操作步骤:
A:组织中提取
1.收集 0.1g 组织,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及适量蛋白酶抑制剂(依据实验选择),冰上用组织研磨器或匀 浆管研磨。
2.将匀浆后样品转移至 1.5ml 离心管中,11000rpm 5min,吸弃上清保留沉淀。
3.至步骤 2。
B:细胞中提取
1.收集约 10 8个细胞,3000rpm 5min(悬浮细胞直接离心,贴壁细胞使用细胞刮刀或胰蛋白酶消化离心收集 均可。注意用预冷 PBS 清洗残留培养基和胰蛋白酶等),吸弃上清。
2.至步骤 1。
步骤 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及适量蛋白酶抑制剂(依据实验选择),冰上孵育 30min(每 10min 用移液枪 吹打一次),4°C 11000rpm 离心 5min,弃上清。
步骤 2:于上述步骤离心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 涡旋一次),4°C 11000rpm 离心 5min,吸取上清于一新离心管中。
步骤 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步骤离心管中,用移液枪轻轻吹匀。
步骤 4:使用 BCA 定量试剂盒定量。
步骤 5:于步骤 3 离心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,轻轻吹匀,并应用于下游研究。
产品简介:
产品名称 |
规格 |
检测方法 |
适用样本 |
保存温度 |
货号 |
细胞悬液制备试剂盒 |
100ml |
|
|
|
BH-D85472 |
自备仪器和试剂耗材:
仪器准备:
1.离心机
2.振荡器
3.匀浆机/匀浆器
4.涡旋混匀器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
试剂准备:
1.PBS 缓冲液
2.蛋白定量试剂盒
耗材准备:
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
使用方法:
旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
蛋白酶抑制剂在 2-8℃时是固体状态,从冰箱取出后恢复至室温或 37℃短时间水浴,变成液体状态后离心至管底部再开盖。
实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。本公司产品仅用于科研实验。
注意事项:
1. 正式实验前请选取几个样本做预实验,以优化实验条件,取得佳实验效果。
2. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
3. 禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
4. 样品或试剂被污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
5. 好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底残留清洁剂。
6. 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。
大鼠尾加压素II(Urotensin II) ELISA试剂盒 96T/48T ELISA试剂盒 组装/原装
羊促黄体(LH)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
兔子基质金属蛋白酶4(MMP-4)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
鸭抗凝血素抗体(aPT1/aPT2)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人卵泡刺(FSH)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠基质金属蛋白酶5(MMP-5)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
大鼠单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
β-联蛋白 48T/96T
人第八因子相关抗原(FⅧAg)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP2)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠促肾上腺皮质(ACTH)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
细胞悬液制备试剂盒层粘连蛋白β1抗体 规格: 0.2ml Anti-Laminin Beta 1
磷酸化丙氨酸蛋白激酶C底物Marcks抗体 规格: 0.1ml Anti-Phospho-MARCKS (Ser162)
单核趋化蛋白1抗体(人) 规格: 0.2ml Anti-MCP-1/CCL2
中脑核仁蛋白1抗体 规格: 0.1ml Anti-Midnolin isoform Protein 1
多药耐药相关蛋白4抗体 规格: 0.1ml Anti-MRP4/ABCC4
核小体组装蛋白1抗体 规格: 0.2ml Anti-NAP1/NAP1L1
一氧化氮抗体 规格: 0.1ml Anti-Nitric oxide/NO
高分子量神经丝蛋白抗体 规格: 0.2ml Anti-NF-H
NADH复合体1抗体 规格: 0.2ml Anti-MT-ND1
P2Y4受体抗体 规格: 0.2ml Anti-P2Y4R/P2Ry4
磷酸化核糖体S6蛋白激酶β2抗体 规格: 0.1ml Anti-Phospho-p70 S6 Kinase Beta (Thr229)
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