商品属性:
产品名称 |
规格 |
检测方法 |
适用样本 |
保存温度 |
货号 |
Western转移缓冲液(5×),尼龙膜 |
500ml |
|
|
2-8℃ |
BH-D85561 |
产品特点:
1.提取过程简单方便,将蛋白提取的时间缩短至 30 分钟-1 小时。
2.含蛋白稳定剂,提取的蛋白稳定。
3.紫外检测蛋白浓度时,背景干扰低。
4.总蛋白提取液含多种有效成分,可以充分释放胞浆蛋白、核蛋白和膜蛋白,又可结合释出的蛋白防止沉淀。
5.蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含 6 种独立的蛋白酶抑制剂 AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、Pepstatin A、Bestatin、E-64,每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性,包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。本公司产品仅用于科研实验。
使用方法:
1.旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
2.蛋白酶抑制剂在 2-8℃时是固体状态,从冰箱取出后恢复至室温或 37℃短时间水浴,变成液体状态后离心至管底部再开盖。
3.实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
4.蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀,不影响使用,溶解后正常使用。
5.如果试剂盒不能短时间内用完,蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。
6.可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
1. 提取液准备: 每 500ul 冷的蛋白提取液中加入 2ul 蛋白酶抑制剂混合物 B 和 2ul 蛋白酶抑制剂混合物 C,混匀后置冰上备用。
2. 取 100-200mg 皮肤组织样本,用 PBS 洗干净,然后用手术剪刀尽可能剪碎,加入 500ul 蛋白提取
液,用组织匀浆器/匀浆机匀浆至无明显肉眼可见固体。
3. 将组织匀浆吸入一预冷的干净离心管中,在 4℃条件下振荡 30-40 分钟。
4. 在 4℃,10000-14000×g 条件下离心 15 分钟。
5. 将上清吸入另一预冷的干净离心管,即得到皮肤组织蛋白。
6. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。
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