操作步骤:
A:组织中提取
1.收集 0.1g 组织,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及适量蛋白酶抑制剂(依据实验选择),冰上用组织研磨器或匀 浆管研磨。
2.将匀浆后样品转移至 1.5ml 离心管中,11000rpm 5min,吸弃上清保留沉淀。
3.至步骤 2。
B:细胞中提取
1.收集约 10 8个细胞,3000rpm 5min(悬浮细胞直接离心,贴壁细胞使用细胞刮刀或胰蛋白酶消化离心收集 均可。注意用预冷 PBS 清洗残留培养基和胰蛋白酶等),吸弃上清。
2.至步骤 1。
步骤 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及适量蛋白酶抑制剂(依据实验选择),冰上孵育 30min(每 10min 用移液枪 吹打一次),4°C 11000rpm 离心 5min,弃上清。
步骤 2:于上述步骤离心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 涡旋一次),4°C 11000rpm 离心 5min,吸取上清于一新离心管中。
步骤 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步骤离心管中,用移液枪轻轻吹匀。
步骤 4:使用 BCA 定量试剂盒定量。
步骤 5:于步骤 3 离心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,轻轻吹匀,并应用于下游研究。
产品简介:
产品名称 |
规格 |
检测方法 |
适用样本 |
保存温度 |
货号 |
透析袋,截留分子量300KD;直径49mm;压平宽度77mm |
1卷,24M |
|
|
2-8℃ |
BH-D85524 |
自备仪器和试剂耗材:
仪器准备:
1.离心机
2.振荡器
3.匀浆机/匀浆器
4.涡旋混匀器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
试剂准备:
1.PBS 缓冲液
2.蛋白定量试剂盒
耗材准备:
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
使用方法:
旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
蛋白酶抑制剂在 2-8℃时是固体状态,从冰箱取出后恢复至室温或 37℃短时间水浴,变成液体状态后离心至管底部再开盖。
实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。本公司产品仅用于科研实验。
注意事项:
1. 正式实验前请选取几个样本做预实验,以优化实验条件,取得佳实验效果。
2. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
3. 禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
4. 样品或试剂被污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
5. 好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底残留清洁剂。
6. 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。
大鼠碱性成纤维细胞生长因子6(bFGF-6)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠抗甲状腺球蛋白抗体(ATGA/TGAB)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
巨噬细胞炎性蛋白-1α 48T/96T
二胺氧化酶 48T/96T
人血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人表面膜球蛋白D(mIgD)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人B-细胞趋化因子1(BLC-1/CXCL13)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
补体蛋白3 48T/96T
小鼠可溶性白细胞分化抗原30配体(sCD30L)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人羟脯氨酸(Hyp)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠抗线粒体抗体M2亚型(AMA-M2)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
透析袋,截留分子量300KD;直径49mm;压平宽度77mm 磷酸化分裂周期蛋白25C抗体 规格: 0.1ml Anti-Phospho-cdc25C (Ser216)
HER4抗体 规格: 0.2ml Anti-HER4/ErbB4
角蛋白16抗体 规格: 0.1ml Anti-CK16
钙粘蛋白相关的神经受体2抗体 规格: 0.2ml Anti-CNR-2/PCDHA 6
促肾上腺皮质释放受体1抗体 规格: 0.2ml Anti-CRHR1/CRFR1
周期素G抗体 规格: 0.2ml Anti-Cyclin G
肿瘤调亡素/死亡受体5抗体 规格: 0.1ml Anti-Death receptor 5/DR5/CD262
肿瘤坏死因子配体超家族成员10C 规格: 0.2ml Anti-DcR1/TNFRSF10C
表皮生长因子抗体 规格: 0.1ml Anti-EGF
DNA切除修复蛋白1抗体 规格: 0.2ml Anti-ERCC1
肺鼠疫耶尔森氏F1荚膜蛋白抗体(N端) 规格: 0.2ml Anti-F1 operon positive regulatory protein(NT)
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