操作步骤:
A:组织中提取
1.收集 0.1g 组织,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及适量蛋白酶抑制剂(依据实验选择),冰上用组织研磨器或匀 浆管研磨。
2.将匀浆后样品转移至 1.5ml 离心管中,11000rpm 5min,吸弃上清保留沉淀。
3.至步骤 2。
B:细胞中提取
1.收集约 10 8个细胞,3000rpm 5min(悬浮细胞直接离心,贴壁细胞使用细胞刮刀或胰蛋白酶消化离心收集 均可。注意用预冷 PBS 清洗残留培养基和胰蛋白酶等),吸弃上清。
2.至步骤 1。
步骤 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及适量蛋白酶抑制剂(依据实验选择),冰上孵育 30min(每 10min 用移液枪 吹打一次),4°C 11000rpm 离心 5min,弃上清。
步骤 2:于上述步骤离心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 涡旋一次),4°C 11000rpm 离心 5min,吸取上清于一新离心管中。
步骤 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步骤离心管中,用移液枪轻轻吹匀。
步骤 4:使用 BCA 定量试剂盒定量。
步骤 5:于步骤 3 离心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,轻轻吹匀,并应用于下游研究。
产品简介:
产品名称 |
规格 |
检测方法 |
适用样本 |
保存温度 |
货号 |
透析袋,截留分子量20KD;直径22mm;压平宽度34mm |
1卷,36M |
|
|
2-8℃ |
BH-D85536 |
自备仪器和试剂耗材:
仪器准备:
1.离心机
2.振荡器
3.匀浆机/匀浆器
4.涡旋混匀器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
试剂准备:
1.PBS 缓冲液
2.蛋白定量试剂盒
耗材准备:
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
使用方法:
旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
蛋白酶抑制剂在 2-8℃时是固体状态,从冰箱取出后恢复至室温或 37℃短时间水浴,变成液体状态后离心至管底部再开盖。
实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。本公司产品仅用于科研实验。
注意事项:
1. 正式实验前请选取几个样本做预实验,以优化实验条件,取得佳实验效果。
2. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
3. 禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
4. 样品或试剂被污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
5. 好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底残留清洁剂。
6. 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。
大鼠脂肪甘油三酯酯酶(ATGL)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人血管紧张素原(aGT)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
可溶性血管内皮生长因子受体1 48T/96T
小鼠促甲状腺素释放(TRH)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
食欲素A 48T/96T
人α甘露糖苷酶(α Manase)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人白三烯E4(LTE4)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
肝生素激活物 48T/96T
小鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体4(TRAIL-R4)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠超敏C反应蛋白(hs-CRP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人胶原酶I(Collagenase I)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
透析袋,截留分子量20KD;直径22mm;压平宽度34mm降钙素受体(抗原) 规格: 0.5mg CT-R (Calcitonin receptor)
葡萄糖转运蛋白4(抗原) 规格: 0.5mg GLUT4(Glucose transporter type 4)
规格: 0.5mg IRS P53 (Insulin receptor substrate P53)(多肽)
Nogo-66 (1-40)多肽 规格: 0.5mg Nogo-66 1-40 peptide
蛋白磷酸酯酶-2B 催化亚单位(抗原) 规格: 0.5mg PP-2B alpha 1
神经生长因子的一种(抗原) 规格: 0.5mg TrK A.B.C
表皮生长因子受体3(抗原) 规格: 0.5mg ErbB-3/HER3(Epidermal growth factor receptor3)
CD14/内受体抗原 规格: 0.5mg CD14(cluster of differentiation antigen 14)
畸胎瘤衍化生长因子抗原(表皮生长因子相关肽)N端 规格: 0.5mg Cripto-1(N-Terminus)
转录因子E2F-6抗原 规格: 0.5mg E2F6
原纤维蛋白1抗原 规格: 0.5mg FBN1 (fibrillin 1)
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