注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
服务流程:
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。
产品名称 |
规格 |
货号 |
48T沙门氏菌PCR检测试剂盒 |
48T |
BH-P64437 |
它具有下列特点:
1. 即开即用,用户只需要提供样品RNA模板。
2. 引物和探针经过优化,灵敏性高。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. 特异性高,引物是根据高度保守区设计,不会跟其他病毒的RNA发生交叉反应。
5. 本产品足够 50 次 20μL 体系的探针法荧光定量 RT-PCR 反应。
6. 本产品只能用于科研。
实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(*好用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
神经细胞粘附分子1抗原CD56/NCAM1(Neural Cell Adhesion Molecule 1) 0.5mg
L选择素抗原CD62L (ELAM-1/L-Selectin ) 0.5mg
E选择素抗原E-Selectin 0.5mg
人刺激分子B7-1蛋白抗原CD80/B7-1(human) 0.5mg
刺激分子B7-1蛋白抗原CD80/B7-1 0.5mg
肿瘤转移抑制蛋白1抗原CD82/KAI1 peptide 0.5mg
CD86抗原CD86/B7-2 0.5mg
周期素依赖激酶1抗原Cdc2/P34CDC2/CDK1(Cell division control protein 2) 0.5mg
细胞周期调控因子34抗原Cdc34 peptide 0.5mg
周期素依赖性激酶1抗原CDK1 (Cyclin-Dependent Kinase 1) 0.5mg
周期素依赖性激酶5抗原CDK5(Cyclin Dependent Kinase 5) 0.5mg
周期素依赖性激酶6抗原CDK6 (Cyclin Dependent Kinase 6) 0.5mg
周期素依赖性激酶7抗原CDK7/Cyclin H/MAT1 0.5mg
周期蛋白依赖激酶抑制因子1C抗原Cdkn1c/p57/Kip2 (Cyclindependent kinase inhibitor 1C) 0.5mg
周期素依赖性激酶8抗原CDK8(Cyclin Dependent Kinase 8) 0.5mg
48T沙门氏菌PCR检测试剂盒1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄 CAS 14937-32-7 订购|咨询 规格: 20mg
天冬酰胺;L-Asparagine CAS 70-47-3 订购|咨询 规格: 100mg
石松灵碱;Lycodoline CAS 6900-92-1 订购|咨询 规格: 20mg
桑根 C ;Sanggen C CAS 80651-76-9 订购|咨询 规格: 20mg
山楂酸;Maslinic acid CAS 4373-41-5 订购|咨询 规格: 20mg
20(S)-人参皂苷F2;20(S)-G CAS 62025-49-4 订购|咨询 规格: 20mg
25-羟基原人参二醇;25-OH-PPD CAS 订购|咨询 规格: 10mg
氢东莨菪碱;Scopolamine CAS 114-49-8 订购|咨询 规格: 20mg
蒲公英甾醇;Taraxasterol CAS 1059-14-9 订购|咨询 规格: 20mg
马兜铃内酰胺;Aristolactam CAS 13395-02-3 订购|咨询 规格: 20mg
芒柄花苷;Onin CAS 486-62-4 订购|咨询 规格: 20mg
雷公藤次碱;Wilforine CAS 11088-09-8 订购|咨询 规格: 10mg
罗汉果苷ⅴ;Mogroside V CAS 88901-36-4 订购|咨询 规格: 20mg
10-甲氧基喜树碱;10-Methoxy CAS 订购|咨询 规格: 20mg
鸡II型胶原蛋白; CAS 订购|咨询 规格: 10mg
黄决明素;Chrysoobtusin CAS 70588-06-6 订购|咨询 规格: 20mg