操作步骤:
A:组织中提取
1.收集 0.1g 组织,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及适量蛋白酶抑制剂(依据实验选择),冰上用组织研磨器或匀 浆管研磨。
2.将匀浆后样品转移至 1.5ml 离心管中,11000rpm 5min,吸弃上清保留沉淀。
3.至步骤 2。
B:细胞中提取
1.收集约 10 8个细胞,3000rpm 5min(悬浮细胞直接离心,贴壁细胞使用细胞刮刀或胰蛋白酶消化离心收集 均可。注意用预冷 PBS 清洗残留培养基和胰蛋白酶等),吸弃上清。
2.至步骤 1。
步骤 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及适量蛋白酶抑制剂(依据实验选择),冰上孵育 30min(每 10min 用移液枪 吹打一次),4°C 11000rpm 离心 5min,弃上清。
步骤 2:于上述步骤离心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 涡旋一次),4°C 11000rpm 离心 5min,吸取上清于一新离心管中。
步骤 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步骤离心管中,用移液枪轻轻吹匀。
步骤 4:使用 BCA 定量试剂盒定量。
步骤 5:于步骤 3 离心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,轻轻吹匀,并应用于下游研究。
产品简介:
产品名称 |
规格 |
检测方法 |
适用样本 |
保存温度 |
货号 |
10%过硫酸铵 |
10ml/ 100ml |
|
|
2-8℃ |
BH-D85612 |
自备仪器和试剂耗材:
仪器准备:
1.离心机
2.振荡器
3.匀浆机/匀浆器
4.涡旋混匀器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
试剂准备:
1.PBS 缓冲液
2.蛋白定量试剂盒
耗材准备:
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
使用方法:
旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
蛋白酶抑制剂在 2-8℃时是固体状态,从冰箱取出后恢复至室温或 37℃短时间水浴,变成液体状态后离心至管底部再开盖。
实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。本公司产品仅用于科研实验。
注意事项:
1. 正式实验前请选取几个样本做预实验,以优化实验条件,取得佳实验效果。
2. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
3. 禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
4. 样品或试剂被污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
5. 好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底残留清洁剂。
6. 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。
猪细胞色素氧化酶(CC0)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人生长释放因子(GH-RF)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人可溶性白细胞分化抗原28(sCD28)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
血液结合素 48T/96T
大鼠FMS样酪氨酸激酶3配体(Flt3L)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
低密度脂蛋白受体相关蛋白6 48T/96T
人5,10亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人血管内皮生长因子165(VEGF165) ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠神经激肽A(NKA) ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
大鼠性结合球蛋白(SHBG)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
克拉拉细胞蛋白CC16 48T/96T
10%过硫酸铵6磷酸果糖激酶2抗体 规格: 0.2ml Anti-PFK2/PFKFB3
尿激酶型纤溶酶原激活因子受体抗体 规格: 0.1ml Anti-PLAUR
蛋白激酶AKT底物1抗体 规格: 0.2ml Anti-PRAS40/AKT1 substrate 1
癌胚抗原相关粘附分子1抗体 规格: 0.2ml Anti-CD66a/CEACAM1
磷酸化指状蛋白RET抗体 规格: 0.1ml Anti-Phospho-Ret (Tyr905)
S-腺苷蛋氨酸脱羧酶抗体 规格: 0.2ml Anti-SAMDC
信号转导分子SMAD3抗体 规格: 0.1ml Anti-Smad3
大肠杆志贺样Ⅱ型突变体(O139型)抗体 规格: 0.2ml Anti-Shiga-like toxin IIe variant subunit A
磷酸化类固醇受体辅助活化因子-3 规格: 0.1ml Anti-Phospho-SRC-3 (Thr24)
突触泡蛋白2A抗体 规格: 0.2ml Anti-SV2A
翻译控制肿瘤蛋白抗体 规格: 0.2ml Anti-TCTP
乳杆选择性培养基(LBs琼脂) 250(g)
马铃薯琼脂 100(g)
酪胨-卵磷脂-吐温20液体培养基基础 250(g)
拟杆选择性培养基基础(改良GAM琼脂基础) 250(g)
梭增培养基 250(g)
肠球培养基基础(叠氮钠-结晶紫-七叶苷琼脂) 250(g)
R2A 琼脂 250(g)
去氧胆酸盐柠檬酸盐琼脂 250(g)
改良Y培养基 250(g)
厌氧液体培养基 250(g)