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切片过氧亚硝基阴离子检测试剂盒 (ONOO–检测试剂盒)-红色荧光
100T/ 200T
1.流式细胞仪2.荧光显微镜3.激光共聚焦
-20℃ 避光
BH-02X9625
试剂盒以外自备仪器和试剂耗材:
仪器准备: 1.激光共聚焦显微镜或荧光分光光度计或酶标仪或流式细胞仪,
2.离心机
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒
试剂准备:
PBS 缓冲液或者 HBSS
耗材准备:
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
4.黑色 96 孔板
产品特点:
1.使用方便:可用激光共聚焦显微镜直接观察、荧光分光光度计、荧光酶标仪或流式细胞仪
检测;
2.背景低,灵敏度高;
3.线性范围宽,使用方便。
使用方法:
样本处理:
1、刚取得的新鲜组织样本用PBS洗净。
2、准确称取50mg组织,加入1mL匀浆缓冲液A,用玻璃匀浆器充分匀浆。
3、在100×g,4℃离心3分钟,弃沉淀,取上清。
样本检测:
1、在96孔板中加入200μL匀浆上清液、2μL DHE探针,用移液器吹打,使之充分混匀。
2、在37℃避光孵育30分钟。
3、置于荧光酶标仪中,后于激发波长为488~535nm、发射波长610nm检测荧光强度。
蛋白定量:
1、另取50μL上清匀浆液,用PBS大约稀释30倍。
2、取100μL进行蛋白定量。
结果处理:
以荧光强度/毫克蛋白表示组织活性氧强度。
注意事项:1. 正式实验前请选取几个样本做预实验,以优化实验条件,取得佳实验效果。
2. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,
避免开盖时试剂损失。
3. 禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
4. 样品或试剂被污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
5. 好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗
并彻底残留清洁剂。
6. 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。
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