PK-8人胰腺导管腺癌细胞上海博湖生物科技有限公司

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产品名称：PK-8人胰腺导管腺癌细胞
产品型号：P-X9170
产品厂商：派瑞曼
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简单介绍：

PK-8人胰腺导管腺癌细胞公司正在出售的产品：大鼠肺上皮细胞；L2 Notch信号通路Delta样配体3抗体 VGKC-ab ELISA Kit 电压门控钾通道抗体定量elisa kit HDHD3蛋白抗体 NCI-H28细胞

详情介绍：

细胞接收后的处理：

1）收到细胞后，75%酒精瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。
2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。
3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的完全培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。

4）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议T25培养瓶1：2传代。

PK-8人胰腺导管腺癌细胞

英文简称

规格

货号

PK-8

1×106

P-X9170

产品详情：

种属来源；人

组织来源；胰腺

性别年龄；男性

生长特性；贴壁生长

细胞形态；不规则细胞样

细胞规格；1 X 106cells/T25或1 mL冻存管

培养条件；RPMI1640 Medium +10% fetal bovine serum37 ℃, 5% CO2

冻存条件；90% FBS + 10% DMSO

传代方法；1:3传代, 2-3天传1代

干冰运输及复苏好存活细胞

（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。

（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。

一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备DMEM培养基；胎牛血清，10%；双抗，1%。
2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
二．细胞处理：

1）冻存细胞的复苏：：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜

。天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。对于贴壁细胞传代可以参考以下方法：
1、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2、加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3、轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3）细胞冻存:收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。下面T25瓶为例：
1、细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中，可使用血球计数板计数，来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml.
2、1000rpm离心3-5min，去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞，按每1ml冻存液含1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中，标注好名称、代数、日期等信息。
3、将要冻存的细胞置于程序降温盒中，-80度冰箱中过夜，之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。

实验原理：

公司正在出售的产品：

转录因子OTX1抗体

大鼠巨噬细胞炎性蛋白1β(MIP1β)elisa检测试剂盒

OTX1

细胞单胺氧化酶A型（MAO－A）活性化学发光法定量检测试剂盒

钙粘附分子10抗体

牛表皮生长因子(EGF)elisa检测试剂盒免费代测

Cadherin 10

小鼠巨噬细胞移动抑制因子(MIF)elisa检测试剂盒

细胞IKKα激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）

大鼠Ⅱ型胶原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)elisa检测试剂盒免费代测

人果糖胺(FRA)elisa分析检测试剂盒

皮质醇结合球蛋白抗体 ERPINA6/Cortisol Binding Globulin

大鼠红细胞生成素受体(EPOR)elisa检测试剂盒

鞘磷脂合成酶2抗体 Sphingomyelin Synthase 2

植物叶绿体膜蛋白提取试剂盒100T

G蛋白偶联受体112抗体 GPR112

缝隙样蛋白Slitl2抗体 SLITL2

G蛋白信号转导调节因子16抗体 RGS16

尾型源盒转录因子2抗体 CDX2

抑凋亡基因bag1抗体 Bag1

细胞分裂周期样激酶2抗体 CLK2

原钙粘附蛋白1抗体 PCDH1

SPOPL蛋白抗体 SPOPL

泛素载体蛋白L6抗体 Ube2L6

TRIM26蛋白抗体 TRIM26

AF750标记的血管紧张素Ⅱ1A型受体抗体 Angiotensin II type 1A receptor, Alexa Fluor 750 conjugated

AF680标记的胚胎干细胞关键蛋白抗体 Nanog, Alexa Fluor 680 conjugated

PK-8人胰腺导管腺癌细胞紧密连接蛋白1抗体 CLDN1

跨膜丝氨酸蛋白酶11D抗体 TMPRSS11D

内质网提取试剂盒50T

载玻片细胞ER BETA 蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒

药品甘素（dulcin）含量高效液相色谱法定量检测试剂盒

实验步骤：

1 将目的基因构建到合适的慢病毒载体上，利用293T细胞进行慢病毒包装，获得含目的基因的慢病毒；
2 转染前24 h进行细胞铺板，转染时细胞密度控制在80%左右；
3 天加入适量病毒悬液感染细胞，并置于37 ℃，5% CO2培养箱中孵育；
4 24 h后用新鲜培养基替换含有病毒的培养基，并继续培养；
5 在转染3-4天后开始加药筛选培养，直至显微镜下观察荧光细胞比例为100%，获得稳转细胞系。

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转录因子OTX1抗体	大鼠巨噬细胞炎性蛋白1β(MIP1β)elisa检测试剂盒
OTX1	细胞单胺氧化酶A型（MAO－A）活性化学发光法定量检测试剂盒
钙粘附分子10抗体	牛表皮生长因子(EGF)elisa检测试剂盒免费代测
Cadherin 10	小鼠巨噬细胞移动抑制因子(MIF)elisa检测试剂盒
细胞IKKα激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）	大鼠Ⅱ型胶原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)elisa检测试剂盒免费代测
人果糖胺(FRA)elisa分析检测试剂盒	皮质醇结合球蛋白抗体 ERPINA6/Cortisol Binding Globulin
大鼠红细胞生成素受体(EPOR)elisa检测试剂盒	鞘磷脂合成酶2抗体 Sphingomyelin Synthase 2
植物叶绿体膜蛋白提取试剂盒100T	G蛋白偶联受体112抗体 GPR112
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细胞分裂周期样激酶2抗体 CLK2	原钙粘附蛋白1抗体 PCDH1
SPOPL蛋白抗体 SPOPL	泛素载体蛋白L6抗体 Ube2L6
TRIM26蛋白抗体 TRIM26	AF750标记的血管紧张素Ⅱ1A型受体抗体 Angiotensin II type 1A receptor, Alexa Fluor 750 conjugated
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跨膜丝氨酸蛋白酶11D抗体 TMPRSS11D	内质网提取试剂盒50T
载玻片细胞ER BETA 蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒	药品甘素（dulcin）含量高效液相色谱法定量检测试剂盒

产品名称：PK-8人胰腺导管腺癌细胞