HACAT+LUC人永生化表皮细胞荧光素酶标记上海博湖生物科技有限公司

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产品名称：HACAT+LUC人永生化表皮细胞荧光素酶标记
产品型号：P-X724
产品厂商：派瑞曼
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简单介绍：

HACAT+LUC人永生化表皮细胞荧光素酶标记公司正在出售的产品：DH-82狗肾恶性组织细胞增生症细胞贴壁生长巨噬细胞样DH-82:DH82狗细胞系组织来源：：恶性组织细胞增生症大鼠胶质细胞系来源的神经营养因子(GDNF)elisa分析检测试剂盒GDNF ELISA KIT

详情介绍：

细胞接收后的处理：

1）收到细胞后，75%酒精瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。
2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。
3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的完全培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。

4）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议T25培养瓶1：2传代。

HACAT+LUC人永生化表皮细胞荧光素酶标记

英文简称

规格

货号

HACAT+LUC:HACATLUC

1×106

P-X724

产品详情：

细胞介绍

该细胞源自一位62岁患有黑色素瘤男性的病灶外围正常皮肤，角蛋白、角化细胞交联外膜蛋白、中间丝相关蛋白阳性。

该细胞通过慢病毒转染的方式携带Luc基因。

细胞特性

1）来源：正常表皮组织

2）形态：上皮细胞样，贴壁生长

3）含量：>1×10⁶ 细胞数

4）规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

5) 用途：仅供科研使用。

干冰运输及复苏好存活细胞

（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。

（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。

一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备DMEM培养基；胎牛血清，10%；双抗，1%。
2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
二．细胞处理：

1）冻存细胞的复苏：：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜

。天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。对于贴壁细胞传代可以参考以下方法：
1、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2、加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3、轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3）细胞冻存:收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。下面T25瓶为例：
1、细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中，可使用血球计数板计数，来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml.
2、1000rpm离心3-5min，去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞，按每1ml冻存液含1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中，标注好名称、代数、日期等信息。
3、将要冻存的细胞置于程序降温盒中，-80度冰箱中过夜，之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。

实验原理：

公司正在出售的产品：

磷酸甘油酸脱氢酶抗体

PELO蛋白抗体

PHGDH

转录中介因子Tif1γ抗体 Anti-TIF1 gamma/Trim33

卷曲螺旋结构域蛋白28B抗体

CCDC144B

CCDC28B

FLJ36492蛋白抗体

凋亡相关蛋白6抗体 Anti-PDCD6/ALG2

PELO

磷酸化蛋白酪氨酸激酶9抗体 Anti-phospho-PTK9/TWF1(Tyr321)

Rabbit Anti-Dog IgG H&L / RBITC

丝氨酸蛋白酶抑制剂B10抗体 Anti-SERPINB10

eIF2B蛋白抗体

罗丹明标记的兔抗狗IgG H&L

eIF2B epsilon

大鼠Ⅲ型前胶原C端肽(PⅢCP)elisa分析检测试剂盒

ZSWIM3蛋白抗体 Anti-ZSWIM3

PⅢCP ELISA Kit

磷酸化酪氨酸激酶B抗体 Anti-phospho-TrkB (Tyr705)

人钙卫蛋白elisa分析检测试剂盒

磷酸化ras基因相关蛋白Rab24抗体 Anti-phospho-Rab24(Ser95)

HumanCalprotectinELISAkit

碱性螺旋-环-螺旋转录因子SCXA抗体 Anti-SCXA/Scleraxis

鸡Toll样受体4(TLR4)elisa检测试剂盒

小鼠成纤维细胞生长因子6(FGF6)elisa检测试剂盒

Hepatitis B virus RFLP基因分析试剂盒

HACAT+LUC人永生化表皮细胞荧光素酶标记大鼠CD44分子(CD44)elisa检测试剂盒

地中海热蛋白MEFV抗体

1号染色体开放阅读框111抗体

MEFV

C1ORF111

实验步骤：

1 将目的基因构建到合适的慢病毒载体上，利用293T细胞进行慢病毒包装，获得含目的基因的慢病毒；
2 转染前24 h进行细胞铺板，转染时细胞密度控制在80%左右；
3 天加入适量病毒悬液感染细胞，并置于37 ℃，5% CO2培养箱中孵育；
4 24 h后用新鲜培养基替换含有病毒的培养基，并继续培养；
5 在转染3-4天后开始加药筛选培养，直至显微镜下观察荧光细胞比例为100%，获得稳转细胞系。

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2.如有必要,请您留下您的详细联系方式!

磷酸甘油酸脱氢酶抗体	PELO蛋白抗体
PHGDH	转录中介因子Tif1γ抗体 Anti-TIF1 gamma/Trim33
卷曲螺旋结构域蛋白28B抗体	CCDC144B
CCDC28B	FLJ36492蛋白抗体
凋亡相关蛋白6抗体 Anti-PDCD6/ALG2	PELO
磷酸化蛋白酪氨酸激酶9抗体 Anti-phospho-PTK9/TWF1(Tyr321)	Rabbit Anti-Dog IgG H&L / RBITC
丝氨酸蛋白酶抑制剂B10抗体 Anti-SERPINB10	eIF2B蛋白抗体
罗丹明标记的兔抗狗IgG H&L	eIF2B epsilon
大鼠Ⅲ型前胶原C端肽(PⅢCP)elisa分析检测试剂盒	ZSWIM3蛋白抗体 Anti-ZSWIM3
PⅢCP ELISA Kit	磷酸化酪氨酸激酶B抗体 Anti-phospho-TrkB (Tyr705)
人钙卫蛋白elisa分析检测试剂盒	磷酸化ras基因相关蛋白Rab24抗体 Anti-phospho-Rab24(Ser95)
HumanCalprotectinELISAkit	碱性螺旋-环-螺旋转录因子SCXA抗体 Anti-SCXA/Scleraxis
鸡Toll样受体4(TLR4)elisa检测试剂盒	小鼠成纤维细胞生长因子6(FGF6)elisa检测试剂盒
Hepatitis B virus RFLP基因分析试剂盒	HACAT+LUC人永生化表皮细胞荧光素酶标记大鼠CD44分子(CD44)elisa检测试剂盒
地中海热蛋白MEFV抗体	1号染色体开放阅读框111抗体
MEFV	C1ORF111

产品名称：HACAT+LUC人永生化表皮细胞荧光素酶标记