操作步骤:
A:组织中提取
1.收集 0.1g 组织,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及适量蛋白酶抑制剂(依据实验选择),冰上用组织研磨器或匀 浆管研磨。
2.将匀浆后样品转移至 1.5ml 离心管中,11000rpm 5min,吸弃上清保留沉淀。
3.至步骤 2。
B:细胞中提取
1.收集约 10 8个细胞,3000rpm 5min(悬浮细胞直接离心,贴壁细胞使用细胞刮刀或胰蛋白酶消化离心收集 均可。注意用预冷 PBS 清洗残留培养基和胰蛋白酶等),吸弃上清。
2.至步骤 1。
步骤 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及适量蛋白酶抑制剂(依据实验选择),冰上孵育 30min(每 10min 用移液枪 吹打一次),4°C 11000rpm 离心 5min,弃上清。
步骤 2:于上述步骤离心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 涡旋一次),4°C 11000rpm 离心 5min,吸取上清于一新离心管中。
步骤 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步骤离心管中,用移液枪轻轻吹匀。
步骤 4:使用 BCA 定量试剂盒定量。
步骤 5:于步骤 3 离心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,轻轻吹匀,并应用于下游研究。
产品简介:
产品名称 |
规格 |
检测方法 |
适用样本 |
保存温度 |
货号 |
酸性蛋白酶抑制剂 |
1ml |
|
蛋白 |
-20℃保存 |
BH-D85396 |
自备仪器和试剂耗材:
仪器准备:
1.离心机
2.振荡器
3.匀浆机/匀浆器
4.涡旋混匀器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
试剂准备:
1.PBS 缓冲液
2.蛋白定量试剂盒
耗材准备:
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
使用方法:
旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
蛋白酶抑制剂在 2-8℃时是固体状态,从冰箱取出后恢复至室温或 37℃短时间水浴,变成液体状态后离心至管底部再开盖。
实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。本公司产品仅用于科研实验。
注意事项:
1. 正式实验前请选取几个样本做预实验,以优化实验条件,取得佳实验效果。
2. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
3. 禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
4. 样品或试剂被污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
5. 好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底残留清洁剂。
6. 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。
人17羟皮质类固醇(17-OHCS)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人抑制酸性蛋白(IAP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
胱天蛋白酶7 48T/96T
猪血管内皮钙粘着蛋白复合体(VE-cad)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
孤啡肽 48T/96T
人D二聚体(D2D)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
大鼠高敏三碘甲状腺原氨酸(u-T3)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人抑瘤素M(OSM)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
大鼠TNF-B酶联分析ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
酸性蛋白酶抑制剂荧光素标记兔抗人、大、小鼠、猪、牛、羊、犬白介素-1受体拮抗剂抗体IgG 规格: 0.2ml Anti-IL-1RA (Interleukin-1 receptor antagonist) /FITC
荧光素标记白介素-12受体β2抗体IgG 规格: 0.2ml Anti-IL-12R Beta2/FITC
荧光素标记胰岛素样生长因子ⅡmRNA结合蛋白3抗体IgG 规格: 0.2ml Anti-IMP3/FITC
荧光素标记胰岛素受体抗体IgG 规格: 0.2ml Anti-ISR/FITC
荧光素标记激肽释放酶10抗体IgG 规格: 0.2ml Anti-KLK10/FITC
荧光素标记磷酸化特异性蛋白酪氨酸激酶抗体IgG 规格: 0.2ml Anti-Phospho-Lck (Tyr505) /FITC
荧光素标记丝裂原活化蛋白激酶3抗体IgG 规格: 0.2ml Anti-ERK1/MAPK3/FITC
荧光素标记组织胺H4受体抗体IgG 规格: 0.2ml Anti-HRH4/GPCR105/FITC
荧光素标记MEK1/ MAPKK 1抗体IgG 规格: 0.2ml Anti-MEK1/ MAPKK 1/FITC
荧光素标记磷酸化肌球蛋白磷酸酶抗体IgG 规格: 0.2ml Anti-Phospho-MYPT1 (Thr853) /FITC
荧光素标记有丝分裂原和应激活化型蛋白激酶1抗体IgG 规格: 0.2ml Anti-MSK1/FITC
RNase A 25mg 瓶
Proteinase K 蛋白酶 K 100mg 瓶
RNase A溶液 (10mg/ml) 1ml 瓶
Proteinase K 蛋白酶 K(原装) 100mg 瓶
蛋白酶 K溶液(10mg/ml) 1ml 瓶
酚:仿:异戊醇 125:24:1(pH<5.0) 100ml 瓶
兔抗IgG 1mg 支
高速增感屏 5×7 盒
胎牛血清 新西兰 500ml 瓶
Ionomycin calcium salt 钙离子霉素 1mg 瓶