人神经母细胞瘤细胞；sh-sy5y转染突变型上海博湖生物科技有限公司

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产品名称：人神经母细胞瘤细胞；sh-sy5y转染突变型
产品型号：P-X10787
产品**：派瑞曼
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简单介绍：

人神经母细胞瘤细胞；sh-sy5y转染突变型公司正在出售的产品：大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs） BV2，小鼠小胶质细胞结肠抗原10抗体 Anti-SDCCAG10 乙型肝炎病毒X蛋白上调基因4 URG4

详情介绍：

人神经母细胞瘤细胞；sh-sy5y转染突变型

英文简称

规格

货号

sh-sy5y转染突变型

1×106

P-X10787

产品详情：

细胞别称；SHSY5Y; SHSY-5Y; SH-Sy5y; SK-SH-SY5Y; SY5Y；人神经母细胞瘤细胞

种属来源；人

年龄性别；女；4岁

组织来源；脑神经母细胞瘤，转移部位骨髓

生长特性；半贴壁生长（贴壁和悬浮同时存在）

细胞形态；上皮细胞样

细胞代数；10代以内

背景介绍；SH-SY5Y是1970年建自骨瘤转移灶的神经母细胞瘤SK-N-SH细胞系经三次克隆后的亚系(SK-N-SH→SH-SY→SH-SY5→SH-SY5Y)。该细胞显示中等水平的多巴胺-β-羟基酶活性。SH-SY5Y细胞的饱和密度大于1X106细胞/cm2。

STR位点；Amelogenin：X；CSF1PO：11；D13S317：11；D16S539：8，13；D18S51：13，16；D19S433：13，14；D21S11：31，31.2；D2S1338：17，19；D3S1358：15，16；D5S818：12；D7S820：7，10；D8S1179：15；FGA：23.2，24；TH01：7，10；TPOX：8，11；vWA：14，18；

生物等级；1

特别备注；该细胞为贴壁和悬浮同时存在，换液和传代时需要分别回收贴壁和悬浮细胞。

细胞规格；1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装

支原体检测；无

保藏机构；ATCC; CRL-2266 DSMZ; ACC-209 ECACC; 94030304 ；中国典型培养物保藏中心细胞库

培养基；43%MEM+43%F12+10%FBS+1% MEM NEAA(非必需氨基酸)+1%丙酮酸钠+1% GlutaMAX-1+PS

培养条件；气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃

冻存条件；无血清冻存液，液氮储存

干冰运输及复苏好存活细胞

（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。

（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。

细胞接收后的处理：
1）收到细胞后，75%酒精瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。
2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。
3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的完全培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
4）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议T25培养瓶1：2传代。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备DMEM培养基；胎牛血清，10%；双抗，1%。
2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
二．细胞处理：

1）冻存细胞的复苏：：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜

。天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。对于贴壁细胞传代可以参考以下方法：
1、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2、加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3、轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3）细胞冻存:收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。下面T25瓶为例：
1、细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中，可使用血球计数板计数，来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml.
2、1000rpm离心3-5min，去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞，按每1ml冻存液含1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中，标注好名称、代数、日期等信息。
3、将要冻存的细胞置于程序降温盒中，-80度冰箱中过夜，之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。

实验原理：

实验步骤：

1 将目的基因构建到合适的慢病毒载体上，利用293T细胞进行慢病毒包装，获得含目的基因的慢病毒；
2 转染前24 h进行细胞铺板，转染时细胞密度控制在80%左右；
3 天加入适量病毒悬液感染细胞，并置于37 ℃，5% CO2培养箱中孵育；
4 24 h后用新鲜培养基替换含有病毒的培养基，并继续培养；
5 在转染3-4天后开始加药筛选培养，直至显微镜下观察荧光细胞比例为100%，获得稳转细胞系。

公司正在出售的产品：

大鼠N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)elisa检测试剂盒

突触融合蛋白1抗体 Anti-Syntaxin 1A(brain)

小鼠前列腺特异性抗原(PSA)elisa检测试剂盒

肌微管素相关蛋白4抗体

人EOTAXIN1/CCL1elisa检测试剂盒

皮肤桥蛋白抗体

组织Akt3/PKBγ激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）

YY1AP1

MTMR4

YY1相关蛋白1抗体

22号染色体开放阅读框28抗体

ATP依赖解旋酶RENT1抗体 Anti-RENT1/hUPF1

C22orf28

NK细胞受体2A抗体 Anti-NKG2A

转录延伸因子3抗体 Anti-TCEB3/Elongin A

Dermatopontin

大鼠肥大细胞类胰蛋白酶(MCT)elisa生化检测试剂盒

唾液酸结合性球蛋白样凝集素14抗体 Anti-SIGLEC14

MCT ELISA Kit

转化神经突起蛋白抗体 Anti-Nrn1/Cpg15/Neuritin

山羊黄嘌呤氧化酶(XOD)elisa生化检测试剂盒

磷酸化RhoA蛋白抗体 Anti-Phospho-RhoA(Ser188)

XODELISAKit

早期未分化视网膜及晶状体蛋白EURL抗体 Anti-TSPEAR/C21orf9

P35蛋白共沉淀分析试剂盒

人体组织N-乙酰转移酶1（NAT1）活性比色法定量检测试剂盒

大鼠纤溶酶原激活物抑制因子(PAI)elisa检测试剂盒

人神经母细胞瘤细胞；sh-sy5y转染突变型小鼠B细胞瘤-XL(Bcl-xl)elisa检测试剂盒

粘附分子JAML蛋白抗体

载脂蛋白C4抗体

JAML

APOC4

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英文简称	规格	货号
sh-sy5y转染突变型	1×106	P-X10787

大鼠N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)elisa检测试剂盒	突触融合蛋白1抗体 Anti-Syntaxin 1A(brain)
小鼠前列腺特异性抗原(PSA)elisa检测试剂盒	肌微管素相关蛋白4抗体
人EOTAXIN1/CCL1elisa检测试剂盒	皮肤桥蛋白抗体
组织Akt3/PKBγ激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）	YY1AP1
MTMR4	YY1相关蛋白1抗体
22号染色体开放阅读框28抗体	ATP依赖解旋酶RENT1抗体 Anti-RENT1/hUPF1
C22orf28	NK细胞受体2A抗体 Anti-NKG2A
转录延伸因子3抗体 Anti-TCEB3/Elongin A	Dermatopontin
大鼠肥大细胞类胰蛋白酶(MCT)elisa生化检测试剂盒	唾液酸结合性球蛋白样凝集素14抗体 Anti-SIGLEC14
MCT ELISA Kit	转化神经突起蛋白抗体 Anti-Nrn1/Cpg15/Neuritin
山羊黄嘌呤氧化酶(XOD)elisa生化检测试剂盒	磷酸化RhoA蛋白抗体 Anti-Phospho-RhoA(Ser188)
XODELISAKit	早期未分化视网膜及晶状体蛋白EURL抗体 Anti-TSPEAR/C21orf9
P35蛋白共沉淀分析试剂盒	人体组织N-乙酰转移酶1（NAT1）活性比色法定量检测试剂盒
大鼠纤溶酶原激活物抑制因子(PAI)elisa检测试剂盒	人神经母细胞瘤细胞；sh-sy5y转染突变型小鼠B细胞瘤-XL(Bcl-xl)elisa检测试剂盒
粘附分子JAML蛋白抗体	载脂蛋白C4抗体
JAML	APOC4

产品名称：人神经母细胞瘤细胞；sh-sy5y转染突变型