr260) 磷酸化钠钾ATP酶蛋白a1抗体 金黄色葡萄球菌金黄色亚种
phospho-alpha Adducin(Ser436) 磷酸化内收蛋白a1抗体 粪产碱菌
phospho-AMPK alpha 1 (Ser487) 磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α1抗体 微黄八叠球菌
CNE-2Z(人鼻咽癌细胞) 5×106cells/瓶×2
COLO 201(人结直肠腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2
CW-2(人结肠癌细胞) 5×106cells/瓶×2
CRT(人神经胶质瘤细胞) 5×106cells/瓶×2
D283 Med(人脑髓母细胞瘤细胞) 5×106cells/瓶×2
EA.hy926(人脐静脉细胞融合细胞) 5×106cells/瓶×2
ECV-304(人脐静脉内皮细胞) 5×106cells/瓶×2
EJ(人膀胱癌细胞) 5×106cells/瓶×2
H-97(人高转移肝癌细胞) 5×106cells/瓶×2
HCC94(细胞（高分化）) 5×106cells/瓶×2
HCCLM3(人高转移肝癌细胞) 5×106cells/瓶×2
HEL(人红白细胞白血病细胞) 5×106cells/瓶×2
HELF(人胚肺成纤维细胞) 5×106cells/瓶×2
HO-8910PM(人高转移卵巢癌细胞) 5×106cells/瓶×2
Ishikawa(内膜癌细胞) 5×106cells/瓶×2
L-O2(人正常肝细胞) 5×106cells/瓶×2
高尔基体蛋白提取试剂盒M1(小鼠白血病细胞) 5×106cells/瓶×2
M14(人黑色素瘤细胞) 5×106cells/瓶×2
MA-891(小鼠乳腺癌高转移细胞) 5×106cells/瓶×2
操作步骤：
A：组织中提取
1.收集 0.1g 组织，加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及适量蛋白酶抑制剂（依据实验选择），冰上用组织研磨器或匀 浆管研磨。
2.将匀浆后样品转移至 1.5ml 离心管中，11000rpm 5min，吸弃上清保留沉淀。
3.至步骤 2。
B：细胞中提取
1.收集约 10 8个细胞，3000rpm 5min（悬浮细胞直接离心，贴壁细胞使用细胞刮刀或胰蛋白酶消化离心收集 均可。注意用预冷 PBS 清洗残留培养基和胰蛋白酶等），吸弃上清。
2.至步骤 1。
步骤 1：加 1.0ml Lysis Buffer 1 及适量蛋白酶抑制剂（依据实验选择），冰上孵育 30min（每 10min 用移液枪 吹打一次），4°C 11000rpm 离心 5min，弃上清。
步骤 2：于上述步骤离心管中加入 200μl Lysis Buffer 2，置于冰上 30min（每 10min 涡旋一次），4°C 11000rpm 离心 5min，吸取上清于一新离心管中。
步骤 3：加入 40μl Balance Buffer 于上述步骤离心管中，用移液枪轻轻吹匀。
步骤 4：使用 BCA 定量试剂盒定量。
步骤 5：于步骤 3 离心管中加入 2.4μl Adjust Buffer，轻轻吹匀，并应用于下游研究。
