操作步骤:
A:组织中提取
1.收集 0.1g 组织,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及适量蛋白酶抑制剂(依据实验选择),冰上用组织研磨器或匀 浆管研磨。
2.将匀浆后样品转移至 1.5ml 离心管中,11000rpm 5min,吸弃上清保留沉淀。
3.至步骤 2。
B:细胞中提取
1.收集约 10 8个细胞,3000rpm 5min(悬浮细胞直接离心,贴壁细胞使用细胞刮刀或胰蛋白酶消化离心收集 均可。注意用预冷 PBS 清洗残留培养基和胰蛋白酶等),吸弃上清。
2.至步骤 1。
步骤 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及适量蛋白酶抑制剂(依据实验选择),冰上孵育 30min(每 10min 用移液枪 吹打一次),4°C 11000rpm 离心 5min,弃上清。
步骤 2:于上述步骤离心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 涡旋一次),4°C 11000rpm 离心 5min,吸取上清于一新离心管中。
步骤 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步骤离心管中,用移液枪轻轻吹匀。
步骤 4:使用 BCA 定量试剂盒定量。
步骤 5:于步骤 3 离心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,轻轻吹匀,并应用于下游研究。
产品简介:
产品名称 |
规格 |
检测方法 |
适用样本 |
保存温度 |
货号 |
高脂肪样本蛋白提取试剂盒 |
50T/100T |
WB,IP等 |
动物组织 |
2-8℃ |
BH-D85306 |
自备仪器和试剂耗材:
仪器准备:
1.离心机
2.振荡器
3.匀浆机/匀浆器
4.涡旋混匀器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
试剂准备:
1.PBS 缓冲液
2.蛋白定量试剂盒
耗材准备:
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
使用方法:
旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
蛋白酶抑制剂在 2-8℃时是固体状态,从冰箱取出后恢复至室温或 37℃短时间水浴,变成液体状态后离心至管底部再开盖。
实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。本公司产品仅用于科研实验。
注意事项:
1. 正式实验前请选取几个样本做预实验,以优化实验条件,取得佳实验效果。
2. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
3. 禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
4. 样品或试剂被污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
5. 好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底残留清洁剂。
6. 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。
鱼类皮质醇(Cortisol)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人B细胞受体(BCR)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
热休克因子1 48T/96T
热休克蛋白A1 70KD 48T/96T
小鼠组蛋白H2b(histon-H2b)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
鸡α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人抗链球溶血素O/抗O(ASO)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠维生素B6(VB6)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
大鼠Toll样受体9(TLR-9/CD289)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
抗肝肾微粒体 48T/96T
一型胶原 48T/96T
高脂肪样本蛋白提取试剂盒整合素αL抗体 规格: 0.1ml Anti-Integrin alpha L/CD11a
髓鞘碱性蛋白抗体 规格: 0.1ml Anti-MBP
肿瘤转移相关蛋白1抗体 规格: 0.2ml Anti-MTA1
磷酸化DNA损伤关键蛋白Mre11抗体 规格: 0.1ml Anti-Phospho-Mre11 (Ser676)
有丝分裂氧化酶1抗体 规格: 0.2ml Anti-Nox1/NADPH oxidase 1
2型神经纤维瘤抗体 规格: 0.2ml Anti-NF2/merlin
神经纤毛蛋白-2抗体 规格: 0.1ml Anti-Neuropilin-2
一氧化氮合成酶-2抗体(诱导型) 规格: 0.1ml Anti-NOS-2/iNOS
抑癌基因p14抗体 规格: 0.1ml Anti-P14ARF
P73肿瘤抑制基因抗体 规格: 0.1ml Anti-P73 protein
配对盒基因1抗体 规格: 0.2ml Anti-PAX1
无粉一次性PVC手套 (50双/盒) 中号 盒
Amygdalin 扁桃苷 1g 瓶
MOPSO 3-(N-吗啉基)-2-羟基丙磺酸 25g 瓶
Trypsin Sepharose 4B 胰蛋白酶-琼脂糖凝胶 4B 25mL 瓶
Melibiose 蜜二糖 1g 瓶
Safranine T 藏红T(碱性红 2) 25g 瓶
Ibuprofen 布洛芬 25g 瓶
Casein Enzymatic Hydrolysate 酶水解酪素 100g 瓶
Brilliant Green Bile Salt Lactose Broth 煌绿乳糖胆盐肉汤 250g 瓶
核酸助沉剂 5×1ml 瓶